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公开(公告)号：CN109752362B
公开(公告)日：2021-06-15
申请号：CN201910022818.6
申请日：2019-01-10
Applicant: 济南大学
IPC: G01N21/65
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于纳米金DNA分子机器与表面增强拉曼散射的生物传感器。为了解决以上现有技术中检测UDG活性的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种基于DNA分子机器表面增强拉曼散射检测UDG活性的生物传感器，将纳米金分子机器与表面增强拉曼相结合，均相反应混合液。制备方法：合成金纳米粒子；将Hairpin Probe和Track DNA以及拉曼染料修饰到金纳米粒子表面；将标记的纳米金溶液与均相反应溶液混合。利用了内切酶IV的特异性切割实现DNA分子机器开启，利用表面增强拉曼检测实现了高灵敏性检测；利用外切酶Ⅲ，实现了DNA分子机器的循环，起到了信号放大的作用。
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公开(公告)号：CN109470673B
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN201811589771.3
申请日：2018-12-25
Applicant: 济南大学
IPC: C12Q1/6844 , G01N33/53
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于滚环扩增技术和内切酶反馈放大方法检测三磷酸腺苷的荧光生物传感器，包括：两段适配体DNA序列、线性挂锁探针、连接探针、AP探针、T4 DNA连接酶缓冲液、核酸外切酶Ⅰ、核酸外切酶Ⅲ、PBS缓冲液、dNTP、phi29 DNA聚合酶、核酸内切酶IV；所述的荧光生物传感器的制备方法：（1）构建环形模板，制备复合探针；（2）复合探针与内切酶、目标物结合，实现信号放大。该探针可实现高特异性及超灵敏性检测；且反应温和、检测快、重复性好。
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公开(公告)号：CN111440850A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN202010273609.1
申请日：2020-04-09
Applicant: 济南大学
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6825 , C12Q1/44 , G01N21/76
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于DNAzyme的DNA Walker的化学生物传感器。为了解决以上现有技术中检测啶虫脒的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。一种基于DNAzyme的DNA Walker检测啶虫脒的化学生物传感器，利用DNAzyme裂解辅助实现循环放大，以及在金纳米颗粒形成许多模拟辣根过氧化物酶活性的G-四联体。制备方法：制备金纳米颗粒；将Walker链与Lock链修饰到金纳米粒子表面；标记的纳米金颗粒溶液的均相反应；DNAzyme裂解反应、化学发光检测；利用核酸适配体对目标物啶虫脒的高特异性检测；利用DNAzyme裂解反应放大，实现信号放大的作用。
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公开(公告)号：CN110542674A
公开(公告)日：2019-12-06
申请号：CN201910887031.6
申请日：2019-09-19
Applicant: 济南大学
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，基于金纳米粒子的DNA分子机器检测谷胱甘肽（GSH）的生物传感器，包括发卡探针HAP（茎部修饰二硫键）、复合探针P通过polyA修饰到纳米金的表面、P3探针、血红素、钾离子、目标物GSH、纳米金和缓冲液；基于目标物GSH对二硫键的裂解功能，使得发夹结构被破坏，释放Walker核酸链，释放的Walker核酸链和P3探针可以通过支点介导的链置换反应将P2从复合探针P上置换下来，P2为富含G-四联体的序列，在存在血红素时形成G-四联体/血红素DNA酶，从而构建了适体生物传感器，该传感器反应只需要一步，因此具有检测速度快，操作简便，价格低廉，检测限低，特异性高等优点。
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公开(公告)号：CN109444102A
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201811547164.0
申请日：2018-12-18
Applicant: 济南大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于滚环扩增介导催化发夹自组装和内切酶反馈放大方法检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器。该发明的检测方式是荧光法检测，利用荧光仪。在检测之前，先将挂锁探针和连接探针形成环形模板探针。然后将目标物加入到复合探针I、复合探针II和HP2、HP3的均相溶液，在37℃孵育120min，目标物与适配体序列绑定。在phi29 DNA聚合酶和核酸内切酶IV作用下完成多倍数反馈放大过程，从而实现信号的放大。然后用荧光仪设置激发波长为399 nm，检测610 nm处荧光强度，检测范围为560 nm-640 nm。同时本发明还提供了该生物传感器的制备方法，该方法反应条件温和，易于操作。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110609020B
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN201910754057.3
申请日：2019-08-15
Applicant: 济南大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于回文分子信标检测三磷酸腺苷（ATP）的生物传感器，包括回文分子信标MB、ATP适配体（劈开的适配体探针AP1、AP2）、目标物ATP、Bst DNA聚合酶、UDG、核酸内切酶IV和缓冲液；基于核酸适配体与目标物的特异性识别，从而使两个劈开的适配体片段尾部序列邻近，将回文分子信标MB的发夹结构打开产生荧光，与此同时预锁定的回文序列被释放，进行分子间的杂交，从而触发自发聚合、修复、内切、循环过程，实现荧光信号的放大，从而构建了适体生物传感器，该传感器反应只需要一步，因此具有检测速度快，操作简便，价格低廉，检测限低，特异性高等优点。
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公开(公告)号：CN109596592B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201910091120.X
申请日：2019-01-30
Applicant: 济南大学
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器，包括适配体Apt、模板T、发卡探针H1、发卡探针H2、phi29、沙门氏菌、Nt.Alwl内切酶和缓冲液；基于核酸适配体与目标物的特异性识别，将Apt与T形成的桥型结构打开，利用Phi 29聚合酶的链延伸功能打开H2产生荧光，以及3’翘起部分特异性消化实现目标物的循环放大，在Nt.Alwl内切酶的协助下，产生大量能打开H1的Trigger链，而Trigger进一步循环实现荧光信号的放大，从而构建了适体生物传感器，该传感器反应只需要一步，因此具有检测速度快，操作简便，价格低廉，检测限低，特异性高等优点。
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公开(公告)号：CN109444105B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201811621278.5
申请日：2018-12-28
Applicant: 济南大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于聚合酶协助反馈滚环扩增和内切酶放大荧光法检测DNA糖基化酶UDG的荧光生物传感器。为了解决以上现有技术中检测UDG的方法特异性和灵敏度都比较低的问题。一种基于反馈滚环扩增技术检测UDG的生物传感器，将phi29聚合酶、核酸内切酶IV的配合实现滚环放大作用，以及荧光基团与猝灭基团的荧光共振能量转移，均相反应混合液。制备方法：环形模板及复合探针的构建；反馈滚环放大信号、荧光检测；利用了UDG酶对碱基U的特异性水解，利用这种特殊反应可以精准地测定UDG，同时还可以避免干扰的发生；利用核酸内切酶Ⅳ循环放大，实现信号放大的作用。
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公开(公告)号：CN109540860B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201811589823.7
申请日：2019-02-19
Applicant: 济南大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于杂交连锁反应放大的荧光生物传感器。为了解决以上现有技术中检测卡那霉素的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高的问题。本发明将核酸内切酶IV与链杂交连锁反应的配合实现循环放大作用，以及荧光基团与猝灭基团的荧光共振能量转移，均相反应混合液。制备方法：制备金纳米粒子；将Walker与Track修饰到金纳米粒子表面；将标记的纳米金溶液与均相反应溶液混合；杂交连锁反应、荧光检测；利用了核酸Aptamer的特异型识别，利用核酸Aptamer对目标物卡那霉素的高特异性检测；利用杂交连锁反应放大，实现信号放大的作用。
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公开(公告)号：CN111521808A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010319559.6
申请日：2020-05-26
Applicant: 济南大学
Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于金纳米粒子的DNA分子机器检测多氯联苯（PCB）的生物传感器，发卡探针HAP1通过polyA修饰到纳米金的表面和HAP2、拱形探针（由Walker链和APT杂交成的双链）通过polyA修饰到纳米金的表面；基于目标物PCB对适配体的亲和力，破坏拱形探针，释放Walker核酸链，通过toehold介导打开HAP1，进而打开HAP2，从而把Walker链挤掉，挤掉的Walker链与其他的HAP1杂交，依次循环直至HAP2全部被打开，暴露出G‑rich序列，在存在血红素时形成G‑四联体/血红素DNA酶。G‑四联体/血红素类辣根过氧化物酶催化鲁米诺产生化学发光，从而构建了生物传感器；该传感器反应只需一步，检测速度快，操作简便，价格低廉，检测限低，特异性高。
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