一种基于基因编辑技术的监测miRNA表达的报告基因探针及其构建方法

    公开(公告)号:CN110628815B

    公开(公告)日:2022-12-23

    申请号:CN201910797013.9

    申请日:2019-11-21

    Abstract: 本发明公开了一种基于基因编辑技术的监测miRNA表达的报告基因探针及构建方法。所述的探针包括pcDNA3.1载体、基因片段A和B,载体pcDNA‑CRE,载体pcDNA‑FLP。所述的基因片段A、B按照A‑B顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组,所述的片段A由Loxp/FRT、Fluc、和5xmiR targets序列组成,所述的片段B为Loxp/FRT。本发明的报告基因分子影像探针基于Loxp/FRT‑CRE/FLP基因编辑技术结合报告基因分子显像技术,可以实时监测活体miRNA的表达变化,为活体miRNA表达的动态变化提供了一种实时、无创的监测工具。

    一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针及制备方法

    公开(公告)号:CN110747204A

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201911193339.7

    申请日:2019-11-28

    Abstract: 本发明公开了一种监测pre-mRNA剪接效率的双报告基因探针及制备方法,所述的探针包括载体pcDNA3.1、基因片段A、B、C,所述的基因片段A、B、C按照A-B-C顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组,所述的片段A为Fluc,所述的片段B由exon 1、Intron、exon 2组成,所述的片段C为Rluc。所述的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。通过对本发明的报告基因分子影像探两种荧光素酶产生的信号比值Fluc/Rluc进行分析,实时、无创地分析在体pre-mRNA的剪接效率,为调控pre-mRNA剪接的药物研究提供了有效的筛选工具。

    一种基于基因编辑技术的监测miRNA表达的报告基因探针及其构建方法

    公开(公告)号:CN110628815A

    公开(公告)日:2019-12-31

    申请号:CN201910797013.9

    申请日:2019-11-21

    Abstract: 本发明公开了一种基于基因编辑技术的监测miRNA表达的报告基因探针及构建方法。所述的探针包括pcDNA3.1载体、基因片段A和B,载体pcDNA-CRE,载体pcDNA-FLP。所述的基因片段A、B按照A-B顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组,所述的片段A由Loxp/FRT、Fluc、和5xmiR targets序列组成,所述的片段B为Loxp/FRT。本发明的报告基因分子影像探针基于Loxp/FRT-CRE/FLP基因编辑技术结合报告基因分子显像技术,可以实时监测活体miRNA的表达变化,为活体miRNA表达的动态变化提供了一种实时、无创的监测工具。

    一种冻存液及其用途
    15.
    发明授权

    公开(公告)号:CN105850983B

    公开(公告)日:2019-01-22

    申请号:CN201610305756.6

    申请日:2016-05-10

    Abstract: 本发明公开了一种冻存液及其用途,本发明的冻存液含有体积百分含量为5%‑25%的甘油,2%‑10%的二甲基亚砜,45%‑65%的S Buffer,余量为去离子水。本发明的冻存液在甘油和S Buffer体系中首次加入一定浓度配比的二甲基亚砜,在保存秀丽隐杆线虫时,线虫的存活率和反复冻融后的复苏率显著提高,极高的复苏率有效地保证了后续实验研究的进行,同时能够反复冻存使用的线虫在一定程度上降低了线虫培养保存的成本,极大地提高了冻存线虫的利用率;本发明的冻存液保存秀丽隐杆线虫,方法简单,效果显著,无需液氮,节约了成本。

    一种监测miRNA动态变化的报告基因及其制备方法

    公开(公告)号:CN110144395B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201910372849.4

    申请日:2019-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种监测miRNA动态变化的报告基因及其制备方法,所述的报告基因包括PUF基因、质粒psiCHECK‑2‑HM471G、Fluc基因、与目的miRNA完全互补配对的四段串联重复序列和与PUF完全互补配对的六段NRE串联重复序列,所述的与目的miRNA完全互补配对的四段串联重复序列位于PUF蛋白的终止密码子TGA下游,所述的与PUF完全互补配对的六段NRE串联重复序列位于Fluc基因起始密码子ATG上游。该报告基因以对神经分化过程中或肌肉、心肌分化过程中产生的特异性miRNA进行实时、定量的监控。

    一种组成型剪接报告基因影像探针及其制备方法

    公开(公告)号:CN110317806A

    公开(公告)日:2019-10-11

    申请号:CN201910372877.6

    申请日:2019-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种组成型剪接报告基因影像探针及其制备方法,所述的探针包括载体pcDNA3.1、基因片段A、B、C,所述的基因片段A、B、C按照A-B-C顺序与线性化的pcDNA3.1载体重组,所述的片段A由Exon1和Intron1组成,所述的片段B为Rluc,所述的片段C由Exon2和Intron2组成。所述的探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明的报告基因分子影像探针可以模拟活体pre-mRNA加工为成熟mRNA的过程,为模拟活体pre-mRNA加工过程的动态变化提供了一种实时、无创的监测工具,同时为作用于剪接体的药物研究提供了有效的筛选工具。

    一种监测miRNA动态变化的报告基因及其制备方法

    公开(公告)号:CN110144395A

    公开(公告)日:2019-08-20

    申请号:CN201910372849.4

    申请日:2019-05-06

    Abstract: 本发明公开了一种监测miRNA动态变化的报告基因及其制备方法,所述的报告基因包括PUF基因、质粒psiCHECK-2-HM471G、Fluc基因、与目的miRNA完全互补配对的四段串联重复序列和与PUF完全互补配对的六段NRE串联重复序列,所述的与目的miRNA完全互补配对的四段串联重复序列位于PUF蛋白的终止密码子TGA下游,所述的与PUF完全互补配对的六段NRE串联重复序列位于Fluc基因起始密码子ATG上游。该报告基因以对神经分化过程中或肌肉、心肌分化过程中产生的特异性miRNA进行实时、定量的监控。

    一种新型棉酚衍生物的合成方法

    公开(公告)号:CN103288619A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310039896.X

    申请日:2013-02-01

    Abstract: 本发明公开了一种新型棉酚衍生物的合成方法,首先将浓的强碱溶液加入到醋酸棉酚中,在一定的温度下反应,脱醛基得到产物Apogossypol;将保护剂按一定的比例加入到Apogossypol中,适当的温度下反应,得到产物Hexa-acetylapogossypol;在适当的温度下,将Hexa-acetylapogossypol进行去异丙基,反应得到产物Hexa-acetyldesapogossypol;加入氧化剂,在适当的温度下,将Hexa-acetyldesapogossypol进行氧化,反应得到产物Tetra-acetyldesapogossypolone;加入脱保护剂,将Tetra-acetyldesapogossypolone进行脱保护,即得到新型棉酚衍生物Desapogossypolone,分子量为406,颜色为棕红色;本发明通过五步化学反应改变了天然药物醋酸棉酚的结构,与天然醋酸棉酚相比较,所得新型棉酚衍生物Desapogossypolone具有分子量小、良好稳定性、抗肿瘤活性高等特点。

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