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公开(公告)号：CN106771178A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611015332.2
申请日：2016-11-18
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , C09K11/06
CPC分类号： G01N33/56983 , C09K11/06 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N2333/005 , G01N2333/11 , G01N2333/14 , G01N2333/435
摘要： 本发明提供了一种猪PRRSV、SIV、HEV抗体的液相芯片多重检测试剂盒；以PRRSV nsp7、SIV HA、HEV ORF2的不同荧光标记微球为载体，在PRRSV、SIV、HEV抗体单一液相芯片检测方法基础上，建立同时检测3种抗体的多重液相芯片检测方法，为HEV、PRRSV、SIV抗体监测提供一种更有效、更快速的检测方法，同时为猪病鉴别诊断及其他动物疫病抗体的血清检测新方法的建立提供新的线索；针对我国养猪业快速发展、猪病情况复杂、混合感染现象严重等养殖现状，进一步加强对猪群疫病情况进行准确、快速、有效的诊断和监测。
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公开(公告)号：CN106749553B
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN201611015852.3
申请日：2016-11-18
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： C07K14/11 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543 , C09K11/06 , C12R1/19
摘要： 本发明首先提供了猪流感病毒的血凝素重组蛋白的制备方法，通过去除HA的信号肽。根据HA序列设计一对带有HIS标签的引物，构建了带有6*His‑麦芽糖结合蛋白（MBP）组合标签的原核表达质粒。在大肠杆菌表达系统中成功获得以可溶形式表达的HA重组蛋白。该蛋白能够与H1N1亚型猪流感病毒HA鼠源抗体发生反应，说明了HA重组蛋白具有良好的抗原性，利用该凝素重组蛋白建立液相芯片检测技术，灵敏度比ELISA高，该方法的建立，将为开展猪流感病毒抗体的检测提供必要的技术补充，为其它疫病抗体液相芯片检测技术的研究奠定技术基础，为多种猪病抗体多重液相芯片检测技术的建立提供试验依据。
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公开(公告)号：CN109777890A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910064482.X
申请日：2019-01-23
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： C12Q1/70 , G01N33/569 , C12N15/70 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种PCV2、CSFV IgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法。2型猪圆环病毒Cap基因片段和猪瘟病毒E2基因片段，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1～2所示，其编码的重组蛋白作为抗原分别与羧基化荧光微球偶联并建立了双重FMIA检测方法。本检测方法速度快、特异性强、敏感度高；E2抗体和Cap抗体检测方法的重复性好，与其他常见猪病毒病阳性血清无交叉反应，灵敏度高、特异性强；与商业化ELISA试剂盒相比，灵敏度更高。该方法可同时用于猪瘟病毒和圆环2型病毒感染猪的快速鉴别诊断及保护性抗体的检测，为进一步建立猪病毒病抗体多重检测方法奠定了实验基础，为其他动物疫病抗体的新型血清学诊断技术的建立提供了思路。
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公开(公告)号：CN109307772A
公开(公告)日：2019-02-05
申请号：CN201811192108.X
申请日：2018-10-12
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/533
摘要： 本发明公开了一种伪狂犬病毒gE和gB IgG抗体双重荧光微球免疫学的检测方法，本检测方法基于一组基于液相蛋白芯片技术的检测猪伪狂犬病毒抗体的羧基化荧光微球组合，其包括分别偶联有gE截短蛋白和gB截短蛋白的羧基化荧光微球，gE、gB截短蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：2和4所示。本发明构建的同时检测PRV gE和gB IgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法，重复性好、灵敏度高，特异性好，与其他常见猪病毒病阳性血清无交叉反应。该方法的建立可同时用于伪狂犬病毒野毒感染猪和疫苗免疫猪的快速鉴别诊断及保护性抗体的检测，为猪病毒病监测提供了一个重要的方法，有很大的应用价值，值得大面积推广。
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公开(公告)号：CN109307772B
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN201811192108.X
申请日：2018-10-12
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/533
摘要： 本发明公开了一种伪狂犬病毒gE和gB IgG抗体双重荧光微球免疫学的检测方法，本检测方法基于一组基于液相蛋白芯片技术的检测猪伪狂犬病毒抗体的羧基化荧光微球组合，其包括分别偶联有gE截短蛋白和gB截短蛋白的羧基化荧光微球，gE、gB截短蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：2和4所示。本发明构建的同时检测PRV gE和gB IgG抗体双重荧光微球免疫学检测方法，重复性好、灵敏度高，特异性好，与其他常见猪病毒病阳性血清无交叉反应。该方法的建立可同时用于伪狂犬病毒野毒感染猪和疫苗免疫猪的快速鉴别诊断及保护性抗体的检测，为猪病毒病监测提供了一个重要的方法，有很大的应用价值，值得大面积推广。
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公开(公告)号：CN106749553A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611015852.3
申请日：2016-11-18
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： C07K14/11 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543 , C09K11/06 , C12R1/19
CPC分类号： C07K14/005 , C09K11/06 , C09K2211/14 , C12N15/70 , C12N2760/16122 , C12N2800/101 , G01N33/54313 , G01N33/56983
摘要： 本发明首先提供了猪流感病毒的血凝素重组蛋白的制备方法，通过去除HA的信号肽。根据HA序列设计一对带有HIS标签的引物，构建了带有6*His‑麦芽糖结合蛋白（MBP）组合标签的原核表达质粒。在大肠杆菌表达系统中成功获得以可溶形式表达的HA重组蛋白。该蛋白能够与H1N1亚型猪流感病毒HA鼠源抗体发生反应，说明了HA重组蛋白具有良好的抗原性，利用该凝素重组蛋白建立液相芯片检测技术，灵敏度比ELISA高，该方法的建立，将为开展猪流感病毒抗体的检测提供必要的技术补充，为其它疫病抗体液相芯片检测技术的研究奠定技术基础，为多种猪病抗体多重液相芯片检测技术的建立提供试验依据。
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公开(公告)号：CN106771178B
公开(公告)日：2018-05-01
申请号：CN201611015332.2
申请日：2016-11-18
申请人： 华南农业大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , C09K11/06
摘要： 本发明提供了一种猪PRRSV、SIV、HEV抗体的液相芯片多重检测试剂盒；以PRRSV nsp7、SIV HA、HEV ORF2的不同荧光标记微球为载体，在PRRSV、SIV、HEV抗体单一液相芯片检测方法基础上，建立同时检测3种抗体的多重液相芯片检测方法，为HEV、PRRSV、SIV抗体监测提供一种更有效、更快速的检测方法，同时为猪病鉴别诊断及其他动物疫病抗体的血清检测新方法的建立提供新的线索；针对我国养猪业快速发展、猪病情况复杂、混合感染现象严重等养殖现状，进一步加强对猪群疫病情况进行准确、快速、有效的诊断和监测。
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