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公开(公告)号：CN108018305B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201711255197.3
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用香蕉穿孔线虫伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫防治方法。首先提供了一种构建伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫生防工程菌的方法，是将具有杀线虫活性的生物酶的编码基因转化入香蕉穿孔线虫伴生细菌构建得到工程菌。然后利用该工程菌防治香蕉穿孔线虫，实现了通过伴生细菌介导表达杀线虫蛋白酶来防治香蕉穿孔线虫的目的。本发明获得的经遗传改造的荧光假单胞菌工程菌遗传稳定性好、对香蕉穿孔线虫的防控效果显著，商业化生产难度低；把活体菌和菌体次生代谢产物这两类生防因子有效地结合起来，充分发挥活体菌不断自我扩繁和自动扩散的特性以及代谢产物高效杀虫的活性，是一种安全、高效、稳定和可持续防治植物寄生线虫新方法和新途径。
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公开(公告)号：CN108018232B
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN201711257591.0
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 谢辉 , 王东伟 , 陈德强 , 丁善文 , 其他发明人请求不公开姓名
Abstract: 本发明公开了一种具有遗传改造潜力的香蕉穿孔线虫伴生细菌。该伴生细菌为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）pf36，于2017年11月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60278。本发明从香蕉穿孔线虫多个种群中分离筛选出一株优势伴生细菌，即上述荧光假单胞菌pf36，其与香蕉穿孔线虫具有非常稳定的伴生关系，为杀线虫蛋白酶基因的介导表达提供了一种遗传改良目标菌，由于该目标菌与香蕉穿孔线虫的伴生关系，被改良表达杀线虫蛋白酶基因后，可用于香蕉穿孔线虫的生物防治，而且对作物安全。本发明也为植物线虫的防治提供了一种新的思路和方法，即利用线虫伴生菌介导杀线虫蛋白酶基因实现对线虫的生物防治。
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公开(公告)号：CN108018305A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711255197.3
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用香蕉穿孔线虫伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫防治方法。首先提供了一种构建伴生细菌介导的香蕉穿孔线虫生防工程菌的方法，是将具有杀线虫活性的生物酶的编码基因转化入香蕉穿孔线虫伴生细菌构建得到工程菌。然后利用该工程菌防治香蕉穿孔线虫，实现了通过伴生细菌介导表达杀线虫蛋白酶来防治香蕉穿孔线虫的目的。本发明获得的经遗传改造的荧光假单胞菌工程菌遗传稳定性好、对香蕉穿孔线虫的防控效果显著，商业化生产难度低；把活体菌和菌体次生代谢产物这两类生防因子有效地结合起来，充分发挥活体菌不断自我扩繁和自动扩散的特性以及代谢产物高效杀虫的活性，是一种安全、高效、稳定和可持续防治植物寄生线虫新方法和新途径。
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公开(公告)号：CN108018232A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711257591.0
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Inventor： 谢辉 , 王东伟 , 陈德强 , 丁善文 , 其他发明人请求不公开姓名
Abstract: 本发明公开了一种具有遗传改造潜力的香蕉穿孔线虫伴生细菌。该伴生细菌为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）pf36，于2017年11月8日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60278。本发明从香蕉穿孔线虫多个种群中分离筛选出一株优势伴生细菌，即上述荧光假单胞菌pf36，其与香蕉穿孔线虫具有非常稳定的伴生关系，为杀线虫蛋白酶基因的介导表达提供了一种遗传改良目标菌，由于该目标菌与香蕉穿孔线虫的伴生关系，被改良表达杀线虫蛋白酶基因后，可用于香蕉穿孔线虫的生物防治，而且对作物安全。本发明也为植物线虫的防治提供了一种新的思路和方法，即利用线虫伴生菌介导杀线虫蛋白酶基因实现对线虫的生物防治。
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公开(公告)号：CN106135143B
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201610684090.X
申请日：2016-08-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜纯愈伤组织培养繁殖无菌香蕉穿孔线虫的方法。该方法是在无菌条件下，将香蕉穿孔线虫依次用过氧化氢溶液消毒和氧氟沙星溶液浸泡处理后，接种于无菌胡萝卜纯愈伤组织上，封口黑暗培养；所述无菌胡萝卜纯愈伤组织是在无菌条件下，将培育的胡萝卜纯愈伤组织切成小颗粒块，浸泡于含有氯霉素和万古霉素的溶液中消毒，再点种于植物组织培养基上，黑暗培养所得。本方法可稳定、高效、快速地培养繁殖大量无菌香蕉穿孔线虫，能够提供符合要求的充足无菌虫源，而且处理条件温和可控，对线虫生物活性和繁殖力影响小，使用操作更加安全，该方法具有很好的推广应用前景。
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公开(公告)号：CN108060150B
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN201711255250.X
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有杀线虫活性的蛋白酶PASE4及其应用。所述蛋白酶PASE4的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码基因pase4的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明筛选并克隆得到蛋白酶pase4基因，实验结果显示，其表达的蛋白酶PASE4能有效降解香蕉穿孔线虫体内的组织而致线虫死亡，具有显著的防治线虫的效果，尤其是针对香蕉穿孔线虫，在香蕉穿孔线虫病害的防治方面具有重要的意义和应用前景。
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公开(公告)号：CN108060150A
公开(公告)日：2018-05-22
申请号：CN201711255250.X
申请日：2017-12-01
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有杀线虫活性的蛋白酶PASE4及其应用。所述蛋白酶PASE4的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其编码基因pase4的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明筛选并克隆得到蛋白酶pase4基因，实验结果显示，其表达的蛋白酶PASE4能有效降解香蕉穿孔线虫体内的组织而致线虫死亡，具有显著的防治线虫的效果，尤其是针对香蕉穿孔线虫，在香蕉穿孔线虫病害的防治方面具有重要的意义和应用前景。
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公开(公告)号：CN106135143A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610684090.X
申请日：2016-08-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜纯愈伤组织培养繁殖无菌香蕉穿孔线虫的方法。该方法是在无菌条件下，将香蕉穿孔线虫依次用过氧化氢溶液消毒和氧氟沙星溶液浸泡处理后，接种于无菌胡萝卜纯愈伤组织上，封口黑暗培养；所述无菌胡萝卜纯愈伤组织是在无菌条件下，将培育的胡萝卜纯愈伤组织切成小颗粒块，浸泡于含有氯霉素和万古霉素的溶液中消毒，再点种于植物组织培养基上，黑暗培养所得。本方法可稳定、高效、快速地培养繁殖大量无菌香蕉穿孔线虫，能够提供符合要求的充足无菌虫源，而且处理条件温和可控，对线虫生物活性和繁殖力影响小，使用操作更加安全，该方法具有很好的推广应用前景。
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