一种谷胱甘肽的纯化方法

    公开(公告)号:CN112321675A

    公开(公告)日:2021-02-05

    申请号:CN202011150317.5

    申请日:2020-10-23

    摘要: 本发明涉及分离纯化领域,具体涉及一种谷胱甘肽的纯化方法。本发明从谷胱甘肽发酵菌体悬浮液中纯化还原型谷胱甘肽的方法,将酿酒酵母菌泥经稀释、破碎、离心,收集水相,在碱性条件下将谷胱甘肽和氯甲基聚苯乙烯树脂反应,将树脂过滤洗涤后,脱除树脂,收集谷胱甘肽,最后经过乙醇重结晶,即得精制的谷胱甘肽。本发明采用合适的氯甲基聚苯乙烯树脂的用量,即保证了谷胱甘肽的回收率,又避免了过多用量导致的产品中杂质过多的情况。同时,本发明的提纯方法对谷胱甘肽发酵菌体悬浮液不需要做特殊要求,只要所述悬浮液可以达到本发明所要求的GSH含量即可,使用范围广泛。

    一种无细胞自组装体系高效合成谷胱甘肽的方法

    公开(公告)号:CN111662358A

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN201910179776.7

    申请日:2019-03-07

    发明人: 李志敏 张星

    IPC分类号: C07K5/037 C12P21/02

    摘要: 本发明提供了一种无细胞自组装体系高效合成谷胱甘肽的方法,由重组细胞过量表达腺苷激酶、多聚磷酸激酶和谷胱甘肽双功能合成酶,通过多酶体系有序自组装形成超聚合分子,利用多聚磷酸盐,和少量腺苷,或AMP,或ADP,或ATP,循环催化生成ATP,并将甘氨酸、谷氨酸和半胱氨酸以及生成的ATP生成谷胱甘肽。本发明首次将无细胞自组装体系利用到体外合成谷胱甘肽中,该方法缩短了底物传递距离,提高了反应速率和催化效率,强化了蛋白的热稳定性。不仅实现了谷胱甘肽合成过程中ATP的高效循环再生,降低生产成本;而且操作简单、稳定性强;副反应少、生产速率较高,底物得率接近理论值。

    从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法

    公开(公告)号:CN105200102B

    公开(公告)日:2019-03-19

    申请号:CN201510720495.X

    申请日:2015-10-30

    发明人: 梁国斌 汪斌

    摘要: 本发明公开了一种从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法,包括以下步骤:产朊假丝酵母种子培养和发酵;收集发酵培养完毕的发酵液,离心,收集的细胞冷冻;将冷冻后的产朊假丝酵母细胞加入硫酸溶液中,放置15~30分钟后离心分离,收集上清液;此时细胞内的还原型谷胱甘肽从胞内释放出来溶解在硫酸溶液中,完成提取。本发明将收集的细胞冷冻处理以增加细胞壁渗透性;将冷冻处理后的细胞加入强酸溶液中,在强酸溶液中胞内还原型谷胱甘肽完全释放出来,而胞内其他大分子物质如蛋白质、糖类、核酸等则基本留在胞内,简化了后续的纯化操作,降低了纯化成本,实现了高效、清洁化提取;同时在本发明的提取条件下还原型谷胱甘肽未被破坏。

    检测高浓度γ-谷氨酰转肽酶的荧光探针及其制备方法

    公开(公告)号:CN108893106A

    公开(公告)日:2018-11-27

    申请号:CN201811028466.7

    申请日:2018-09-04

    申请人: 川北医学院

    摘要: 本发明提供一种用于检测高浓度γ-谷氨酰转肽酶的荧光探针,该荧光探针解决了在体内对异常高浓度γ-谷氨酰转肽酶进行选择性响应的问题。本发明的荧光探针在γ-谷氨酰转肽酶高于人体正常浓度后开始产生明显的荧光变化,随着γ-谷氨酰转肽酶的浓度增高,本发明的荧光探针溶液产生大的荧光增强和明显的颜色变化。同时,本发明的荧光探针在与γ-谷氨酰转肽酶反应后,细胞膜通透性大大增强,在应用于细胞成像时,表现出能选择性成像高表达γ-谷氨酰转肽酶的卵巢癌细胞的性质。本发明合成工艺简单易行,原料廉价易得,制备成本低,易于推广。

    一种提纯谷胱甘肽金属盐的解析工艺

    公开(公告)号:CN107056884A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710337045.1

    申请日:2017-05-17

    IPC分类号: C07K5/037

    摘要: 本发明属于医药技术领域,涉及一种还原型谷胱甘肽金属盐的解析工艺。该工艺采用含有10%‑50%氯化钠的硫化钠混合物作为解析剂,替代硫化氢气体,与谷胱甘肽金属盐进行反应,解析出谷胱甘肽。本工艺与加入硫化氢的工艺相比,有如下优势:增加了安全性,避免了硫化氢在运输、储存、使用过程中存在的巨大安全隐患;本工艺中的解析剂能有效地提高反应收率;硫化钠与氯化钠混合固体与硫化氢相比价格更便宜,生产成本降低。