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公开(公告)号：CN104278048B
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201310291562.1
申请日：2013-07-11
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种重组磁螺菌及其构建方法。具体为首先构建丢失了磁小体膜蛋白基因的趋磁细菌突变株，然后将一个磁小体膜蛋白基因与一个功能性蛋白基因进行基因融合，连接到pMD18‑T Simple Vector上，转化入E.coli DH5α感受态细胞，构建得到重组质粒。通过本发明方法构建得到的重组磁螺菌可用于合成表面展示有功能性蛋白的磁小体，所述磁小体可以很容易地与抗体，乃至核酸、糖类、脂类、非抗体蛋白等功能性蛋白相连，形成具有特定功能的磁性复合体，该复合体既能够用于磁性分离，还可以组装成特定结构的磁性材料或构件。
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公开(公告)号：CN103275915B
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201310221457.0
申请日：2013-06-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌突变株，应用于聚羟基烷酸生产。所述重组突变株为大肠杆菌Escherichia coli SM(pDP)，为重组质粒pDP导入宿主突变株所得。所述重组突变株为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2013年4月28日，保藏编号为CGMCC NO.7530。本发明重组突变株最显著的特征是生长迅速，适合在合成培养基中生长，成本低，发酵过程稳定，聚羟基烷酸产量高。
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公开(公告)号：CN101434922A
公开(公告)日：2009-05-20
申请号：CN200710177453.1
申请日：2007-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/20
Abstract: 本发明提供了一种培养磁细菌生产磁小体的最适溶氧控制方法，该方法在保证细胞生长不受营养限制的前提下，以细胞生长速度变慢作为溶氧达到并低于细胞生长临界溶氧的信号，通过控制转速和/或通气流速使溶氧始终处于细胞生长临界溶氧，即同时适合细胞生长和磁小体合成的最适溶氧水平。实验证明，采用本发明方法培养磁细菌生产磁小体，无论是最终细胞培养水平和磁小体产量还是细胞生长速度和磁小体生产速率都是目前报道的最高水平。
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公开(公告)号：CN1800364A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200510127744.0
申请日：2005-12-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一株产乳酸途径缺失的工程菌及其构建方法与应用。其目的是提供一株产乳酸途径缺失的工程菌及其构建方法与其在生产1，3－丙二醇和/或2，3－丁二醇中的应用。该工程菌是通过同源重组的方法将产1，3－丙二醇和/或2，3－丁二醇的野生型菌株中的乳酸脱氢酶基因沉默后获得的工程菌。所述产1，3－丙二醇和/或2，3－丁二醇的野生型菌株包括克雷伯氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属和沙雷氏菌属的菌株。本发明将在1，3－丙二醇和2，3－丁二醇的工业化生产中发挥重要作用，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101434921B
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN200710177452.7
申请日：2007-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/20
Abstract: 本发明提供了一种培养磁细菌生产磁小体的方法，其以空气作为供养方式，通过补料的方式使得磁细菌持续生长，当溶氧达到或低于适合生产磁小体的溶氧时，通过将搅拌转速和/或空气流速与溶氧进行级联来控制溶氧在适宜磁小体生产的溶氧范围。本发明不用配气和纯的惰性气体而以通空气作为供氧方式可以将初始溶氧从100％饱和溶氧降至0％，配合搅拌转速和通气流速的调节可控制溶氧为0～20％饱和溶氧之间的任何值。从而降低了磁小体的生产成本，并对以后研究磁细菌在不同溶氧水平下的生理生化特点提供了技术保障。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101372364A
公开(公告)日：2009-02-25
申请号：CN200810223498.2
申请日：2008-09-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种大规模纯化细菌磁小体的方法，它包括用高压均质机破碎趋磁细菌细胞、磁性层析系统分离清洗磁小体、蛋白酶k消化膜蛋白、电洗脱以及磁性搅拌系统脱盐等步骤。采用本发明所述的方法，操作连续，纯化周期从2－3个月缩短至一周内，并能有效降低超声破碎对磁小体质膜的损伤，减少磁小体表面的膜蛋白，降低所纯化磁小体的免疫原性。
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公开(公告)号：CN101195813A
公开(公告)日：2008-06-11
申请号：CN200810055661.9
申请日：2008-01-04
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效快速的单细胞微生物的破壁方法，该方法首先将细胞制备成10～30％的细胞悬液通入高压均质机中，对于原核单细胞微生物而言，设置压力为60～90MPa，对于真核单细胞微生物，则设置压力为90～150MPa，流速5～80升/小时，循环1～4次，即可对细菌或酵母实现100％的破壁。本发明方法可有效地应用于发酵工程产物提取工艺，节约时间，提高生产效率，并且无需任何化学药物辅助，尤其适用于发酵工业。
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公开(公告)号：CN100392071C
公开(公告)日：2008-06-04
申请号：CN200510127744.0
申请日：2005-12-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一株产乳酸途径缺失的工程菌及其构建方法与应用。其目的是提供一株产乳酸途径缺失的工程菌及其构建方法与其在生产1，3-丙二醇和/或2，3-丁二醇中的应用。该工程菌是通过同源重组的方法将产1，3-丙二醇和/或2，3-丁二醇的野生型菌株中的乳酸脱氢酶基因沉默后获得的工程菌。所述产1，3-丙二醇和/或2，3-丁二醇的野生型菌株包括克雷伯氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属和沙雷氏菌属的菌株。本发明将在1，3-丙二醇和2，3-丁二醇的工业化生产中发挥重要作用，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101024090B
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200710002852.4
申请日：2007-02-08
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种由细菌纳米磁小体、聚乙烯亚胺和目的DNA组成的复合物，本发明还提供了该复合物的制备方法和使用方法。本发明所述的由细菌纳米磁小体、聚乙烯亚胺和目的DNA组成的基因传递复合物，制备方法和使用方法操作简单，能显著提高基因传递的效率，并能降低聚乙烯亚胺对细胞的毒性，为聚乙烯亚胺的广泛使用提供了可靠的技术保证。
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公开(公告)号：CN101372364B
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN200810223498.2
申请日：2008-09-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种大规模纯化细菌磁小体的方法，它包括用高压均质机破碎趋磁细菌细胞、磁性层析系统分离清洗磁小体、蛋白酶k消化膜蛋白、电洗脱以及磁性搅拌系统脱盐等步骤。采用本发明所述的方法，操作连续，纯化周期从2-3个月缩短至一周内，并能有效降低超声破碎对磁小体质膜的损伤，减少磁小体表面的膜蛋白，降低所纯化磁小体的免疫原性。
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