公开(公告)号：CN101748095B

公开(公告)日：2013-05-08

申请号：CN200810203814.X

申请日：2008-11-28

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院

Inventor： 周军杰 ,  彭文 ,  李琦 ,  殷佩浩

IPC: C12N5/08

Abstract: 本发明属生物技术领域。涉及一种定向诱导软骨细胞的方法，具体涉及一种采用人类羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的方法。本发明依据组织工程基因学原理，通过体外培养人羊膜上皮细胞，进行羊膜上皮细胞的原代、传代培养，观察调整羊膜上皮细胞基因型，利用细胞因子(转化生长因子β，TGF-β)和BMP-7诱导和调控其定向诱导分化成软骨细胞，通过分子生物学方法检测诱导分化的细胞的软骨细胞特性及软骨细胞活性，明确人羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的调控机制，结果表明人羊膜上皮细胞可以作为软骨细胞诱导分化的种子源。本方法取材方便，具有较广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN101624599B

公开(公告)日：2013-03-27

申请号：CN200810040524.8

申请日：2008-07-11

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院

Inventor： 李琦 ,  范忠泽 ,  周利红 ,  王金玉 ,  还一平 ,  殷佩浩 ,  秦建民 ,  孙珏 ,  许建华 ,  刘宁宁

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及一种含有COX-2基因启动子和报告基因的重组质粒及其构建方法和应用。本发明通过提取人COX-2基因启动子，以含萤火虫荧光素酶报告基因的pGL3-Basic的质粒为载体，插入COX-2基因启动子，构建一种含COX-2基因启动子和萤火虫荧光素酶报告基因的pGL3-Basic-COX-2 promoter重组质粒。将构建的重组质粒与海肾荧光素酶报告基因质粒共转染到肿瘤细胞中，使其稳定表达。通过检测荧光素酶的活性反映COX-2基因启动子启动转录的活性，用于靶向筛选抗肿瘤药物。本发明具有靶向性强、高效快速、反应灵敏等优点，适用于以COX-2基因为靶点的抗肿瘤药物大批量筛选。

公开(公告)号：CN102899344A

公开(公告)日：2013-01-30

申请号：CN201210461114.7

申请日：2012-11-16

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院

Inventor： 李琦 ,  殷佩浩 ,  邱艳艳 ,  刘宣 ,  周利红 ,  王炎 ,  侯黎莉 ,  秦建民 ,  靳宝辉 ,  陈星竹 ,  王一斐 ,  叶乃菁 ,  胡送娇 ,  梁波 ,  郑媛红

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明公开了一种含有VEGFA基因3′UTR和报告基因的重组质粒，其中，该报告基因为萤火虫荧光素酶基因。该重组质粒的制备方法包含：步骤1，对载体质粒进行扩增和抽提；步骤2，对VEGFA基因的3′UTR序列进行克隆、酶切及纯化；步骤3，进行所述的VEGFA基因的3′UTR序列与所述的载体质粒的连接；步骤4，筛选重组子。本发明提供的含有VEGFA基因3′UTR和报告基因的重组质粒，在筛选血管生成相关的microRNA、研究血管生成与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞血管生成的机制等方面就有极佳的应用前景。

公开(公告)号：CN102335438A

公开(公告)日：2012-02-01

申请号：CN201110217231.4

申请日：2011-08-01

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院 ,  上海市普陀区中心医院

Inventor： 李琦 ,  范忠泽 ,  周利红 ,  王炎 ,  慈书俊 ,  李克桑 ,  秦建民 ,  陈星竹

IPC: A61K48/00 ,  C12N15/85 ,  A61K35/00

Abstract: 本发明涉及一种含HIPK2基因的重组质粒用于制备抗肿瘤药物的用途，该用途主要是通过HIPK2基因在肿瘤血管新生、增殖凋亡、侵袭转移中的作用机理的研究，进行含HIPK2基因的抗肿瘤药物的开发和生产，从而提供预防和治疗肝癌、胃癌、结直肠癌等恶性肿瘤的新途径，达到预防恶性肿瘤发生和减缓肿瘤进程的目的。该重组质粒包含HIPK2基因的编码序列以及载体质粒DNA序列，其中载体质粒DNA序列包含与HIPK2基因可操作地连接的调节序列。本发明提供的重组质粒制备的抗肿瘤药物，通过含HIPK2基因重组质粒补充HIPK2，可抑制肿瘤细胞的生物学进程，达到预防恶性肿瘤发生和减缓肿瘤进程的效果，同时与现有治疗手段相比能大幅度降低对机体的杀伤性和毒副作用。

公开(公告)号：CN101748095A

公开(公告)日：2010-06-23

申请号：CN200810203814.X

申请日：2008-11-28

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院

Inventor： 周军杰 ,  彭文 ,  李琦 ,  殷佩浩

IPC: C12N5/08

Abstract: 本发明属生物技术领域。涉及一种定向诱导软骨细胞的方法，具体涉及一种采用人类羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的方法。本发明依据组织工程基因学原理，通过体外培养人羊膜上皮细胞，进行羊膜上皮细胞的原代、传代培养，观察调整羊膜上皮细胞基因型，利用细胞因子(转化生长因子β，TGF-β)和BMP-7诱导和调控其定向诱导分化成软骨细胞，通过分子生物学方法检测诱导分化的细胞的软骨细胞特性及软骨细胞活性，明确人羊膜上皮细胞定向诱导软骨细胞的调控机制，结果表明人羊膜上皮细胞可以作为软骨细胞诱导分化的种子源。本方法取材方便，具有较广阔的应用前景。