猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用

    公开(公告)号:CN114014916B

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202111422353.7

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60‑120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。

    猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN109762052B

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN201910046124.6

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第1‑120aa或60‑120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。

    一种可溶性PCV3Cap蛋白及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN109852622B

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN201910046089.8

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种可溶性PCV3Cap蛋白及其编码基因和应用。本发明将PCV3 Cap基因密码子进行昆虫细胞偏嗜性优化、修饰,得到新的重组基因。该重组基因能够表达可溶性的3Capm蛋白,该3Capm蛋白可以包装形成病毒样颗粒,将3Capm蛋白与佐剂制成亚单位疫苗,小鼠和猪体免疫试验均发现其可以有效诱导体液免疫和细胞免疫,表明3Capm蛋白具有较好的抗原性、免疫原性,由此可以看出本发明的3Capm蛋白可以用于疫苗研制,为PCV3的防控提供了思路,为PCV3疫苗的研究奠定了基础。

    一种猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株及其应用

    公开(公告)号:CN109762792B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN201910046125.0

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株及其应用,本发明以高致病性PRRSV TJM‑F92疫苗弱毒株的全长感染性cDNA克隆和类NADC30亚型毒株FJ1402为基础,利用反向遗传技术,构建得到了猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株。该嵌合毒株经试验验证,在Marc‑145细胞上病毒生长速度及病毒滴度低于其原始毒株TJM‑F92,毒力低,对HP‑PRRSV毒株BB0907及类NADC30毒株FJ1402均有较好的免疫保护作用,可对高致病性毒株以及类NADC30毒株感染提供有效的交叉免疫保护,为该病新型广谱疫苗的研制奠定了重要基础。

    猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用

    公开(公告)号:CN114014916A

    公开(公告)日:2022-02-08

    申请号:CN202111422353.7

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白、其编码基因及在ELISA抗体检测中的应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第60‑120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。

    一种猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株及其应用

    公开(公告)号:CN109762792A

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201910046125.0

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株及其应用,本发明以高致病性PRRSV TJM-F92疫苗弱毒株的全长感染性cDNA克隆和类NADC30亚型毒株FJ1402为基础,利用反向遗传技术,构建得到了猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合毒株。该嵌合毒株经试验验证,在Marc-145细胞上病毒生长速度及病毒滴度低于其原始毒株TJM-F92,毒力低,对HP-PRRSV毒株BB0907及类NADC30毒株FJ1402均有较好的免疫保护作用,可对高致病性毒株以及类NADC30毒株感染提供有效的交叉免疫保护,为该病新型广谱疫苗的研制奠定了重要基础。

    猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN109762052A

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201910046124.6

    申请日:2019-01-18

    Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒3型Cap重组蛋白及其编码基因和应用,本发明采用PCR方法将PCV3 Cap基因中表达第1-120aa或60-120aa的基因片段删除,得到了PCV3 Cap重组蛋白的编码基因,将该编码基因克隆至pET32a,再转化至Rosseta感受态细胞,经IPTG诱导表达,可以得到PCV3 Cap重组蛋白。该蛋白呈可溶性表达,可与His标签抗体结合,采用亲和层析方法便于纯化。采用该重组蛋白对猪进行免疫,可以得到多克隆抗体,该多克隆抗体效价高,与PCV3有相似的抗原性。以该重组蛋白包被酶标板,对PCV3进行间接ELISA抗体检测,具有敏感性、特异性和重复性好等优势。

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