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公开(公告)号：CN101705298A
公开(公告)日：2010-05-12
申请号：CN200910236731.5
申请日：2009-11-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种快速检测细菌的试剂盒，其以热启动酶和高保真酶为PCR反应体系的复合酶，酶活比为1∶1-3∶2。采用本发明可以定性的检测所有细菌。本发明独创了复合酶配方使PCR反应循环时间大大缩短，从制备样品到得到电泳图仅需一个小时，大大缩短了细菌的检测时间。本试剂盒易于操作，并且避免有机试剂等对人体有害药品的使用；而且对细菌检测的灵敏度为5.0×101cfu/mL。本发明的试剂盒成本低，速度快，普适性强，适合各种细菌的快速检测，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101580810A
公开(公告)日：2009-11-18
申请号：CN200910087595.8
申请日：2009-06-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种筛选降解黄曲霉毒素B1细菌的方法，该方法使用香豆素作为筛选培养基的唯一碳源，培养样品，最后筛选得到能降解黄曲霉毒素B1细菌。本发明筛选方法不用接触黄曲霉毒素剧毒物质，就能筛选出能降解毒素的细菌，特异性强，筛选效率高，价格低廉，准确性强，适用于大规模筛选降解黄曲霉毒素B1细菌。
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公开(公告)号：CN101457212A
公开(公告)日：2009-06-17
申请号：CN200810224726.8
申请日：2008-12-10
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/20 , A62D3/02 , A23K1/16 , C12R1/10 , A62D101/28
Abstract: 本发明公开1株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)菌株，能够同时降解真菌毒素(mycotoxins)中的黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)和赭曲霉毒素A(ochratoxin A，OTA)。首先通过香豆素为惟一碳源的培养基初筛目的菌株，再用AFB1和OTA的毒素纯品二次筛选，然后应用到加标的粮食样本中，该菌株对加标粮食中AFB1和OTA的平均降解率分别达到82.2和78.7％。该发明可以应用到食品及饲料行业，脱除粮食、饲料中的AFB1和OTA。
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公开(公告)号：CN118685385A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410780524.0
申请日：2024-06-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及酶工程技术领域，具体涉及一种酸稳定性和可溶表达量提高的羧肽酶A突变体。本发明通过计算机辅助设计，对现有牛胰腺羧肽酶A的氨基酸序列(PDB ID：1M4L)进行分子改造，获得突变体L203H。本发明制备的突变体L203H具有OTA降解活性，72h内在pH 6.0下对1μg/mL的OTA降解率为98.76％。与现有野生型羧肽酶A相比，该突变体的最适pH从8.0降到6.0，可溶表达量从5.25mg/mL提高到16.56mg/mL，有效地提高了其酸稳定性和可溶表达量，在食品/农产品以及饲料的脱毒领域中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117737043A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311766991.X
申请日：2023-12-20
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开一种催化活性和热稳定性提高的羧肽酶A突变体，属于蛋白质工程领域。本发明利用理性设计及定点突变技术，通过引入二硫键获得了羧肽酶A突变体D93C/F96C。本发明的羧肽酶A突变体在65℃下的半衰期较野生型提高了13.3min，半失活温度较野生型增加了8.5℃，同时比酶活也较野生型提升了24.32％。本发明突破了“稳定性‑活性的权衡”，实现了羧肽酶A热稳定性和催化活性的双重改善，这有利于羧肽酶A突变体在食品药品或饲料等领域的工业应用中发挥重要作用，如作为工业生产中的食品发酵剂、苦味脱除剂，还能应用于赭曲霉毒素A的脱除等。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116426531A
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202310381244.8
申请日：2023-04-11
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于裁剪和进化筛选的高亲和性副溶血性弧菌适配体，包括：(1)基于裁剪得到的高结合性能的副溶血性弧菌短适配体；(2)适配体进化筛选方法；(3)基于进化筛选得到的高亲和力、高特异性的副溶血性弧菌适配体。首先基于截断、茎‑环裁剪和逐步缩短对适配体进行裁剪并利用qPCR进行结果验证，得到结合性能更优异的副溶血性弧菌短适配体序列；为了进一步提升适配体性能，将裁剪后的短适配体序列引入文库进行创新式进化筛选，得到高亲和性和特异性的副溶血性弧菌适配体。本发明的适配体在副溶血性弧菌快速检测方面具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN116286687A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202111485806.0
申请日：2021-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，公开了一种赭曲霉毒素降解酶的分离纯化方法，包含以下步骤：生产菌株发酵培养，获得胞外上清液；胞外上清液经硫酸铵盐析获得粗酶液；疏水柱层析获得赭曲霉毒素降解活性组分；高分辨活性电泳切胶回收，获得赭曲霉毒素降解酶组分；质谱鉴定赭曲霉毒素降解酶。本发明的方法将硫酸铵盐析、疏水层析和高分辨活性电泳切胶纯化串联，减少纯化的流程和时间，简化样品处理过程。利用本发明公布的方法，鉴定获得4个具有赭曲霉毒素A和赭曲霉毒素B降解功能的酶，降解率达100％。本发明纯化的赭曲霉毒素降解活性组分，可应用于赭曲霉毒素A和赭曲霉毒素B的降解，为食品、饲料和农业等领域的赭曲霉毒素污染控制提供基础。
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公开(公告)号：CN113736765A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111028646.7
申请日：2021-09-02
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种蛋白质在胰蛋白酶抑制剂降解中的应用。所述蛋白质包括如SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。本发明发现，短小芽孢杆菌来源的功能蛋白肽酶S8和肽酶M84具备较高的胰蛋白酶抑制剂降解能力，进一步利用毕赤酵母表达系统实现了这两种对于胰蛋白酶抑制剂有降解作用的肽酶的大量表达，利用本发明提供的方法制备得到的重组酶能够高效稳定降解胰蛋白酶抑制剂，且能够应用于豆粕中胰蛋白酶抑制剂的降解。
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公开(公告)号：CN113604409A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202111088818.X
申请日：2021-09-16
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一株降解赭曲霉毒素A(ochratoxinA，OTA)和B(ochratoxinB，OTB)的短波单胞菌属ML17菌株(保藏编号CGMCCNo.22280)及其应用。本发明提供含有ML17菌株的菌剂；由ML17菌株或菌剂制备的OTA和/或OTB降解剂；ML17菌株、ML17菌剂、赭曲霉毒素降解剂在OTA和/或OTB生物降解中的应用；ML17菌株或菌剂在制备赭曲霉毒素生物降解剂中的应用。本发明ML17菌株及其代谢产物可高效、稳定降解OTA和OTB，在开发新的赭曲霉毒素生物降解菌剂和无菌制剂方面都具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN107312719B
公开(公告)日：2020-10-02
申请号：CN201610270913.4
申请日：2016-04-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/14 , A62D3/02 , C02F3/34 , C12R1/685 , A62D101/28 , C02F101/34
Abstract: 本发明提供黑曲霉菌株W35及其在降解赭曲霉毒素A中的应用。本发明首次发现了能够降解赭曲霉毒素A的黑曲霉菌株W35，其保藏编号为CGMCC No.12104，利用该菌的生物代谢、酶系统的作用，可简单、高效、快速地降解环境及水体中的赭曲霉毒素A。该菌降解效率高、特异性强，作用专一，作用效果温和，是一种宝贵的可高效降解赭曲霉毒素A的微生物资源。
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