一种茶树组培再生体系建立的方法

    公开(公告)号:CN102726296A

    公开(公告)日:2012-10-17

    申请号:CN201210227942.4

    申请日:2012-07-04

    Abstract: 本发明涉及一种茶树组培再生体系建立的方法。具体操作步骤如下:1.愈伤组织的诱导,2.愈伤组织的继代和增殖,3.不定芽的诱导,4.不定芽的增殖,5.壮苗,6生根和移栽。本发明具有两步增殖阶段,即愈伤组织增殖和不定芽增殖。愈伤组织增殖方式,具有增殖方式简单、遗传稳定的特点,实验发现在继代4年后,细胞的活力和分化能力没有明显变化;而且愈伤组织由于酚类物质含量较低,可以成为遗传转化的对象。因此本技术为茶树遗传转化体系的建立奠定了坚实的实验基础。

    利用反式白藜芦醇苷水解制备反式白藜芦醇的方法

    公开(公告)号:CN101519343A

    公开(公告)日:2009-09-02

    申请号:CN200910116109.0

    申请日:2009-01-21

    Abstract: 本发明涉及反式白藜芦醇苷水解制备反式白藜芦醇的方法,解决了现有酶法处理所需时间较长、单纯的酸水解的反式白藜芦醇苷转化率很低的问题。本发明水解转化体系的配方为90%纯度的反式白藜芦醇苷∶甲醇∶12%盐酸溶液为4∶2∶2;按上述配方,将90%纯度的反式白藜芦醇苷溶解于甲醇中,充分溶解后,加入12%盐酸溶液;在温度55-75℃条件下,水解反应1-3h;水解体系经过硅胶板的薄层层析,并取得刮下物;将刮下物用3ml甲醇溶解,并超声清洗震荡,分离,冻干上清液即得白色粉末状的反式白藜芦醇。与现有的酶法技术相比,转化率高为45%,水解时间短为1-3小时。本发明方法操作简单;由于甲醇是可以再回收利用的,因此生产成本低,易于实现工业化生产。

    茶树儿茶素组织细胞化学定位方法

    公开(公告)号:CN101482520A

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200910116108.6

    申请日:2009-01-21

    Abstract: 本发明涉及茶树儿茶素组织细胞化学定位方法,解决了现有酚类组织化学定位技术中染色显色特异性差、显色速度慢、灵敏度不高,无法进行茶树儿茶素组织细胞化学定位的问题。本发明包括下述操作步骤:取幼嫩的茶树的鲜叶或嫩茎或根尖或茶愈伤组织;制成切片;用滴管从组织切片的侧面滴加1%~3%(w/v)香草醛浓盐酸溶液,从组织切片的另一侧用滤纸吸取溶液,直至到材料完全变红;用滤纸吸取多余的香草醛浓盐酸溶液,并用吹风机吹干切片表面,得染色切片;染色后30分钟内,对染色切片显微拍照,记录染色切片染色后形态。本发明染色过程简单,操作方便;与常用的三氯化铁等酚类物质的显色剂相比较,香草醛酸性溶液染色剂显色速度快,灵敏度高,特异性好;不仅能对茶组织器官儿茶素定位,还可以对茶细胞器儿茶素精确定位。

    茶树中二氢黄烷醇4-还原酶/无色花青素还原酶的快速检测方法

    公开(公告)号:CN101482500A

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200910116179.6

    申请日:2009-02-06

    Abstract: 本发明涉及茶树中二氢黄烷醇4-还原酶/无色花青素还原酶和花青素还原酶的快速检测方法,解决了公知技术中酶活性检测方法操作繁琐、成本高、检测时间长的问题。本发明方法包括酶提取液制备、酶提取液中蛋白质含量的测定和酶活性的测定三个步骤,其中利用检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸溶液(NADPH)的消耗来检测酶活性,在反应体系中加入维生素C可以降低底物DHM和CYA对酶活性检测的干扰。本发明方法简单,成本低,检测时间15-25分钟即可完成;采用紫外分光光度计即可进行活性测定;环保安全,不需要使用有毒的有机溶剂;测定的准确性较高,可以对酶活性的变化进行连续检测,增加了测定的准确性。

    一种根际放线菌ASG及其在耐铝促茶树生长中的应用

    公开(公告)号:CN116042439B

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202211051373.2

    申请日:2022-08-31

    Abstract: 本发明公开了一种根际放线菌ASG,SinomonasgamaensisASG,及其在耐铝促茶树生长中的应用,所述根际放线菌ASG属于放线菌门中华单胞菌属,于2022年3月7日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCCNO.M2022212。所述根际放线菌ASG的16SrDNA基因序列为SEQIDNo.1所示的核苷酸序列。本发明的根际放线菌ASG是通过梯度稀释法分离自2mM浓度Al3+处理半年的茶园土壤中,该菌株对金属铝的最大耐受浓度达到了6mM;此外,该根际放线菌ASG可以明显提高正常以及2mM铝胁迫下茶树茶籽苗和扦插苗的株高、根长、地上部干重、根干重,对受铝胁迫下的茶树幼苗生长有显著促生作用,具有广泛的应用前景。

    一种协同催化茶树酯型儿茶素生物合成的基因组合及其应用

    公开(公告)号:CN113528552B

    公开(公告)日:2024-01-09

    申请号:CN202110748006.7

    申请日:2021-07-01

    Abstract: 烟草和共表达重组蛋白。本发明公开了一种协同催化茶树酯型儿茶素生物合成的基因组合及其应用,属于分子生物学及代谢工程学技术领域,包括基因CsSCPL4和基因CsSCPL5,所述基因CsSCPL4和基因CsSCPL5具有如下序列中任意一种:(1)如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列;(2)具有(1)的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。本发明首次从茶树中克隆并验证了催化酯型儿茶(56)对比文件Yajun Liu et al..Purification andCharacterization of a NovelGalloyltransferase Involved in CatechinGalloylation in the Tea Plant (Camelliasinensis)《.THE JOURNAL OF BIOLOGICALCHEMISTRY》.2012,第287卷(第53期),第44406-44417页.

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