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公开(公告)号:CN109307772A
公开(公告)日:2019-02-05
申请号:CN201811192108.X
申请日:2018-10-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/533
Abstract: 本发明公开了一种伪狂犬病毒gE和gB IgG抗体双重荧光微球免疫学的检测方法,本检测方法基于一组基于液相蛋白芯片技术的检测猪伪狂犬病毒抗体的羧基化荧光微球组合,其包括分别偶联有gE截短蛋白和gB截短蛋白的羧基化荧光微球,gE、gB截短蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:2和4所示。本发明构建的同时检测PRV gE和gB IgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法,重复性好、灵敏度高,特异性好,与其他常见猪病毒病阳性血清无交叉反应。该方法的建立可同时用于伪狂犬病毒野毒感染猪和疫苗免疫猪的快速鉴别诊断及保护性抗体的检测,为猪病毒病监测提供了一个重要的方法,有很大的应用价值,值得大面积推广。
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公开(公告)号:CN114592090B
公开(公告)日:2024-01-30
申请号:CN202210190570.6
申请日:2022-02-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型和Ⅱ型非洲猪瘟病毒的双重荧光定量PCR检测引物和探针及试剂盒,所述双重荧光定量PCR检测引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2和4~5所示。并进一步建立了检测方法和检测试剂盒。该方法特异性强,与其他病毒无交叉反应;灵敏度高,最低检测拷2贝数分别为1.07×10 copies/μL和3.13×104copies/μL;重复性好,Ct值变异系数均小于2%;应用该方法与OIE推荐的荧光定量PCR方法检测结果一致。本发明建立的双重荧光定量PCR为鉴别基因I型和II型ASFV提供了快速检测方法,有利于完善中国针对ASF制定的高效防控措施。(56)对比文件Thi Bich Ngoc Trinh 等.Development ofa novel real-time PCR assay targeting p54gene for rapid detection of African swinefever virus (ASFV) strains circulating inVietnam《.VetMed Sci.》.2021,第7卷(第6期),第2268-2272页.Carmina Gallardo 等. Enhanceddiscrimination of African swine fevervirus isolates through nucleotidesequencing of the p54, p72, and pB602L(CVR) genes《.Virus Genes》.2009,第38卷(第1期),摘要,第86页右栏第2段至第92页左栏第1段.
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公开(公告)号:CN113797184B
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202110832036.6
申请日:2021-07-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/085 , A61K36/70 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了丹叶大黄素在制备防治非洲猪瘟病毒的药物中的应用,本发明公开了丹叶大黄素具有显著的抗非洲猪瘟病毒的作用。其最大无毒剂量为40μM,对于非洲猪瘟病毒的感染和增殖能够有效抑制,能够作为防治非洲猪瘟的药物,在非洲猪瘟的防治方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN106749553B
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN201611015852.3
申请日:2016-11-18
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/11 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543 , C09K11/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明首先提供了猪流感病毒的血凝素重组蛋白的制备方法,通过去除HA的信号肽。根据HA序列设计一对带有HIS标签的引物,构建了带有6*His‑麦芽糖结合蛋白(MBP)组合标签的原核表达质粒。在大肠杆菌表达系统中成功获得以可溶形式表达的HA重组蛋白。该蛋白能够与H1N1亚型猪流感病毒HA鼠源抗体发生反应,说明了HA重组蛋白具有良好的抗原性,利用该凝素重组蛋白建立液相芯片检测技术,灵敏度比ELISA高,该方法的建立,将为开展猪流感病毒抗体的检测提供必要的技术补充,为其它疫病抗体液相芯片检测技术的研究奠定技术基础,为多种猪病抗体多重液相芯片检测技术的建立提供试验依据。
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公开(公告)号:CN110438260B
公开(公告)日:2020-10-23
申请号:CN201910689509.4
申请日:2019-07-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒核酸试纸条检测试剂盒,其含有一种用于检测非洲猪瘟的引物组,上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;其中,上游引物标记Biotin,下游引物标记FITC。本发明通过组织裂解液直接获取病毒DNA,无需核酸抽提步骤;通过高效核酸扩增酶减少PCR反应时间;对引物进行标记,通过核酸试纸条显色方法替代核酸琼脂糖电泳显色方法。本发明建立了适合临床使用的高效、快检非洲猪瘟病毒的方法,并且与传统的琼脂糖凝胶电泳方法相比,无需任何仪器设备,操作简单,具有更高的灵敏性。
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公开(公告)号:CN110964849A
公开(公告)日:2020-04-07
申请号:CN201911154632.2
申请日:2019-11-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒分析检测领域,具体涉及一种消除非洲猪瘟病毒检测假阳性的方法,是在提取待测样品DNA进行病毒粒子DNA检测之前,加入DNase I与待测样品共孵育。本发明利用Dnase I对样品进行预处理,有效区分了游离ASFV核酸和ASFV粒子,避免了实际检测中出现假阳性的现象,提高了检测的准确性。另外,本发明改善了PCR和qPCR的引物,进一步提高了对ASFV粒子的检测限。最后,本发明得到的PCR和qPCR试剂盒,能够快速采样检测,特异性灵敏,价格低廉,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN110438260A
公开(公告)日:2019-11-12
申请号:CN201910689509.4
申请日:2019-07-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒核酸试纸条检测试剂盒,其含有一种用于检测非洲猪瘟的引物组,上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;其中,上游引物标记Biotin,下游引物标记FITC。本发明通过组织裂解液直接获取病毒DNA,无需核酸抽提步骤;通过高效核酸扩增酶减少PCR反应时间;对引物进行标记,通过核酸试纸条显色方法替代核酸琼脂糖电泳显色方法。本发明建立了适合临床使用的高效、快检非洲猪瘟病毒的方法,并且与传统的琼脂糖凝胶电泳方法相比,无需任何仪器设备,操作简单,具有更高的灵敏性。
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公开(公告)号:CN110433769A
公开(公告)日:2019-11-12
申请号:CN201910640686.3
申请日:2019-07-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: B01J20/20 , B01J20/30 , B01J20/28 , C02F1/28 , C02F101/20
Abstract: 本发明公开一种高效去除水体重金属镉的吸附剂及其制备方法与应用,属于水处理技术领域。该方法包括如下步骤:收集新鲜鸡粪进行烘干处理;取烘干后的鸡粪进行限氧热解;限氧热解后再提高温度好氧热解,提取产物后进行研磨过筛即得吸附剂。本发明的吸附剂能快速高效地吸附重金属;具体体现为:在初始Cd2+浓度20、50和100mg/L条件下,吸附剂分别在反应时间40、50和80min内,最大去除率均能达到几乎100%;即使在初始Cd2+浓度高达350mg/L时,最大吸附量可达177.2mg/g。本发明具有吸附剂制作简单、快速高效、成本低廉等优点,提供鸡粪资源化利用的新途径,在重金属污染水体治理中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN103837681A
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201310556500.9
申请日:2013-11-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/5767 , G01N33/56983 , G01N2333/186
Abstract: 本发明涉及一种病毒抗体检验方法,尤其涉及一种人、猪戊型肝炎病毒抗体检验通用ELISA法及其应用。一种戊型肝炎病毒抗体检验通用ELISA法,所述通用ELISA法为单抗阻断ELISA法,使用猪戊型肝炎病毒的ORF3重组蛋白作为包被抗原。应用本发明建立的阻断ELISA方法对从广东省收集的100份猪血清和100份猪场工作人员血清进行HEV阳性血清的检验,得出结果与现有检验试剂盒检验结果的符合率为97%、98%。
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公开(公告)号:CN103223162A
公开(公告)日:2013-07-31
申请号:CN201310114762.X
申请日:2013-04-03
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明属于病毒疫苗制备技术领域,具体公开了一株H3N2犬流感病毒株CGD1的应用。本发明利用自行分离、鉴定、保存的3株H3N2犬流感病毒株CGD1、CGD2和CGD3接种鸡胚进行传代培养,发现病毒株CGD1的遗传稳定性好,因此选择CGD1株进行噬斑纯化病毒选育出了一株H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1,该疫苗株已于2013年2月1日送交北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心保藏,保藏号为CGMCCNO:7218。利用H3N2犬流感病毒疫苗株CIVGDYM1接种鸡胚进行病毒繁殖,经过收获鸡胚尿囊液、灭活、配苗等步骤可以制备出安全、有效的H3N2犬流感病毒灭活疫苗。
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