一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法

    公开(公告)号:CN110923276A

    公开(公告)日:2020-03-27

    申请号:CN201911398031.6

    申请日:2019-12-30

    Abstract: 本发明公开了一种生物酶催化合成天门冬氨酸钙的制备方法,包括:(1)大肠杆菌在发酵培养基中培养发酵,得到湿菌体;(2)将步骤(1)制备的湿菌体制备成悬浮液,加入1g/L氯化钙溶液在30℃孵化2h;然后于4℃冷藏处理至少2h,得到预处理后的转化菌体;(3)将上述步骤(2)预处理后的转化菌体加入到转化液中,酶促反应,反应6h;反应结束后,通过高速离心机去除菌体细胞;(4)将去除菌体细胞后的转化液加热至80~100℃,加入活性炭脱色,过滤,得滤液;(5)将滤液纯化,得到天门冬氨酸钙产物。本发明采用生物酶法制备天门冬氨酸钙,条件温和,得到的产物具有生物利用率高,纯度高等特性,适合于高端生物医药领域工业化生产及应用。

    一种L-天冬氨酸的质控生产方法及其应用

    公开(公告)号:CN109337941A

    公开(公告)日:2019-02-15

    申请号:CN201811148809.3

    申请日:2018-09-29

    Applicant: 宿州学院

    Abstract: 本发明公开一种L-天冬氨酸的质控生产方法及其应用,包括L-天冬氨酸发酵液的制备以及L-天冬氨酸发酵液的含量检测,其中,L-天冬氨酸发酵液的制备方法包括:菌株在培养基中培养发酵,离心、得到湿菌体,湿菌体加入转化液中,经酶促反应后,得到L-天冬氨酸的发酵液;L-天冬氨酸发酵液的含量检测方法包括:确定最大吸收波长、标准曲线的制作、含量确定;通过本发明公开的L-天冬氨酸发酵液含量检测方法,为实时追踪发酵反应的进程提供了可能,相对于传统的高效液相色谱法、在线衍生HPLC等检测手段,紫外分光光度法更加简便、合理,时间短,速度快,适合应用到工业化生产中。

    一株利用木质纤维素水解液厌氧发酵产L‑天冬氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN107022515A

    公开(公告)日:2017-08-08

    申请号:CN201710355267.6

    申请日:2017-05-19

    Abstract: 本发明公开了一株能够利用木质纤维素水解液为原料,同步利用葡萄糖、木糖的混合糖厌氧发酵产L‑天冬氨酸基因工程菌,该菌株具体的构建方法为:以重组菌AS12为出发菌,采用代谢工程改造策略敲除糖转运系统的ptsG基因,得到重组大肠杆菌AS31;将能够催化草酰乙酸合成L‑天冬氨酸的天冬氨酸转氨酶基因aspC和磷酸烯醇式丙酮酸激酶编码基因pck克隆到表达质粒上,将该重组质粒转化大肠杆菌AS31,即得到利用木糖、葡萄糖混合糖同步厌氧发酵产L‑天冬氨酸的基因工程菌AS32。本发明还公布了AS32厌氧发酵产L‑天冬氨酸的培养基和培养条件,实现了利用如秸秆、玉米芯、稻草等废弃生物质资源为原料发酵制备L‑天冬氨酸的目标,具有显著的经济性。

    利用顺酐制备L‑天冬氨酸和L‑丙氨酸的方法

    公开(公告)号:CN106755157A

    公开(公告)日:2017-05-31

    申请号:CN201611238388.4

    申请日:2016-12-28

    CPC classification number: C12P13/20 C12P13/06

    Abstract: 本发明提供利用顺酐制备L‑天冬氨酸和L‑丙氨酸的方法,包括:以顺酐为原料加热水合制得马来酸溶液,向其中加入马来酸异构酶和L‑天冬氨酸酶,所得酶转化液经过滤、浓缩脱氨后,以马来酸溶液作为酸化剂调pH至L‑天冬氨酸等电点2.8,结晶析出L‑天冬氨酸。进一步利用L‑天冬氨酸脱羧酶,将L‑天冬氨酸转化为L‑丙氨酸。本发明采用双酶法一步反应制备L‑天冬氨酸,工艺简便,转化率高,可有效控制副产物苹果酸的产生,产品质量好;以马来酸作为酸化剂等点结晶制备L‑天冬氨酸,结晶母液可用作酶反应底物循环利用,大大降低废水排放量,符合绿色环保理念。此外,采用酶法进一步将L‑天冬氨酸转化为L‑丙氨酸,使整套工艺获得的产品多元化,更具有市场竞争力。

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