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公开(公告)号：CN114774316A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210391317.7
申请日：2022-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株马链球菌兽疫亚种突变株及其应用，本发明的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)SFPE‑A17，于2021年11月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号的，保藏编号为CGMCC No.23795。利用本发明的马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)SFPE‑A17在发酵透明质酸的过程中，菌株生长速度显著加快，菌株更早开始积累透明质酸，透明质酸的产量较原始菌株提高42.9％，能够显著地降低生产成本，所得透明质酸分子量降低一倍，分子量平均分布为0.54×106Da，在中低分子量透明质酸市场能够提高产业效率，具有重要的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN113403315A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110802525.7
申请日：2021-07-15
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/57 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/54 , C12R1/125 , C12R1/085 , C12R1/10 , C12R1/11 , C12R1/01 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种提升菌体生长和产生物酶潜力的基因表达盒，属于工业生物技术领域。本发明提供如SEQ ID NO.1所示的菌体密度依赖型自诱导启动子。本发明提供的启动子能够有效调控宿主细胞的生长和角蛋白酶的表达过程，使菌体密度提高了50％，酶活力最高可达到3500U·mL‑1，是对照菌的2.9倍。本发明通过使用菌体密度依赖型启动子有效调控了产酶工程菌的生长与产酶过程，减少产酶对宿主的影响，从而提高菌体量及产酶量。本发明为工业上生产角蛋白酶等宿主毒性蛋白酶类提供了有效的解决方法。
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公开(公告)号：CN108949729B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201810933226.5
申请日：2018-08-16
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/50 , C12N15/57 , C12N15/70 , C12N15/74 , C12N15/81 , C12N15/80 , C12N1/21 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12P21/06
Abstract: 本发明公开了一种经热稳定性改造的角蛋白酶突变体，属于工业生物技术领域。本发明基于角蛋白酶三维结构模型，针对角蛋白酶的酶蛋白Loop区域上的8个关键氨基酸残基位点，采用一步反向PCR构建热稳定性突变重组菌，热稳定性研究结果显示突变体N218S角蛋白酶在60℃的热稳定性提高了3倍以上。利用角蛋白酶进行降解羽毛研究。观察到角蛋白酶处理48h后的羽毛表面呈现开叉、毛糙状，羽毛降解率达到25％，羽毛降解液中氨基酸总含量增加了1.82mg/mL。该研究为降解羽毛制备高质量饲料以及降解硬质角蛋白废弃物奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111763676A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010700315.2
申请日：2018-08-16
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/50 , C12R1/125 , C12R1/085 , C12R1/10 , C12R1/11 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种提高角蛋白酶异源表达酶活的启动子及其应用，属于工业生物技术领域。本发明成功构建了携带16种不同启动子序列的角蛋白酶重组菌，其中7种能够提高角蛋白酶表达量，PaprE启动子改造重组菌的酶活水平最高，达到2605U/mL，相比对照菌提高20倍。在5L发酵罐上发酵液中角蛋白酶活力高达7176U/mL，是目前文献报道重组角蛋白酶表达的最高水平，能更好地服务于实际应用。本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效策略。传统基因工程改造通常需构建高通量筛选方法，进行大量文库筛选，工作量大、周期长、成本高，该改造方法相比传统方法极大的减小了工作量，提高了高表达效率。
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公开(公告)号：CN111514860A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010388464.X
申请日：2020-05-09
Applicant: 江南大学
IPC: B01J20/24 , B01J20/28 , B01J20/30 , C02F1/28 , C02F101/30
Abstract: 本发明公开了一种羊毛废弃物的高效综合回收再利用方法，本发明采用谷胱甘肽处理废弃羊毛，使其暴露出多种活性基团，能够有效吸附印染废水中的阳离子染料；采用本发明方法制备得到的羊毛海绵吸附剂对羊毛印染废水中阳离子染料去除率最高可达99％，吸附量可达263.16mg/g，是一种优良的生物吸附剂；采用本发明方法制备得到的羊毛吸附剂可重复吸附、解吸循环8‑10次。本发明实现了羊毛纺织工业废弃物的充分回收再利用，将羊毛废弃物转化成印染废水吸附剂。操作条件温和，绿色环保，步骤简洁，能耗低，易于扩大化生产；本发明获得的羊毛残渣海绵具有疏松多孔的结构，表面富含多种活性基团，是一种性质优良、效果显著的生物吸附剂。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106434609A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610817209.6
申请日：2016-11-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种副短短芽孢杆菌Brevibacillus parabrevis CGMCC 10798角蛋白酶的分离纯化方法及应用。通过对一株副短短芽孢杆菌进行发酵培养，并对发酵液上清液采用硫酸铵沉淀和阴离子层析等步骤进行酶纯化，获得了SDS-PAGE电泳均一的副短短芽孢杆菌角蛋白酶，该纯酶的比酶活为6605.48U/mg，纯化倍数为13.18倍。获得的角蛋白酶对表面活性剂耐受性好、对角蛋白活力高、对胶原蛋白无酶活。本工艺特异性高，操作条件温和，步骤简洁，纯化效果好，回收率高，成本低，易于扩大化。本发明所获得副短短芽孢杆菌角蛋白酶在制革脱毛领域和促进药物吸收方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN106350530A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201610960882.5
申请日：2016-11-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/50
Abstract: 本发明提供了一种基于宏基因组技术挖掘的角蛋白酶及其基因编码序列与应用方法。该角蛋白酶基因全长1,152bp，编码384个氨基酸；以大肠杆菌E.coli为例，成功实现了该角蛋白酶基因的异源表达。该角蛋白酶基因的获取方法方便可行，将该基因进行重组表达，构建的重组菌株经过诱导可以分泌角蛋白酶，能有效水解可溶性角蛋白、酪蛋白、羊毛、羽毛等底物，在角蛋白废弃物生物降解、饲料加工、洗涤添加剂、材料生物合成、透皮药物制备等领域具有良好的应用价值。该角蛋白酶的最适反应温度为55℃，最适反应pH为10.0，且该角蛋白酶对表面活性剂表现出较好的耐受性，酶稳定性较好。重组菌发酵周期短，适合于工业化大规模的生产。
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公开(公告)号：CN119931909A
公开(公告)日：2025-05-06
申请号：CN202411871526.7
申请日：2024-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/31 , C07K14/32 , C12N9/12 , C12N9/16 , C12N9/26 , C12P19/26 , C12R1/125
Abstract: 本发明涉及一种高表达目的基因的重组枯草芽孢杆菌及其应用。本发明首先将噬菌体来源的T7RNA聚合酶整合至枯草芽孢杆菌基因组的amyE位点，并从枯草芽孢杆菌基因组不同区域的28个位点中筛选出4个表达活性最高的整合位点zinU、prtG、glpT、sfrAA，在这些位点对PT7启动子驱动的目的基因表达框及转录抑制蛋白LacI进行整合；其次对LacI进行突变体筛选，筛选出3个不同突变位点，在无需诱导剂的情况下即可大量合成目标蛋白。最后，将其应用于绿色荧光蛋白、透明质酸酶和透明质酸基因组的整合表达，分别获得高荧光活性、高透明质酸酶酶活和透明质酸稳定生产。本发明发酵表达过程中无需添加抗生素和诱导剂，使其成为合成生物学、酶工程和相关应用的有力工具。
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公开(公告)号：CN119265168A
公开(公告)日：2025-01-07
申请号：CN202411566649.X
申请日：2024-11-05
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/78 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12N1/19 , C12P17/12 , C12R1/19 , C12R1/125 , C12R1/84 , C12R1/15
Abstract: 本发明涉及一种新型腈水解酶及其在烟酸生物合成中的应用。本发明公开的新型腈水解酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的新型腈水解酶能够高效催化3‑氰基吡啶生成烟酸，尤其是启动子优化后的腈水解酶酶活提高，底物转化率达到100％，产物烟酸的累积浓度可达123.11g/L，对于绿色高效地制备烟酸及其衍生物具有重要的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN118931874A
公开(公告)日：2024-11-12
申请号：CN202411100911.1
申请日：2024-08-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种高效表达磷脂酶D的方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过表达元件共优化策略，实现了磷脂酶D的高效分泌表达，胞外酶活达到4055.9U/mL，相较于未改造菌株，酶活提高了43.6倍。本发明还根据此表达体系，通过整合位点筛选和多拷贝整合策略，首次实现了磷脂酶D的整合表达，整合菌株胞外酶活达到392.9U/mL。本发明的磷脂酶D具有良好的催化活性，能在水相条件下以大豆卵磷脂为底物高效合成磷脂酸。重组菌株酶活稳定性好、发酵周期短、催化效率高，为大规模工业化生产奠定了基础，表明该菌株在磷脂类衍生物的生物合成领域具有潜在应用价值。同时，整合菌株避免了发酵过程中抗生素的添加，拓宽了菌株的应用范围。
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