一种基于喂食灰葡萄孢菌的可食真菌线虫基因RNAi方法

    公开(公告)号:CN107630016A

    公开(公告)日:2018-01-26

    申请号:CN201710787426.X

    申请日:2017-09-04

    Abstract: 本发明公开了一种基于喂食灰葡萄孢菌的可食真菌线虫基因RNAi方法。首先通过根癌农杆菌介导将靶基因(如水稻干尖线虫Ab-far-1基因)dsRNA转入灰葡萄孢菌,构建表达该基因dsRNA的灰葡萄孢菌工程菌(即转基因灰葡萄孢菌),将食真菌线虫(如水稻干尖线虫雌虫)接种在灰葡萄孢菌工程菌上进行培养,即可实现靶基因的有效沉默。本发明为食真菌线虫(包括可取食真菌植物线虫和其他食真菌线虫)的RNAi提供了一种真菌介导的新方法,该方法操作简便、转化率高、重复性好、周期短,可做为食真菌线虫基因功能研究的有效工具。

    一种快速检测鉴定水稻潜根线虫的LAMP引物和方法

    公开(公告)号:CN107502662A

    公开(公告)日:2017-12-22

    申请号:CN201710786901.1

    申请日:2017-09-04

    CPC classification number: C12Q1/6848 C12Q1/6888 C12Q2531/119 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测鉴定水稻潜根线虫的LAMP引物和方法。所述引物包括外引物对Ho-F3和Ho-B3,以及内引物对Ho-FIP和Ho-BIP,序列分别如SEQ ID NO.1~4所示,并以该引物建立了LAMP检测方法。本发明为水稻潜根线虫的快速检测鉴定和早期诊断提供了一个新的检测方法,特异性强、准确性高、灵敏度高,且操作简便、快速高效、简便易行、成本低、判定直观,实用性强、应用性广,结果稳定性强、可信度高,而且还可以直接检测混有不同种类的线虫样品中和植物组织样品中的水稻潜根线虫,无需样品分离,对进出境口岸和调运检疫以及田间病害早期诊断和监测工作中的水稻潜根线虫快速检测鉴定具有重要的意义。

    一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN105483119A

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201511006217.4

    申请日:2015-12-25

    CPC classification number: C12Q1/6806 C12Q1/6888

    Abstract: 本发明属于分子生物学检测鉴定技术领域,具体涉及一种固定线虫单条虫DNA粗提液及其制备方法与应用。本发明通过线虫样品的洗涤、固定线虫样品的裂解以及DNA粗提液的制备等步骤,制备得到固定线虫单条虫DNA粗提液,该提取液进一步进行PCR扩增并检测,条带清晰,结果可靠,准确性、灵敏度和特异性高,操作简单,成本低,可用于线虫的分子鉴定。对于其他已固定植物寄生线虫的分子鉴定具有重要的理论依据和指导意义。

    利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法

    公开(公告)号:CN102972355B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201210518077.9

    申请日:2012-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法。本发明通过以下步骤实现:新鲜甘薯经洗净、表面消毒、削皮和切片放入培养皿后在培养箱中培养获得甘薯愈伤组织;取经消毒处理的植物寄生线虫接种到甘薯愈伤组织上;分别放在各自适宜温度的培养箱中黑暗培养繁殖;培养一段时间后,将植物寄生线虫连同甘薯愈伤组织于4~20℃保存。本发明方法可实现即简单、大量人工培养繁殖植物寄生线虫,又能长期保存植物寄生线虫资源的目的。

    利用无外源培养的空心菜离体根系单异体繁殖根结线虫的方法

    公开(公告)号:CN102487901B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201110400373.4

    申请日:2011-12-06

    Abstract: 本发明公开了一种利用无外源培养基培养的空心菜离体根系单异体繁殖根结线虫的方法,该方法包括以下步骤:(1)制备空心菜离体根系:将空心菜种子接种到1%水琼脂培养基平板上,待种子萌发的根系长到3-4cm时,切取根尖,将根尖接种到无外源离体根系培养基平板上,15~20d长出大量的离体根;(2)根结线虫的接种和培养:将根结线虫卵囊制备成卵粒悬浮液接种在步骤(1)的空心菜离体根上,培养50~90d即可得到大量单一的根结线虫。本发明方法繁殖率高、操作简单、不易污染、应用范围广、实用性强,解决了难以获得纯化的大量根结线虫的问题,且避免了盆栽实生苗接种繁殖根结线虫方法的费时、占据大量空间、受季节等自然和环境条件限制以及易被其他生物污染等不足。

    一种捕食螨捕食线虫的观察装置、使用方法、制备方法

    公开(公告)号:CN101843228A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010172038.9

    申请日:2010-05-07

    Abstract: 本发明是涉及一种捕食螨捕食线虫的观察装置、使用方法、制备方法,本发明为捕食螨捕食线虫行为的研究提供了一种简单的观察装置和可行、有效的方法,本发明观察装置包括带有透明盖(1)的器皿(3)、用于放置线虫及捕食螨的平板(2),平板(2)位于密封的器皿(3)内,将制备好的胶液热熔后倒入器皿(3)冷凝形成胶体平板,再接种线虫和捕食螨于胶体平板上,盖上透明盖(1),用封口膜密封,既可观察。

    一种香蕉穿孔线虫生理小种的分子鉴定靶点及鉴定方法与应用

    公开(公告)号:CN117737253A

    公开(公告)日:2024-03-22

    申请号:CN202311729093.7

    申请日:2023-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种香蕉穿孔线虫生理小种的分子鉴定靶点及鉴定方法与应用。本发明公开了核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的基因片段是区别香蕉穿孔线虫香蕉致病型小种和柑橘致病型小种的靶位点,柑橘致病型小种群体能扩增出核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的基因片段,而香蕉致病型小种群体不能扩增出该基因片段。因此以该基因片段为靶点,既能特异性检测鉴定香蕉穿孔线虫柑橘致病型小种,还能鉴别出柑橘致病型小种和香蕉致病型小种。基于此,本发明建立了一种利用香蕉穿孔线虫单一虫态和单个个体就能鉴别香蕉致病型小种和柑橘致病型小种的分子鉴定方法,该方法准确、灵敏、高效、简便、快速,对香蕉穿孔线虫检疫及病害防治具有重要意义。

    一种水稻尖线虫ATP合成酶及其应用

    公开(公告)号:CN112899291A

    公开(公告)日:2021-06-04

    申请号:CN202110076576.6

    申请日:2021-01-20

    Abstract: 本发明公开一种水稻尖线虫ATP合成酶及其应用,水稻尖线虫ATP合成酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;水稻尖线虫ATP合成酶基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。采用RNAi处理后,能够抑制水稻尖线虫的繁殖力,促进水稻防卫基因表达并可激活植物免疫反应,为农业生产中的线虫防治提供一条新的策略。本发明为抗线虫品种植物的培育提供了新靶标,为水稻干尖线虫的防治提供了新途径。

    一种模拟相似穿孔线虫与烟草互作模式的方法

    公开(公告)号:CN111670716A

    公开(公告)日:2020-09-18

    申请号:CN202010735913.3

    申请日:2020-07-28

    Abstract: 本发明提供了一种模拟相似穿孔线虫与烟草互作模式的方法,涉及生物学技术领域;通过在光照培养箱内,对沙培的本氏烟草(Nicotiana benthamiana)进行相似穿孔线虫的接种,利用染色观察法观察相似穿孔线虫在根系内侵染的位置,通过侵染根系产生的症状计算严重度,然后统计总线虫数与初始接种量的差异计算繁殖倍率和完成生活史情况。本发明选用本氏烟草作为寄主研究相似穿孔线虫对其的寄生性和致病性,并探究最优的线虫致病条件,为利用本氏烟草研究相似穿孔线虫与寄主互作机制提供研究基础。

    一种利用香蕉穿孔线虫伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫防治方法

    公开(公告)号:CN108018305A

    公开(公告)日:2018-05-11

    申请号:CN201711255197.3

    申请日:2017-12-01

    Abstract: 本发明公开了一种利用香蕉穿孔线虫伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫防治方法。首先提供了一种构建伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫生防工程菌的方法,是将具有杀线虫活性的生物酶的编码基因转化入香蕉穿孔线虫伴生细菌构建得到工程菌。然后利用该工程菌防治香蕉穿孔线虫,实现了通过伴生细菌介导表达杀线虫蛋白酶来防治香蕉穿孔线虫的目的。本发明获得的经遗传改造的荧光假单胞菌工程菌遗传稳定性好、对香蕉穿孔线虫的防控效果显著,商业化生产难度低;把活体菌和菌体次生代谢产物这两类生防因子有效地结合起来,充分发挥活体菌不断自我扩繁和自动扩散的特性以及代谢产物高效杀虫的活性,是一种安全、高效、稳定和可持续防治植物寄生线虫新方法和新途径。

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