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公开(公告)号:CN113563431B
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202110752863.4
申请日:2021-07-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/40 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N7/01 , C12N15/866 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫保护蛋白杂合基因、重组杆状病毒及疫苗。成功构建了2株可溶性表达PRRSV GP5和M蛋白基因的重组杆状病毒BMP541与FMP542,制备的重组蛋白可以形成病毒样颗粒,诱导仔猪产生体液免疫和细胞免疫,并且能够抵抗高致病性PRRSV和类NADC30毒株的攻击,为PRRSV亚单位疫苗的研制奠定了重要基础。
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公开(公告)号:CN114014916B
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202111422353.7
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/005 , G01N33/68 , C07K16/08
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60‑120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号:CN109762052B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN201910046124.6
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第1‑120aa或60‑120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号:CN109852622B
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN201910046089.8
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/34 , C12N15/866 , C07K14/01 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种可溶性PCV3Cap蛋白及其编码基因和应用。本发明将PCV3 Cap基因密码子进行昆虫细胞偏嗜性优化、修饰,得到新的重组基因。该重组基因能够表达可溶性的3Capm蛋白,该3Capm蛋白可以包装形成病毒样颗粒,将3Capm蛋白与佐剂制成亚单位疫苗,小鼠和猪体免疫试验均发现其可以有效诱导体液免疫和细胞免疫,表明3Capm蛋白具有较好的抗原性、免疫原性,由此可以看出本发明的3Capm蛋白可以用于疫苗研制,为PCV3的防控提供了思路,为PCV3疫苗的研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN108707697A
公开(公告)日:2018-10-26
申请号:CN201810748794.8
申请日:2018-07-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域,特别涉及塞尼卡谷病毒的LAMP检测引物对,还涉及使用上述引物对的检测方法。该方法特异性高,敏感性与荧光定量PCR一致,而且快速、便捷,可用于SVV的检测,具有较好应用前景。
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公开(公告)号:CN109762792B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN201910046125.0
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株及其应用,本发明以高致病性PRRSV TJM‑F92疫苗弱毒株的全长感染性cDNA克隆和类NADC30亚型毒株FJ1402为基础,利用反向遗传技术,构建得到了猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株。该嵌合毒株经试验验证,在Marc‑145细胞上病毒生长速度及病毒滴度低于其原始毒株TJM‑F92,毒力低,对HP‑PRRSV毒株BB0907及类NADC30毒株FJ1402均有较好的免疫保护作用,可对高致病性毒株以及类NADC30毒株感染提供有效的交叉免疫保护,为该病新型广谱疫苗的研制奠定了重要基础。
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公开(公告)号:CN114014916A
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202111422353.7
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/005 , G01N33/68 , C07K16/08
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60‑120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号:CN109762792A
公开(公告)日:2019-05-17
申请号:CN201910046125.0
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株及其应用,本发明以高致病性PRRSV TJM-F92疫苗弱毒株的全长感染性cDNA克隆和类NADC30亚型毒株FJ1402为基础,利用反向遗传技术,构建得到了猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株。该嵌合毒株经试验验证,在Marc-145细胞上病毒生长速度及病毒滴度低于其原始毒株TJM-F92,毒力低,对HP-PRRSV毒株BB0907及类NADC30毒株FJ1402均有较好的免疫保护作用,可对高致病性毒株以及类NADC30毒株感染提供有效的交叉免疫保护,为该病新型广谱疫苗的研制奠定了重要基础。
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公开(公告)号:CN109762052A
公开(公告)日:2019-05-17
申请号:CN201910046124.6
申请日:2019-01-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第1-120aa或60-120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。
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公开(公告)号:CN113563431A
公开(公告)日:2021-10-29
申请号:CN202110752863.4
申请日:2021-07-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/40 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12N7/01 , C12N15/866 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫保护蛋白杂合基因、重组杆状病毒及疫苗。成功构建了2株可溶性表达PRRSV GP5和M蛋白基因的重组杆状病毒BMP541与FMP542,制备的重组蛋白可以形成病毒样颗粒,诱导仔猪产生体液免疫和细胞免疫,并且能够抵抗高致病性PRRSV和类NADC30毒株的攻击,为PRRSV亚单位疫苗的研制奠定了重要基础。
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