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公开(公告)号：CN112458152B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202110045497.9
申请日：2021-01-13
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/682
Abstract: 由于外泌体与生理、病理过程的改变有紧密的联系，因而，外泌体被视为一种很有前景的生物标志物。当前，高灵敏检测外泌体依然是一个巨大的挑战。我们提出了基于球形核酸(spherical nucleic acids，SNAs)级联信号放大策略用于高灵敏检测外泌体。在该方法中，引物链通过疏水作用力与外泌体膜结合形成SNAs。接着，SNAs可被脱氧核糖核酸末端转移酶(TdT)聚合形成polyT链。polyT链作为模板在核酸外切酶III(Exo III)作用下不断切割信号探针(探针A)。随后，新的引物链和新的模板链不断生成，并在双酶的作用下消耗探针A，最后导致电化学信号剧烈降低。总之，该方法提供了一种简单的基于SNAs的级联信号放大策略用于高灵敏检测外泌体并具有潜在的临床诊断应用价值。
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公开(公告)号：CN117368474A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202310525178.7
申请日：2023-05-10
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种基于适体功能化金属有机框架自组装的乳腺癌可视化诊断的新方法。本发明通过磷酸化四面体DNA诱导金属有机框架(MOFs)发生自组装产生信号放大，并结合对磁珠表面修饰DNA适体进行滚环扩增实现了双重信号放大的目的，实现对靶标蛋白HER2的高灵敏检测。此外，磁珠及MOFs表面DNA适体探针对HER2的双重识别能够有效提高靶标检测的特异性。最终本发明实现了HER2检测的最低浓度为12pg/L，且每个样品的检测成本仅为0.6元人民币，检测限及成本远低于商品化的ELISA检测试剂盒。更重要的是本发明可以成功区分HER2阳性乳腺癌和三阴性乳腺癌患者的血清样本。因此，本发明构建的新方法为HER2阳性乳腺癌患者的早期诊断和疾病进展监测提供了更多的临床可能性，具有巨大的临床应用潜力。
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公开(公告)号：CN112458152A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202110045497.9
申请日：2021-01-13
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/682
Abstract: 由于外泌体与生理、病理过程的改变有紧密的联系，因而，外泌体被视为一种很有前景的生物标志物。当前，高灵敏检测外泌体依然是一个巨大的挑战。我们提出了基于球形核酸(spherical nucleic acids，SNAs)级联信号放大策略用于高灵敏检测外泌体。在该方法中，引物链通过疏水作用力与外泌体膜结合形成SNAs。接着，SNAs可被脱氧核糖核酸末端转移酶(TdT)聚合形成polyT链。polyT链作为模板在核酸外切酶III(Exo III)作用下不断切割信号探针(探针A)。随后，新的引物链和新的模板链不断生成，并在双酶的作用下消耗探针A，最后导致电化学信号剧烈降低。总之，该方法提供了一种简单的基于SNAs的级联信号放大策略用于高灵敏检测外泌体并具有潜在的临床诊断应用价值。
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公开(公告)号：CN111948391A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN201910416356.6
申请日：2019-05-16
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/58 , C08G83/00 , B82Y15/00 , B82Y5/00
Abstract: 本发明公开了一种基于纳米金属有机框架构建新型阵列传感用于结肠癌组织学诊断的方法，为人类肿瘤分类提供了一种新方法，并且为MOF在生物传感中的应用提供了一种新思路。我们选择三种结构稳定的NMOF(Cu-MOF，Fe-MOF和Zr-MOF)，与两个5-TAMRA标记的单链DNA，设计了六个NMOFs-DNA复合物作为识别元件(NP1-NP6)。复合物中DNA的荧光被纳米颗粒淬灭，当样本的组织裂解液与识别元件一起温育时，蛋白质通过多种弱相互作用力与NMOF表面发生相互作用，选择性地置换作为报告探针的DNA分子并产生荧光强度的变化，组成传感阵列，能够有效地识别不同的肿瘤组织。这种方法提供了一种辨别力高、适应性强的替代方案来鉴别结肠癌的肿瘤组织，在医学诊断中具有广泛的发展前景。
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公开(公告)号：CN111443049A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201910046219.8
申请日：2019-01-17
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及了一种锆基金属-有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒的比色阵列传感器的制备方法及应用。通过设计了6种不同的单链DNA序列修饰在金纳米颗粒表面，形成独特的传感器识别元件。新型材料锆基金属有机框架通过不同的分子间作用力，可以结合并沉淀单链DNA序列修饰在金纳米颗粒，在某些蛋白质或精液样本的加入后，可以加速或减缓他们的结合力，影响其聚集行为，从而产生可检测的信号。因此，我们可以认为这些识别元件与不同的靶标结合具有不同的相互作用，我们可以通过组合分析每个识别元件的比色响应，可以明显的检测不同的靶标。本发明可以简单高效地用于多种蛋白质及男性精液的比色阵列分析，为男性不育症的分析提供检测依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111307721A
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN201811514485.0
申请日：2018-12-12
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种构建新型离子门控的方法，为离子通道及功能的研究提供了一种模型和方法。通过光照变化切换Azo-DNA的顺式和反式状态，可以可逆地控制离子门控。在纳米通道-离子通道复合体的阻挡层上进行修饰后，Azo-DNA在紫外线照射下呈现为单链状态。在这种情况下，GO可通过π-π堆积相互作用与单链Azo-DNA紧密地结合，因此这种纳米结构系统处于“闭合”状态。在被可见光照射后，由于Azo的光响应性，Azo-DNA变成发夹结构，双链DNA不能稳定地与GO结合，因此切换到“开放”状态。本装置的发现为离子通道的构建，离子功能和离子量的研究提供了模型和方法。此外，这种生物启发的系统具有良好的生物相容性和多样化设计的优势，具有纳米医学，生物传感器和受控药物输送等潜在应用。
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公开(公告)号：CN110873745A
公开(公告)日：2020-03-10
申请号：CN201811053636.7
申请日：2018-09-04
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/327
Abstract: 一种检测急性髓性白血病标志物Siglec-5的新方法。原理如下：在本发明工作中，我们基于DNA发夹结构和核酸适配体构建了新型的电化学生物传感器，用于检测急性髓性白血病标志物Siglec-5。我们在所设计的DNA发夹结构的5’-末端修饰了巯基-SH，使得该发夹结构可以通过Au-S键修饰在金电极表面；同时，在3’-末端修饰了亚甲基蓝MB，由于发夹结构的特性，3’-端的MB靠近电极表面，因此能检测得到较大的MB信号。在实验过程中，Siglec-5适体首先与连接在金电极表面的DNA发夹结构相结合，发夹结构被打开，MB远离电极表面，此时得到的MB信号减弱；然而当检测体系中存在Siglec-5时，由于亲和力的不同，Siglec-5适体与Siglec-5相结合，修饰在电极表面的DNA重新形成发夹结构，由此拉进了MB与电极的距离，MB信号由弱变强。所以，通过MB信号的变化，利用简单的电化学工作站，我们实现了对Siglec-5的高效、灵敏且特异的检测。
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公开(公告)号：CN106011235B
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201610324390.7
申请日：2016-05-16
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明属于生物蛋白质分子分析技术领域，具体涉及一种基于DNA分子级联信号放大的膜蛋白分析方法。本发明所述膜蛋白分析方法由合成的分子探针特异识别并共价连接到膜蛋白上，由此在膜蛋白上引入DNA扩增引物，加入扩增成分后，利用DNA分子的等温扩增反应，原位扩增出长单链DNA产物，随后加入荧光分子信标，最终通过对荧光的观察和检测实现膜蛋白在质膜表面的原位分析。本发明操作快速、简单、灵敏，避免了传统膜蛋白分析中分离和纯化的繁琐步骤，无需复杂仪器，操作者无需特别训练即可完成。
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公开(公告)号：CN105911289A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610225995.0
申请日：2016-04-13
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明属于生物电化学技术领域，具体涉及一种基于动态三明治结构的电化学传感器及其制备和应用。本发明所述电化学生物传感器，由电极、信号链和反应体系组成，电极采用金电极，信号链为一段单链DNA，DNA链的5’端修饰有巯基，DNA链的3’端修饰有亚甲基蓝，通过巯基与金电极表面自组装形成金?巯键立于金电极表面，反应体系中含有DNAzyme与必须的反应缓冲体系，DNAzyme可以与信号链互补配对并将其切割成两段DNA短链，DNAzyme上标记有靶蛋白识别元件，可用于定量检测蛋白质或蛋白质间相互作用，本发明操作简单，操作者无需特别训练，适合于偏远地区及资源贫乏地区使用。
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公开(公告)号：CN105067803A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510430364.8
申请日：2015-07-21
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/53
CPC classification number: G01N33/53
Abstract: 本发明属于免疫分析和诊断技术领域，具体涉及一种可视化多色检测抗原-抗体反应试剂盒及使用方法。本发明所述试剂盒由标记了甲基红修饰石墨烯的CEA抗体，标记了酚酞修饰石墨烯的NSE抗体，标记了百里酚酞修饰石墨烯的Cyfra21-1抗体和包被有CEA、NSE和Cyfra21-1单抗混合物的96孔板，pH值为12.0碱水，PBST缓冲液组成。本发明所述试剂盒可同时多色检测CEA，NSE和Cyfra21-1。本发明所述试剂盒操作简单，效率高，成本低，便于在资源匮乏和落后地区使用。
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