一种基于USER酶构建的长片段RNAi载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN111808876A

    公开(公告)日:2020-10-23

    申请号:CN202010640787.3

    申请日:2020-07-06

    Abstract: 本发明提供了一种基于USER酶的一步法快速构建带发夹结构的长片段RNAi载体的方法,提供了一种可用于制备带发夹结构的长片段RNAi载体的2301RNAiOS载体,以及一种基于USER酶构建的用于3LRR基因沉默的长片段RNAi载体。与目前已有的产生发夹结构的RNAi载体构建方法相比,本发明方法利用USER酶的特性,可以进行一步法构建,片段和载体在同一反应体系下,快速得到所需目的载体;而且更加高效,一次即可获得目的载体,成功率100%;同时本发明方法对插入片段长度和酶切位点没有要求,任何片段均可非常容易构建进入本发明的2301RNAiOS载体之中,特别适用于长片段RNAi载体的构建,非常高效和方便。

    一种用于提高植物抗病性的基因及其应用

    公开(公告)号:CN106047906A

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201610331638.2

    申请日:2016-05-18

    Abstract: 本发明公开一种用于提高植物抗病性的基因及其应用,该基因LeAct1编码一种胍基丁胺转移酶,其具有序列表中的SEQ ID NO.1的DNA序列,或具有在高严谨条件下可与SEQ ID NO.1杂交的DNA序列,或编码与序列表中SEQ ID NO.1相同氨基酸序列的DNA序列。将该基因转化导入受体植物基因组,表达胍基丁胺转移酶,可以提高受体植物的抗病能力。应用于农业生物技术育种以提高作物抗病性状,而且可以大大缩短育种周期,提高育种效率。

    一种棉花黄萎病功能基因的分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN104846109A

    公开(公告)日:2015-08-19

    申请号:CN201510290647.7

    申请日:2015-05-29

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/13 C12Q2600/156

    Abstract: 本发明提供了一种棉花黄萎病功能基因标记及其应用,属于农作物分子遗传育种学领域。本发明通过BAC测序,获得了一个无完整阅读框的表面受体蛋白基因,利用该基因与其他已知有黄萎病抗性作用基因序列有差异的位置设计了9条基因特异引物,用于扩增黄萎病抗感材料的DNA。其中只有一对引物Gbvds1549在所有感病材料中扩增出长度为1549bp的片段,核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,但是在抗病材料中没有扩增产物。同时在此基础上开发了功能分子标记的方法。通过检测该功能分子标记,可以准确检测不同棉花品种或材料的黄萎病抗性,可应用于筛选棉花杂交转育后代植株,提高选育效率,显著节约育种筛选成本,获得黄萎病抗性较好的材料。

    一种利用RNAi技术培育抗TYLCV番茄的方法

    公开(公告)号:CN102533853A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210051736.2

    申请日:2012-03-02

    Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi技术培育抗TYLCV番茄的方法,属于生物技术领域。该方法将TYLCV的V2和C1基因中的保守序列嵌合并构建反向重复序列的RNAi载体,通过农杆菌介导转化法转化番茄无菌苗子叶或下胚轴外植体,转基因番茄经TYLCV的农杆菌侵染性克隆注射接种和携带TYLCV的烟粉虱接种病毒后都表现对TYLCV抗性,未观察到明显的发病症状。本发明利用RNAi技术可以培育抗TYLCV番茄转基因株系,为防治TYLCV提供了技术支持。

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