一种鸡胚肝细胞体外分离培养及脂肪变性模型建立方法

    公开(公告)号:CN109182247B

    公开(公告)日:2021-06-04

    申请号:CN201811026047.X

    申请日:2018-09-04

    Abstract: 本发明公开了细胞毒理技术领域的一种鸡胚肝细胞体外分离培养及脂肪变性模型建立方法。该方法包括如下步骤:(1)取SPF鸡胚;(2)剪碎;(3)消化;(4)离心:弃上清,留取沉淀物加入预热的Williams’E完全培养液重悬,得到细胞悬液B;(5)细胞分离:采用Percoll密度梯度离心;(6)取肝细胞:吸取界面处细胞加入D‑Hank’s液吹打混匀,置于离心机离心,弃上清,留取沉淀物加D‑Hank’s液冲洗重悬,重复离心2‑3次,弃上清,留取沉淀物并加入Williams’E完全培养液,得到细胞悬液C;(7)计数;(8)种板;(9)换液;(10)诱导脂肪变性:种板后30‑40h后,更换诱导剂进行培养,培养10‑15h,获得脂肪变性肝细胞。本发明能够快速获得原代培养细胞,纯度高,同时诱导时间短。

    一种鉴定丝羽乌骨鸡和竹丝鸡的分子标记及应用

    公开(公告)号:CN112094921A

    公开(公告)日:2020-12-18

    申请号:CN202011041161.7

    申请日:2020-09-28

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定丝羽乌骨鸡和竹丝鸡的分子标记及应用。所述分子标记为位于线粒体基因组14945bp处的SNP位点,其存在A/G多态性,当该位置碱基为A时,为竹丝鸡,当该位置碱基为G时,为丝羽乌骨鸡。利用引物SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2对含有所述分子的基因片段进行扩增,然后用限制性内切酶HpaI酶切扩增产物,获得一条690bp扩增片段的为竹丝鸡,获得540bp和150bp两条扩增片段的为丝羽乌骨鸡。本方法操作简便,结果可靠。采用本发明的方法能够快速、准确鉴别丝羽乌骨鸡和竹丝鸡,该法易于操作,费用低,便于基层推广和使用,具有广阔的市场应用前景。

Patent Agency Ranking