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公开(公告)号：CN112557659B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201910914390.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/68 , G01N21/78 , G01N21/31 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种可以定量检测粘蛋白1的无酶多重信号放大生物传感器的构建方法和应用。粘蛋白1(MUC1)的定量分析对于癌症预防和早期诊断具有重要作用。本发明基于链置换反应(SDR)和DNA酶循环扩增，构建了一种检测MUC1的高灵敏信号放大策略。MUC1和适体探针(AP)结合启动链置换反应，释放MUC1/AP复合物用于再循环并在双链产物的两端形成DNA酶。该DNA酶可循环切割底物信号探针(SP)，同时释放G‑四链体序列和新的活性DNA酶序列。这种SDR诱导的多重信号放大体系可产生大量G‑四链体序列，在孵育氯化血红素后可产生显着增强的比色信号以提高灵敏度。该方法可有效区分MUC1与其他干扰蛋白，在临床诊断方面具有巨大潜力。
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公开(公告)号：CN112557659A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910914390.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/68 , G01N21/78 , G01N21/31 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种可以定量检测粘蛋白1的无酶多重信号放大生物传感器的构建方法和应用。粘蛋白1(MUC1)的定量分析对于癌症预防和早期诊断具有重要作用。本发明基于链置换反应(SDR)和DNA酶循环扩增，构建了一种检测MUC1的高灵敏信号放大策略。MUC1和适体探针(AP)结合启动链置换反应，释放MUC1/AP复合物用于再循环并在双链产物的两端形成DNA酶。该DNA酶可循环切割底物信号探针(SP)，同时释放G‑四链体序列和新的活性DNA酶序列。这种SDR诱导的多重信号放大体系可产生大量G‑四链体序列，在孵育氯化血红素后可产生显着增强的比色信号以提高灵敏度。该方法可有效区分MUC1与其他干扰蛋白，在临床诊断方面具有巨大潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111443049B
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN201910046219.8
申请日：2019-01-17
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及了一种锆基金属‑有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒的比色阵列传感器的制备方法及应用。通过设计了6种不同的单链DNA序列修饰在金纳米颗粒表面，形成独特的传感器识别元件。新型材料锆基金属有机框架通过不同的分子间作用力，可以结合并沉淀单链DNA序列修饰在金纳米颗粒，在某些蛋白质或精液样本的加入后，可以加速或减缓他们的结合力，影响其聚集行为，从而产生可检测的信号。因此，我们可以认为这些识别元件与不同的靶标结合具有不同的相互作用，我们可以通过组合分析每个识别元件的比色响应，可以明显的检测不同的靶标。本发明可以简单高效地用于多种蛋白质及男性精液的比色阵列分析，为男性不育症的分析提供检测依据。
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公开(公告)号：CN112557473A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201910914389.3
申请日：2019-09-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/327 , G01N27/30
Abstract: 本发明涉及了一种基于锆金属‑有机框架的电化学传感器的制备方法及其应用恶性胶质瘤是脑内最致命的肿瘤之一，由于致癌原因的复杂性以及血脑屏障的阻碍，早期诊断在技术上仍具有挑战性。恶性胶质瘤分泌的特异性外泌体可以穿过血脑屏障并在体液中循环，具有无创性早期诊断的潜力。因此，我们提出了一种基于锆金属有机骨架(Zr‑MOF)的新型无标记电化学生物传感器。在该方法中，设计的多肽链能够特异性地捕获恶性胶质瘤外泌体中高表达的人表皮生长因子受体(EGFR)和EGFR变异株(v)III突变株(EGFRvIII)。同时，以亚甲基蓝(MB)包裹的Zr‑MOF(MB@Zr‑MOF)作为化学选择标记，通过与外泌体磷脂双分子层膜外的磷酸基团相互作用，产生敏感的电化学信号。通过监测Z‑MOF内的电活性分子，可以定量检测外泌体的浓度，表现出广阔的临床诊断应用价值。
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公开(公告)号：CN111443049A
公开(公告)日：2020-07-24
申请号：CN201910046219.8
申请日：2019-01-17
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及了一种锆基金属-有机框架和单链DNA修饰金纳米颗粒的比色阵列传感器的制备方法及应用。通过设计了6种不同的单链DNA序列修饰在金纳米颗粒表面，形成独特的传感器识别元件。新型材料锆基金属有机框架通过不同的分子间作用力，可以结合并沉淀单链DNA序列修饰在金纳米颗粒，在某些蛋白质或精液样本的加入后，可以加速或减缓他们的结合力，影响其聚集行为，从而产生可检测的信号。因此，我们可以认为这些识别元件与不同的靶标结合具有不同的相互作用，我们可以通过组合分析每个识别元件的比色响应，可以明显的检测不同的靶标。本发明可以简单高效地用于多种蛋白质及男性精液的比色阵列分析，为男性不育症的分析提供检测依据。
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公开(公告)号：CN112557473B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201910914389.3
申请日：2019-09-25
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/327 , G01N27/30
Abstract: 本发明涉及了一种基于锆金属‑有机框架的电化学传感器的制备方法及其应用恶性胶质瘤是脑内最致命的肿瘤之一，由于致癌原因的复杂性以及血脑屏障的阻碍，早期诊断在技术上仍具有挑战性。恶性胶质瘤分泌的特异性外泌体可以穿过血脑屏障并在体液中循环，具有无创性早期诊断的潜力。因此，我们提出了一种基于锆金属有机骨架(Zr‑MOF)的新型无标记电化学生物传感器。在该方法中，设计的多肽链能够特异性地捕获恶性胶质瘤外泌体中高表达的人表皮生长因子受体(EGFR)和EGFR变异株(v)III突变株(EGFRvIII)。同时，以亚甲基蓝(MB)包裹的Zr‑MOF(MB@Zr‑MOF)作为化学选择标记，通过与外泌体磷脂双分子层膜外的磷酸基团相互作用，产生敏感的电化学信号。通过监测Z‑MOF内的电活性分子，可以定量检测外泌体的浓度，表现出广阔的临床诊断应用价值。
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公开(公告)号：CN114181998A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202010963827.8
申请日：2020-09-14
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了分析化学领域内一种空间位阻控制信号放大且简单灵敏的外泌体检测方法。外泌体是一种新兴的癌症生物标志物，开发简单、方便和灵敏的外泌体检测技术得到了广泛的关注。我们提出利用外泌体的位阻效应阻碍双链DNA的互补配对过程，因而链霉亲和素修饰的DNA单链能够在末端脱氧核苷酸转移酶的作用下延伸出大量G四联体，并与硫黄素T结合产生强烈荧光，从而开发了一种基于空间位阻控制信号放大且简单灵敏的新型外泌体检测方法。该方法能够在一定浓度范围内实现外泌体的定量分析且检测限较低，同时在含有10％人血清的复杂环境中依然能够保持良好的检测效果，显示该方法在临床检测方面具有一定的潜力。
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