棉花子叶离体培养不定芽诱导植株再生的方法

    公开(公告)号:CN101088323A

    公开(公告)日:2007-12-19

    申请号:CN200710024879.3

    申请日:2007-07-06

    Abstract: 本发明涉及棉花子叶离体培养不定芽诱导植株再生的方法,属于植物组织培养范畴。本发明以棉花种子无菌苗的子叶为外植体材料,接种在附加6-苄基氨基嘌呤3.0mg/L、吲哚乙酸1.0mg/L、2-异戊烯腺嘌呤1.0mg/L、硝酸银5.0mg/L的不定芽诱导培养基上,不定芽长到1.5cm高度时转到幼苗生长培养基上,获得再生植株;珂字棉312品种不定芽的诱导频率高达70%左右,陆地棉泗棉3号品种不定芽的诱导频率高达60%左右。棉花子叶离体培养不定芽诱导植株再生技术操作简便,培养周期短,植株再生频率高,为规模化开展棉花体细胞培养和农杆菌介导基因转化提供新的更有效的实用技术。

    海雀稗幼穗离体培养植株再生技术

    公开(公告)号:CN101011035A

    公开(公告)日:2007-08-08

    申请号:CN200710066909.7

    申请日:2007-01-25

    Abstract: 海雀稗幼穗离体培养植株再生技术,属于植物组织培养方法,现有的海雀稗离体培养技术存在着诱导产生的愈伤组织在继代培养过程中丧失绿苗分化能力、不宜用于体细胞突变体筛选和农杆菌介导法基因转化的缺陷,本发明以颖花分花时期的幼穗为外植体材料,在附加2,4-二氯苯氧乙酸2.0mg/L、6-苄基氨基嘌呤0.05mg/L的愈伤组织诱导培养基上获得浅黄色、干燥、颗粒状愈伤组织的数量占诱导产生的愈伤组织总数40%以上;在提高琼脂条-固化剂用量1倍的培养基上进行继代培养,愈伤组织保持颗粒状结构,经过连续3代继代培养的愈伤组织的绿苗分化率达98%。本方法适用于海雀稗微繁殖、体细胞突变体筛选和基因转化。

    一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN104099363B

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201410346343.3

    申请日:2014-07-18

    Abstract: 本发明涉及生物载体领域,特别涉及一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用。构建方法,包括以下步骤:构建aroA基因敲除打靶片段;将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株,获得BL21(DE3)/pKD46菌株;将aroA基因敲除打靶片段转化至该菌株,获得BL21(DE3)ΔaroA菌株。本发明提供的一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法,采用大于500bp的同源侧翼序列,利用Red同源重组技术成功的敲除BL21(DE3)菌株的aroA基因;该菌株既可用于EPSPS功能互补验证,还实现了pET系统重组外源蛋白的大量表达,达到一举两得的效果。

    一种批量检测植物基因组LTR-反转座子的方法

    公开(公告)号:CN103824000B

    公开(公告)日:2016-09-28

    申请号:CN201410062207.1

    申请日:2014-02-24

    Abstract: 本发明公开了一种批量检测植物基因组LTR‑反转座子的方法。本发明所提供的检测植物基因组LTR‑反转座子的方法综合运用了基于结构特征从头寻找的LTR_STRUC程序,基于同源搜索的CROSS_MATCH程序,基于序列相似性的CLUSTALW比对程序,以及结合Perl脚本语言编程等方法。实验证明,本发明所提供的批量检测LTR‑反转座子的方法比较系统,检测植物基因组LTR‑反转座子插入位点正向重复的效果好,速度快,易实现流程化。本发明将常用的检测LTR‑反转座子的软件与Perl脚本语言编程相结合,一定程度上弥补了这些常用软件的一些不足。本方法将在基因组注释和批量检测植物基因组LTR‑反转座子中发挥着重要的作用。

    一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN104099363A

    公开(公告)日:2014-10-15

    申请号:CN201410346343.3

    申请日:2014-07-18

    Abstract: 本发明涉及生物载体领域,特别涉及一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用。构建方法,包括以下步骤:构建aroA基因敲除打靶片段;将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株,获得BL21(DE3)/pKD46菌株;将aroA基因敲除打靶片段转化至该菌株,获得BL21(DE3)ΔaroA菌株。本发明提供的一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法,采用大于500bp的同源侧翼序列,利用Red同源重组技术成功的敲除BL21(DE3)菌株的aroA基因;该菌株既可用于EPSPS功能互补验证,还实现了pET系统重组外源蛋白的大量表达,达到一举两得的效果。

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