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公开(公告)号：CN104278048B
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201310291562.1
申请日：2013-07-11
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种重组磁螺菌及其构建方法。具体为首先构建丢失了磁小体膜蛋白基因的趋磁细菌突变株，然后将一个磁小体膜蛋白基因与一个功能性蛋白基因进行基因融合，连接到pMD18‑T Simple Vector上，转化入E.coli DH5α感受态细胞，构建得到重组质粒。通过本发明方法构建得到的重组磁螺菌可用于合成表面展示有功能性蛋白的磁小体，所述磁小体可以很容易地与抗体，乃至核酸、糖类、脂类、非抗体蛋白等功能性蛋白相连，形成具有特定功能的磁性复合体，该复合体既能够用于磁性分离，还可以组装成特定结构的磁性材料或构件。
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公开(公告)号：CN103275915B
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201310221457.0
申请日：2013-06-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种产聚羟基烷酸的重组大肠杆菌突变株，应用于聚羟基烷酸生产。所述重组突变株为大肠杆菌Escherichia coli SM(pDP)，为重组质粒pDP导入宿主突变株所得。所述重组突变株为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2013年4月28日，保藏编号为CGMCC NO.7530。本发明重组突变株最显著的特征是生长迅速，适合在合成培养基中生长，成本低，发酵过程稳定，聚羟基烷酸产量高。
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公开(公告)号：CN103387966A
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201310296638.X
申请日：2013-07-16
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效异源表达白圆弧青霉脂肪酶的毕赤酵母及产酶培养基。本发明将包含自身前导肽（7个氨基酸）的白圆弧青霉脂肪酶在巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）基因工程菌中异源表达，增加了外源蛋白脂肪酶的活性，改善了外源蛋白脂肪酶的部分酶学性质。本发明提供的产酶培养基通过优化BMMY培养基中YNB组分，降低培养基成本达70%。本发明为该酶的工业化应用，特别是在以雨生红球藻虾青素酯为底物，催化该底物水解产生虾青素单体中提供了可靠的实验依据。
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公开(公告)号：CN101705274B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN200910241354.4
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高法夫酵母虾青素含量的法夫酵母培养方法。该方法包括法夫酵母野生菌株JCM9042菌种固体种子制备、一级种子培养、二级种子培养与发酵培养以及发酵液的虾青素含量测定。本发明的培养方法使用麦角甾醇合成抑制剂，可明显地促进法夫酵母中虾青素的积累，与不使用麦角甾醇合成抑制剂相比，本发明的培养方法能够提高虾青素的含量高达3-8倍以上。本发明的方法简单易行，麦角甾醇合成抑制剂及培养基成本低廉，有效地降低虾青素的生产成本，有利于工业化培养。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102517265A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110456336.5
申请日：2011-12-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N9/16 , C12N15/55 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N15/66 , C12N1/21 , D21C5/02 , C12P7/62 , C12R1/19
CPC classification number: Y02W30/648
Abstract: 本发明提供了一种酯酶Est_p6-，其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明从我国海洋底泥宏基因组文库中钓出新型酯酶基因，采用高效的表达方法，使其成功表达，为酯酶家族增添了新成员。该酯酶具有优良的酶学性质，可以应用于酶法催化脂解、酯化和转酯化相关的工业生产中，将有望成为补充和取代部分化学合成产品的新生产工艺的备选者。该酶的生产，将会在酶法水解制备天然香精、废纸浆脱墨再生等工艺中显示其重要的经济和社会价值。
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公开(公告)号：CN101875925B
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN200910238395.8
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一个新的单双酰脂肪酶Mdl(9)以及编码该酶的基因mdl(9)，该酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。实验表明，单双酰脂肪酶Mdl(9)具有较高的水解单酰甘油酯和二酰甘油酯的活力。本发明还提供其在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达载体和高效表达该酶的方法。采用该方法，表达的单双酰脂肪酶能有效地分泌到胞外，不仅降低了分离纯化成本，而且表达效率提高。在摇瓶培养的条件下，以甲醇为诱导物进行诱导培养时，胞外分泌量可达660mg/L，以单硬脂酸甘油酯为底物，酶活达到2700U/ml。本发明为该酶的工业化应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101875925A
公开(公告)日：2010-11-03
申请号：CN200910238395.8
申请日：2009-12-07
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一个新的单双酰脂肪酶Mdl(9)以及编码该酶的基因mdl(9)，该酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。实验表明，单双酰脂肪酶Mdl(9)具有较高的水解单酰甘油酯和二酰甘油酯的活力。本发明还提供其在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达载体和高效表达该酶的方法。采用该方法，表达的单双酰脂肪酶能有效地分泌到胞外，不仅降低了分离纯化成本，而且表达效率提高。在摇瓶培养的条件下，以甲醇为诱导物进行诱导培养时，胞外分泌量可达660mg/L，以单硬脂酸甘油酯为底物，酶活达到2700U/ml。本发明为该酶的工业化应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101434922A
公开(公告)日：2009-05-20
申请号：CN200710177453.1
申请日：2007-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/20
Abstract: 本发明提供了一种培养磁细菌生产磁小体的最适溶氧控制方法，该方法在保证细胞生长不受营养限制的前提下，以细胞生长速度变慢作为溶氧达到并低于细胞生长临界溶氧的信号，通过控制转速和/或通气流速使溶氧始终处于细胞生长临界溶氧，即同时适合细胞生长和磁小体合成的最适溶氧水平。实验证明，采用本发明方法培养磁细菌生产磁小体，无论是最终细胞培养水平和磁小体产量还是细胞生长速度和磁小体生产速率都是目前报道的最高水平。
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公开(公告)号：CN1236058C
公开(公告)日：2006-01-11
申请号：CN03153488.0
申请日：2003-08-14
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种趋磁细菌纳米磁性颗粒的提取和纯化方法，包括以下步骤，首先，超声波破碎趋磁细菌细胞壁；然后，蔗糖密度梯度离心，分离磁性颗粒与细胞碎片，用超声波打散与缓冲液洗涤磁性颗粒，以除去磁性颗粒表面所吸附的物质；最后，倾去上清液，加入缓冲液，保存。本发明采取了超声波破碎细胞、蔗糖密度梯度离心、超声波打散并配合缓冲液洗涤和磁铁吸附回收、电子显微镜观察检测等手段，提纯了趋磁细菌磁性颗粒；纯化后的磁性颗粒，经电子显微镜观察(放大8万倍)发现分散均匀，且外膜完整，经冷冻干燥处理后，最终获得磁性颗粒的回收率可达30-40mg/L培养液。
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