公开(公告)号：CN108164472A

公开(公告)日：2018-06-15

申请号：CN201711308739.9

申请日：2017-12-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  邹婷婷 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  肖治理 ,  罗林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D249/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/577 ,  G01N33/68

CPC classification number: C07D249/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  C07K19/00 ,  G01N33/577 ,  G01N33/6848 ,  G01N2333/47

Abstract: 本发明公开了一种基于4H‑三唑环结构限定性N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原、人工抗原、抗体及应用。一种N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原，结构如式I所示：其中R为羧基和对羧基苯基。并以此制备了N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉人工抗原和抗体，对N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的检测效率高、操作简便，可用于N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的酶联免疫快速检测；且本发明的抗原抗体合成过程简单、成本较低，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN108059622A

公开(公告)日：2018-05-22

申请号：CN201711308738.4

申请日：2017-12-11

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  邹婷婷 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  肖治理 ,  罗林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D251/18 ,  C07K14/77 ,  C07K14/765 ,  C07K16/44 ,  G01N33/577 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明一种基于三嗪环结构限定性N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原、人工抗原、抗体及应用。所述N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉半抗原的结构如式I所示：其中R为‑H和‑CH3。并以此制备了N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉人工抗原和抗体，对N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的检测效率高、操作简便，可用于N‑(2‑胍基‑乙亚氨基)‑吗啉的酶联免疫快速检测；且本发明的抗原抗体合成过程简单、成本较低，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN104865248B

公开(公告)日：2018-05-01

申请号：CN201510280178.0

申请日：2015-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  杨金易 ,  崔孟姣 ,  谢曦 ,  何永盛 ,  卢临萍 ,  孙远明 ,  徐振林

IPC: G01N21/78

Abstract: 本发明公开了一种用于检测农药残留的重组家蚕乙酰胆碱酯酶的制备方法。本发明将家蚕乙酰胆碱酯酶基因与锚定蛋白基因AGα1相连插入到酵母表达载体pPIC9K中构建成表面展示载体并转化毕赤酵母GS115，筛选阳性重组子，并利用甲醇对阳性重组子进行诱导表达，表达结束后离心去除上清液，将菌体冷冻干燥即得重组家蚕乙酰胆碱酯酶。制备得到的重组酶稳定性好、操作简单、检出限低、灵敏度高、尤其成本低廉，可在家庭、市场、蔬菜生产基地等进行现场检测，非常适合大量样品的筛查，具有重要的实际应用推广意义。

公开(公告)号：CN104897748B

公开(公告)日：2017-12-26

申请号：CN201510287384.4

申请日：2015-05-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  孙远明 ,  董秀秀 ,  梁祖培 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  王弘 ,  雷红涛

IPC: G01N27/26 ,  G01N27/30 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明属于生物传感器技术领域，具体公开了一种检测组胺的可抛式一步电沉积免疫生物传感器及其制备方法。本发明免疫生物传感器采用表面有普鲁士蓝‑壳聚糖‑纳米金复合膜的电极，所述电极上固定有组胺包被原；其中，复合膜中纳米金与普鲁士蓝的摩尔浓度比为1:2000~1:20，壳聚糖的质量体积含量为0.01~0.05%。并且，采用一步沉积电极的方式使电极表面获得复合膜，沉积步骤比传统高分子聚合物修饰电极制备步骤简便，且更容易暴露抗原结合位点。本发明免疫生物传感器将竞争免疫反应和生物传感器相结合，并可根据需要得到组胺检测工作曲线等一系列性能表征，具有操作简单、灵敏度高、快速方便等优势，可用于样品中组胺的现场快速检测。

公开(公告)号：CN107167585A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710224738.X

申请日：2017-04-07

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  张雅琼 ,  孙远明 ,  沈兴 ,  陆宁 ,  徐振林 ,  沈玉栋 ,  杨金易

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/559 ,  G01N33/543

CPC classification number: G01N33/531 ,  G01N33/54346 ,  G01N33/559

Abstract: 本发明公开了一种新型小分子结构及其在检测蓝绿藻肝毒素方面的应用。所述新型小分子结构的结构式如式（I）所示：本发明首先获得了一种特殊的新型小分子结构作为免疫原，将该小分子及微囊藻毒素MC‑LR分别与载体蛋白偶联制得人工抗原，利用将该小分子人工抗原制备多克隆抗体，制备抗体标记的纳米金颗粒，将MC‑LR人工抗原包被于硝酸纤维膜上作为检测带，羊抗兔二抗作为控制带，依据免疫竞争法原理建立得快速检测蓝绿藻肝毒素的广谱性免疫层析试纸条。该免疫层析试纸条灵敏性度高、广谱性强，可半定量检测蓝绿藻肝毒素，适用于多种微囊藻毒素类似物和节球藻毒素，且具有快速、直观、易于操作等优势。

公开(公告)号：CN107056946A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201611236387.6

申请日：2016-12-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  陈子键 ,  雷红涛 ,  刘辉 ,  王弘 ,  孙远明 ,  杨金易

IPC: C07K16/44 ,  G01N33/577

CPC classification number: C07K16/44 ,  C07K2317/51 ,  C07K2317/515 ,  C07K2317/55 ,  C07K2317/92 ,  G01N33/577 ,  G01N2430/10

Abstract: 本发明公开了一种抗二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药的Fab抗体及制备方法和应用。Fab抗体包括轻链和重链，所述重链具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，或具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列；所述轻链具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，或具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经缺失、取代或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列。本发明提供的Fab抗体与抗原的结合可被游离的半抗原竞争性抑制，IC50为135.7ng/mL，具有很好的抗原结合活性。通过标准曲线可知线性检测范围分别在7.2～861.7 ng/mL之间。

公开(公告)号：CN105044333B

公开(公告)日：2017-07-11

申请号：CN201510351080.X

申请日：2015-06-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  陈佳虹 ,  卢蓝蓝 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  沈玉栋 ,  王弘 ,  肖治理

IPC: G01N33/558

Abstract: 本发明公开了一种吡哌酸的ELISA检测方法及其应用。该ELISA检测方法是利用吡哌酸抗体和包被原组合的ELISA检测体系建立的；所述包被原为吡哌酸包被原或喹诺酮类包被原；具体是采用异源模式，以吡哌酸抗体和包被原洛美沙星‑OVA为最优组合建立的一种更加灵敏有效的吡哌酸的ELISA检测方法。本发明的ELISA检测方法高效、方便、高灵敏和高特异性，检测的线性范围（IC20～IC80）为0.9～38.5 ng/mL，半抑制浓度(IC50)为5.99 ng/mL，最低检测限为0.31 ng/mL；而且前处理方法操作简单，能够满足残留检测的要求，可应用于快速检测食品中非法添加的吡哌酸，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN106565737A

公开(公告)日：2017-04-19

申请号：CN201610875386.X

申请日：2016-10-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  张雅琼 ,  沈兴 ,  陆宁 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  杨金易 ,  肖治理

IPC: C07D493/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/795 ,  C07K16/02 ,  C07K16/14 ,  G01N33/53

CPC classification number: C07D493/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/795 ,  C07K16/02 ,  C07K16/14 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素B1半抗原、人工抗原及其高灵敏度、高特异性卵黄抗体的制备方法。本发明首先将黄曲霉毒素B1分子上双呋喃环中的碳碳双键进行加成反应引入游离羧基形成黄曲霉毒素B1半抗原，其结构式如式（I）所示：式（Ⅰ）；再将该半抗原与载体蛋白偶联得到黄曲霉毒素B1人工抗原；由该人工抗原乳化后免疫鸡，得到黄曲霉毒素B1卵黄抗体。所述抗体对黄曲霉毒素B1的半抑制浓度（IC50）为4.23ng/mL，定量检测范围为0.29~61.83ng/mL，检测限为0.06ng/mL，且该抗体对AFB2、AFG1和AFG2的交叉反应率均低于1%。本发明的抗体同时具备高灵敏、特异性的特点，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN106442478A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610315788.4

申请日：2016-05-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  王弘 ,  朱帆 ,  肖治理 ,  杨金易 ,  孙远明 ,  徐振林 ,  雷红涛

IPC: G01N21/76 ,  G01N33/02 ,  G01N33/14 ,  G01N33/569

CPC classification number: G01N21/76 ,  G01N33/02 ,  G01N33/143 ,  G01N33/146 ,  G01N33/56961

Abstract: 本发明公开了一种异细交链孢菌酮酸的化学发光酶联免疫试剂盒及其使用方法。该试剂盒包括包被有异细交链孢菌酮酸抗原的化学发光酶标板、异细交链孢菌酮酸抗体、酶标抗抗体、异细交链孢菌酮酸标准品溶液、化学发光液、浓缩洗涤液。本发明还公开了利用所述试剂盒检测异细交链孢菌酮酸残留的方法。本发明提供的检测异细交链孢菌酮酸的试剂盒采用间接竞争化学发光酶联免疫吸附分析技术，最大检测范围为0.2～3.78ng/mL，灵敏度为0.78ng/mL，检出限为0.032ng/mL，回收率为82.4～105.8%，检出限低、灵敏度高、稳定性好，成本低，非常适合大量样品的筛查，具有重要的实际应用推广意义。

公开(公告)号：CN103288741B

公开(公告)日：2015-09-30

申请号：CN201310197597.9

申请日：2013-05-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  孙远明 ,  罗林 ,  沈玉栋 ,  肖治理 ,  杨金易 ,  雷红涛 ,  王弘

IPC: C07D233/64 ,  C07K14/77 ,  C07K14/765 ,  C07K1/107 ,  C07K16/44 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种组胺半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用。所述组胺半抗原具有式（Ⅰ）或式（Ⅱ）所示分子结构：；其中，n=0～6，Y=COOH、NO2。所述组胺人工抗原具有式（Ⅲ）或式（Ⅳ）所示分子结构：；其中，n=0～6。采用本发明抗原得到的抗血清的效价可达到1×107，最低检测限为0.13ng/mL，半抑制浓度为7.6ng/mL，产生的抗体的特异性高、灵敏度高、准确度高，本发明中组胺衍生物制备方法简单高效，重复性高，为建立快速、准确、灵敏的组胺免疫检测方法奠定了基础。