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公开(公告)号：CN102277402B
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN201110204137.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12P21/02 , C07K14/435 , C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种动物细胞内核蛋白提取方法。该方法通过利用细胞穿透肽、外源核蛋白和绿色荧光蛋白共同构建重组核蛋白表达载体，介导重组核蛋白在细胞核内表达，待重组核蛋白在细胞内表达稳定后，使用操作液处理细胞，收集细胞，超声波破碎，离心去沉淀后收集细胞上清液，上清液过滤除菌后添加到细胞培养液中，4h后提取的荧光标记外源重组核蛋白通过细胞质进入细胞核并定位于细胞核内。利用该方法提取的核蛋白能够发挥蛋白功能使细胞发生形态特征的改变，结果证实本发明能够简单、快速、高效地提取具有生物活性的细胞内核蛋白。
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公开(公告)号：CN102268404A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201110204169.5
申请日：2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 本发明公开了一种猪卵丘干细胞的分离方法。其方法是抽取青年母猪卵丘卵母细胞复合物，卵母细胞体外成熟培养后，消化脱离卵丘细胞，收集消化的卵丘细胞进行培养，待有细胞集落出现并形成较大的细胞集落后，消化传代接种到饲养层上，在含有细胞因子的培养液中进行培养，分离培养的卵丘干细胞具有鸟巢状细胞生长形态，细胞圆形、核较大，细胞表达干细胞特有的标记Oct4、Nanog、SSEA1，体外分化能够形成来源于三个胚层的神经细胞、肌肉细胞和肝脏细胞，结果显示从猪卵丘细胞中分离培养了卵丘干细胞。
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公开(公告)号：CN110169367B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN201910507267.2
申请日：2019-06-12
Applicant: 安徽农业大学 , 凤阳县大明农牧科技发展有限公司
Abstract: 本发明涉及畜舍通风设备领域，尤其涉及一种封闭式畜舍的新风系统，包括外箱体，所述外箱体的内部贯穿废气进入通道，且所述废气进入通道的一端连接进气斗；所述进气斗的侧部固定过滤网；所述废气进入通道的另一端安装废气风机，且所述废气风机的端部与外固定套连接；所述外固定套的另一端连通废气排出管，且所述废气排出管的端面转动连接若干个百叶板；所述外固定套的内部插入连接过滤板；所述废气进入通道的底部固定导热板，且所述导热板的侧部连接进出口；所述导热板固定于新风排出通道的顶部，且所述新风排出通道的端部连接新风风机。本发明保持畜舍冬季温暖，夏季凉爽，提升动物生活的舒适度，提高生产力。
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公开(公告)号：CN110169367A
公开(公告)日：2019-08-27
申请号：CN201910507267.2
申请日：2019-06-12
Applicant: 安徽农业大学 , 凤阳县大明农牧科技发展有限公司
Abstract: 本发明涉及畜舍通风设备领域，尤其涉及一种封闭式畜舍的新风系统，包括外箱体，所述外箱体的内部贯穿废气进入通道，且所述废气进入通道的一端连接进气斗；所述进气斗的侧部固定过滤网；所述废气进入通道的另一端安装废气风机，且所述废气风机的端部与外固定套连接；所述外固定套的另一端连通废气排出管，且所述废气排出管的端面转动连接若干个百叶板；所述外固定套的内部插入连接过滤板；所述废气进入通道的底部固定导热板，且所述导热板的侧部连接进出口；所述导热板固定于新风排出通道的顶部，且所述新风排出通道的端部连接新风风机。本发明保持畜舍冬季温暖，夏季凉爽，提升动物生活的舒适度，提高生产力。
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公开(公告)号：CN109554484A
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201811552309.6
申请日：2018-12-19
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种快速检测猪胚胎全基因组转录活性的方法。包括如下步骤：将卵母细胞或各期胚胎放入有含有2mM EU的预热的完全培养基中孵育；卵母细胞或各期胚胎样品收集。将与EU共孵育过后的卵母细胞或各期胚胎进行固定、通透；“click”反应标记荧光染料。将与EU共孵育、固定、通透后的卵母细胞或各期胚胎放入Click-iT reaction cocktail中孵育30min，使其标记上荧光染料。将带有荧光染料卵母细胞或各期胚胎进行压片、封片。EU染色可以大大缩短的检测时间且操作简单、方便、快捷，是一种理想的快速检测猪胚胎全基因组转录活性的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109402220A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811470251.0
申请日：2018-11-28
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/24
Abstract: 本发明公开了一种收集囊胚腔液体的方法，包括如下步骤：显微操作针的准备，用拉针仪，断针仪和磨针仪制作内径为10μm的注射针以及针口为40μm的固定针，注射针要将针尖拔尖；囊胚腔液体的收集，在显微操作仪下，用固定针固定住内细胞团一侧，用注射针刺入囊胚腔中吸取囊胚腔中的液体至于1μLDPBS液滴中，收集完成后用较细的口吸针将囊胚腔中的液体转移到进口200μL的离心管中；囊胚腔液体中DNA含量的检测。这种收集方法采用自制的较细的注射针易刺破囊胚腔，对囊胚后续发育所产生的影响较小，且较为精准，可以收集单个囊胚腔中的液体，为胚胎植入前遗传学筛查提供新的方法。
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公开(公告)号：CN105256032A
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201510693019.3
申请日：2015-10-22
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2565/125 , C12Q2565/131
Abstract: 本发明公开了一种用Pax3基因检测皖东牛体型体重的方法，包括牛血液基因组提取、引物设计、PCR反应、PCR-SSCP分析和统计模型建立等步骤，采用PCR-SSCP技术结合DNA测序检测牛Pax3基因变异位点，PCR-SSCP分析结果显示三种带型，测序后发现Pax3基因位于第二外显子的1270bp处的T>G碱基突变上，三种带型分别被命名为TT、TG和GG型，并在皖东黄牛群体中做了分型统计及其与体尺性状的关联分析，发现TT型和TG型的胸围、管围、体重显著高于GG型。本发明可以预测和检测皖东牛体型体重的大小，操作简单、费用低、精确度高、可快速检测，此方法加快了选种的速度和准确性。
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公开(公告)号：CN104997896A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510416908.5
申请日：2015-07-14
Applicant: 安徽农业大学
IPC: A61K36/752 , A61K9/14 , A61P1/12 , A61K33/32
Abstract: 本发明公开了一种用于治疗羔羊腹泻病的超微散剂，按重量计，所述超微散剂的配方组分包括：荆芥炭3～7份、柴胡1～6份、紫草1～6份、焦栀子2～7份、枳实炭2～6份、高锰酸钾1～6份。该超微散剂具有抗菌、抗病毒、抗炎、止泻、解热等作用，对羔羊腹泻的治愈率达90％以上，疗效显著，而且用药疗程短，该超微散剂配方组分以中药为主，安全性高，对病原菌不易产生耐药性，可直接制成口服制剂，通过灌胃方式给药，作用直接，使用方便，无急性毒性和副作用；另外，该超微散剂的制备方法简单，成本低廉，适于工业化批量生产。
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公开(公告)号：CN102586310A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210060220.4
申请日：2012-03-02
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种山羊Myostatin基因敲除载体的构建方法。该方法根据绵羊Myostatin基因序列，设计了两对PCR引物，以山羊胎儿成纤维细胞中提取的基因组DNA为模板，采用高保真长片段Taq酶，通过Long-PCR方法来扩增获得同源臂，同源长短臂分别为4.6kb和1.9kb。为验证所得到的同源臂序列是否可用，将扩增片段分别克隆到pMD18-T载体上，酶切、PCR鉴定后进行序列测定及同源性比较。再将同源长、短臂分别克隆到载体pLOXP，后用酶切、PCR方法进行鉴定。筛选得到构建含有neo和HSV-tk正负筛选标记基因的MNST基因打靶载体pLOXP-MSTN。本发明用Long-PCR方法等构建Myostatin基因敲除载体，并对山羊胎儿成纤维细胞进行转染，获得基因敲除细胞。运用此项技术，可以获得高瘦肉率动物，构建MNST基因敲除的山羊模型，为进一步研究该基因在山羊中的功能具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN102358892A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110286472.4
申请日：2011-09-23
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明公开了牛iPS细胞拟胚体的制作方法，包括牛胎儿成纤维细胞的培养、牛iPS细胞的诱导和培养及鉴定、牛iPS细胞的拟胚体制作、牛iPS细胞的拟胚体悬浮培养和牛iPS细胞的拟胚体体外分化能力检测。该制作方法形成的牛iPS细胞拟胚体避免了传统拟胚体的悬滴操作、拟胚体组成细胞纯度高、拟胚体组成细胞体外分化能力强等特点，结果显示了牛iPS细胞拟胚体的制作方法具有实用性强、易操作和推广等优点。
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