牛脂肪酸转运蛋白1基因启动子荧光素酶质粒的构建方法

    公开(公告)号:CN103509811A

    公开(公告)日:2014-01-15

    申请号:CN201310340744.3

    申请日:2013-08-07

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种牛脂肪酸转运蛋白1基因启动子荧光素酶质粒的构建方法。首先通过分子克隆方法克隆获得包含牛FATP1基因第一外显子的5’侧翼启动子序列,亚克隆至pMD19-T-Promoter载体,再利用KpnI和XhoI限制性内切酶双酶切后,将其产物纯化回收,并连接在pGL3-Basic质粒上,转化大肠杆菌JM109,挑取鉴定后的阳性克隆子,进行大量制备和保藏。此法构建的包含牛FATP1基因第一外显子的5’侧翼启动子的荧光素酶质粒(pGL3-Basic-Promoter),可转染细胞,进行启动子功能活性分析,以筛选出高效的组织特异性启动子,克服目前动物基因工程中可利用的组织特异性启动子数目的不足及调控能力较弱的缺陷。

    一种牛骨骼肌特异性表达基因MyoDⅠ启动子

    公开(公告)号:CN103509794A

    公开(公告)日:2014-01-15

    申请号:CN201210219237.X

    申请日:2012-06-29

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明提供了一种牛骨骼肌特异性表达基因MyoDⅠ启动子,其核心启动子(-108至94)包含如SEQID所示的DNA序列,其长度为202bp。本发明根据研究发现牛MyoDⅠ基因启动子具有骨骼肌特异性启动特性,并利用这一特性设计了一种骨骼肌特异性表达启动子载体,该启动子可以在转基因牛的培育中应用。该启动子载体具有骨骼肌特异性启动特性,而在除骨骼肌外的多种细胞中均无启动活性,可见该启动子在骨髂肌中特异性地启动下游基因的表达,能够满足目的基因在骨骼肌中特异性表达的要求,为转基因载体提供了一种重要的元件。

    一种羊舍自动投喂装置
    23.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109601410A

    公开(公告)日:2019-04-12

    申请号:CN201811628878.4

    申请日:2018-12-28

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种羊舍自动投喂装置,包括固定架,所述固定架的底部固定连接有支撑柱,且固定架的内壁固定连接有固定板,所述固定板的顶部设置有投喂箱,所述投喂箱的底部固定连接有投喂管,且投喂箱的底部靠近投喂管的一侧位置处设置有移动装置,所述投喂箱的内部设置有推动装置,且投喂箱的顶部固定连接有固定杆,所述推动装置的顶部固定连接有移动板,所述固定杆的顶部固定连接有监视器。通过移动装置的设置,可以让投喂箱在固定板上移动,对投喂槽自动加料,增强了该装置的灵活性,通过推动装置的设置,可以将投喂箱中的饲料推到投喂管中,防止饲料堆积的问题,增强了该装置的实用性。

    利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛MyoDⅠ基因核心启动子的方法

    公开(公告)号:CN103571941B

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201310341205.1

    申请日:2013-08-07

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛MyoDⅠ基因核心启动子的方法,包括以下步骤:构建含关岭牛MyoDⅠ基因启动子全长片段和亚克隆片段的重组载体;对骨骼肌生长相关的细胞进行培养和铺板;配制启动子重组子/脂质体的混合物,对步骤2)获得的细胞进行转染;通过双荧光素酶报告基因对步骤3)获得的转染细胞进行双荧光素酶活性检测。本发明具有灵敏度高、检测速度快、费用低、不需使用放射性同位素等优点,使用的pGL3-Basic报告基因,因其无启动子和增强子,可通过荧光素酶报告基因的表达来检测插入启动子的启动活性,并且比较启动子的强弱,进而初步确定核心启动子区域。

    改进型公羊采精架
    26.
    发明公开

    公开(公告)号:CN105078610A

    公开(公告)日:2015-11-25

    申请号:CN201510574685.5

    申请日:2015-09-11

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种改进型公羊采精架,包括整体框架,整体框架的侧面为直角梯形,在整体框架的直角梯形的高端顶部设有横梁,在横梁上设有一个固定杆及羊头宽度调节杆,在固定杆上设有羊头高度调节杆,在整体框架的两侧设有侧挡板,在侧挡板上设有护栏,护栏与侧挡板之间活动连接,护栏能沿侧挡板的垂直方向滑动。本发明在使用过程中可以根据台羊大小调节内部空间大小,从而防止其后驱的摆动,避免对采精工作造成干扰,并对羊只进行保护,并可减轻种公羊爬跨时重力,起到缓冲的作用。

    黔北麻羊FSHR基因单核苷酸多态性的检测方法

    公开(公告)号:CN104830987A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510244930.6

    申请日:2015-05-14

    Applicant: 贵州大学

    CPC classification number: C12Q1/6827 C12Q1/6888 C12Q2600/124 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明提供了一种黔北麻羊FSHR基因单核苷酸多态性的检测方法。本发明采用PCR-SSCP技术及PCR产物直接测序法对FSHR基因多态性位点进行检测,以探寻FSHR基因多态性和表达量与产羔数之间的相关性,为进一步研究黔北麻羊繁殖性状的遗传机制提供依据。首次在黔北麻羊FSHR基因第10外显子第1246bp发现C→A的碱基突变,BB基因型的产羔数与AA基因型和AB基因型差异显著(P﹤0.05),而AA、BB基因型之间差异不显著(P﹥0.05),即BB基因型的产羔数显著高于AA基因型和AB基因型。由此可知,FSHR基因是10外显子位点的变异影响黔北麻羊的产羔数,该变异位点对产羔有显著的影响,因此在黔北麻羊育种中,可通过选择BB基因型作为提高产羔数的辅助选择依据。

    含MyoDI基因启动子片段的重组质粒的构建方法

    公开(公告)号:CN104131019A

    公开(公告)日:2014-11-05

    申请号:CN201410383229.8

    申请日:2014-08-06

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明公开了一种含MyoDI基因启动子片段的重组质粒的构建方法,本发明采用4对5'端加磷的引物扩增不同长度的MyoDI基因启动子片段,与用高保真DNA聚合酶扩增出的不含启动子区的pEGFP-N3载体片段进行平末端连接,构建重组质粒。这种方法简便精确获得重组载体,与双酶切的方法比较具有不受酶切位点限制的优势,同时也不引入新的酶切位点,使实验结果更加符合单一变量的要求,实验结果更加可信。

    黔北麻羊FSHR基因单核苷酸多态性的检测方法

    公开(公告)号:CN104830987B

    公开(公告)日:2017-07-11

    申请号:CN201510244930.6

    申请日:2015-05-14

    Applicant: 贵州大学

    Abstract: 本发明提供了一种黔北麻羊FSHR基因单核苷酸多态性的检测方法。本发明采用PCR‑SSCP技术及PCR产物直接测序法对FSHR基因多态性位点进行检测,以探寻FSHR基因多态性和表达量与产羔数之间的相关性,为进一步研究黔北麻羊繁殖性状的遗传机制提供依据。首次在黔北麻羊FSHR基因第10 外显子第1246bp发现C→A的碱基突变,BB基因型的产羔数与AA基因型和AB基因型差异显著(P﹤0.05),而AA、BB基因型之间差异不显著(P﹥0.05),即BB基因型的产羔数显著高于AA基因型和AB基因型。由此可知,FSHR基因是10 外显子位点的变异影响黔北麻羊的产羔数,该变异位点对产羔有显著的影响,因此在黔北麻羊育种中,可通过选择BB基因型作为提高产羔数的辅助选择依据。

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