公开(公告)号：CN104865248B

公开(公告)日：2018-05-01

申请号：CN201510280178.0

申请日：2015-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  杨金易 ,  崔孟姣 ,  谢曦 ,  何永盛 ,  卢临萍 ,  孙远明 ,  徐振林

IPC: G01N21/78

Abstract: 本发明公开了一种用于检测农药残留的重组家蚕乙酰胆碱酯酶的制备方法。本发明将家蚕乙酰胆碱酯酶基因与锚定蛋白基因AGα1相连插入到酵母表达载体pPIC9K中构建成表面展示载体并转化毕赤酵母GS115，筛选阳性重组子，并利用甲醇对阳性重组子进行诱导表达，表达结束后离心去除上清液，将菌体冷冻干燥即得重组家蚕乙酰胆碱酯酶。制备得到的重组酶稳定性好、操作简单、检出限低、灵敏度高、尤其成本低廉，可在家庭、市场、蔬菜生产基地等进行现场检测，非常适合大量样品的筛查，具有重要的实际应用推广意义。

公开(公告)号：CN104865248A

公开(公告)日：2015-08-26

申请号：CN201510280178.0

申请日：2015-05-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  杨金易 ,  崔孟姣 ,  谢曦 ,  何永盛 ,  卢临萍 ,  孙远明 ,  徐振林

IPC: G01N21/78

Abstract: 本发明公开了一种用于检测农药残留的重组家蚕乙酰胆碱酯酶的制备方法。本发明将家蚕乙酰胆碱酯酶基因与锚定蛋白基因AGα1相连插入到酵母表达载体pPIC9K中构建成表面展示载体并转化毕赤酵母GS115，筛选阳性重组子，并利用甲醇对阳性重组子进行诱导表达，表达结束后离心去除上清液，将菌体冷冻干燥即得重组家蚕乙酰胆碱酯酶。制备得到的重组酶稳定性好、操作简单、检出限低、灵敏度高、尤其成本低廉，可在家庭、市场、蔬菜生产基地等进行现场检测，非常适合大量样品的筛查，具有重要的实际应用推广意义。