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公开(公告)号：CN106520947A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610989807.1
申请日：2016-11-10
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供一种适合甘蔗外源基因拷贝数鉴定的内源基因筛选与应用，采用的引物和探针的核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3，所述内源基因PCR扩增长度为95 bp。鉴于目前甘蔗外源基因拷贝数鉴定方法复杂、工作量大、效率低下、准确性低等问题，提供一种适合甘蔗外源基因拷贝数鉴定的内源基因筛选与应用，所建立的内源基因和外源基因标准曲线的构建方法，操作简单、灵敏度高、特异性强、准确度高及可重复性高，为转基因甘蔗外源基因拷贝数鉴定提供科学、准确、实用的检测方法。
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公开(公告)号：CN105713989A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201610271692.2
申请日：2016-04-28
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q2600/13 , C12Q2521/301 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明提供了一种鉴定甘蔗抗褐锈病基因位点紧密连锁的分子标记方法，分别以待鉴定甘蔗和“POJ2878”的基因组DNA为模板，利用引物1和引物2进行扩增，将扩增的PCR产物利用限制性核酸内切酶HaeIII进行酶切，通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物，与抗褐锈病甘蔗品种POJ2878的酶切产物进行比较，来判断所待鉴定甘蔗的抗病性。本发明方法可用于甘蔗抗褐锈病基因的图位克隆和分子标记辅助选择，通过检测抗褐锈病基因位点来预测待鉴定甘蔗对褐锈病的抗性，不仅节约生产成本而且大大提高选择效率，进而加速甘蔗抗褐锈病育种进程。
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公开(公告)号：CN103966233B
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201410197758.9
申请日：2014-05-13
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了一种甘蔗愈伤组织显色控制基因ScSN及其应用，根据玉米花青素转录因子基因SN（GenBank:X60706.1）的上游、下游序列设计引物，利用同源克隆技术，从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScSN的全长序列。甘蔗ScSN基因开放读码框长度为1722 bp，编码573个氨基酸。将甘蔗ScSN基因的编码区序列在NCBI中进行BLAST分析，与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中，E值等于零，说明了所克隆的基因确实为甘蔗花青素合成相关基因。在ScSN序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点，构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScSN，再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织，转化的愈伤组织颜色转变为暗红色，进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。
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公开(公告)号：CN103614471B
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201310607161.2
申请日：2013-11-26
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 以甘蔗内源基因ALS和外源基因元件（包括Ubiquitin启动子，NOS启动子、NOS 终止子，Bar基因和Bt基因）设计多重PCR引物。通过对多重PCR反应体系进行优化建立了添加60% Premix TaqTM体积、0.3μM引物浓度、150 ng DNA模板和设定56℃的退火温度的多重PCR反应体系，一次PCR反应可同时检测一个甘蔗内标准基因（ALS基因）和5个外源转基因元件（Ubi启动子、Bt基因、Bar基因、NOS启动子、NOS终止子），并且检测极限可达模板DNA含量的1%。本实验建立的多重PCR反应体系不仅可以检测转基因甘蔗外源基因成分，而且还能有效的检测其它转基因作物。
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公开(公告)号：CN103409413B
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201310292837.3
申请日：2013-07-12
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因果糖-6-磷酸2-激酶基因PCR引物序列及扩增方法。引物序列是由ScF2KP-F和ScF2KP-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103614471A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310607161.2
申请日：2013-11-26
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2537/143
Abstract: 以甘蔗内源基因ALS和外源基因元件（包括Ubiquitin启动子，NOS启动子、NOS终止子，Bar基因和Bt基因）设计多重PCR引物。通过对多重PCR反应体系进行优化建立了添加60%PremixTaqTM体积、0.3μM引物浓度、150ngDNA模板和设定56℃的退火温度的多重PCR反应体系，一次PCR反应可同时检测一个甘蔗内标准基因（ALS基因）和5个外源转基因元件（Ubi启动子、Bt基因、Bar基因、NOS启动子、NOS终止子），并且检测极限可达模板DNA含量的1%。本实验建立的多重PCR反应体系不仅可以检测转基因甘蔗外源基因成分，而且还能有效的检测其它转基因作物。
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公开(公告)号：CN101294221A
公开(公告)日：2008-10-29
申请号：CN200810071267.4
申请日：2008-06-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 一种大批量快速制备PCR模板的方法，属植物分子检测技术领域，具体涉及植物组织在裂解液中加热裂解和裂解液中和。本发明的技术方案是：将微量植物叶片放入一定体积的裂解液中加热裂解，然后中和，反应混合液可直接作为PCR反应的模板，在添加适量聚合酶稳定剂的情况下，PCR反应稳定，重复性强。该方法特别适宜大批量PCR反应模板的快速制备，可以大幅度提高分子检测和遗传分析的效率，极显著地降低成本。
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公开(公告)号：CN103805620B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201310715572.3
申请日：2013-12-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种无抗生素四价抗病虫和除草剂植物表达载体及应用。所述载体的T-DNA区结构为：右边界-35S启动子-正向双价抗病序列-内含子-反向双价抗病序列-OCS终止子-Ubi启动子-抗虫基因-NOS终止子-NOS启动子-抗除草剂基因-NOS终止子-左边界，T-DNA区左右边界内无抗生素基因，其中正向双价抗病序列即甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒双价干扰序列，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。得到的植物表达载体可用于转化获得同时具有4种抗性的转基因作物，并且获得的转基因作物没有抗生素抗性基因，可提高转基因作物的安全性。并且同一次转化中可获得同时具有4种抗性的转基因作物，与单一抗性的遗传转化相比，可以提高效率3倍以。
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公开(公告)号：CN103966234B
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201410197759.3
申请日：2014-05-13
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供的是一种甘蔗花青素调节基因ScRS及其应用，属于生物技术领域，调节基因ScRS序列如SEQ ID NO.1所示，根据玉米花青素转录因子RS基因序列设计引物，利用同源克隆技术，从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScRS的全长序列。甘蔗ScRS基因开放读码框长度为1722bp，编码573个氨基酸。与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中，E值等于零，说明了所克隆的基因确实为花青素有关的基因。在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点，构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS，再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织，转化的愈伤组织颜色转变为亮紫红色，进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。
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