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公开(公告)号：CN102426126B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110251106.5
申请日：2011-08-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。
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公开(公告)号：CN102296090B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110249842.7
申请日：2011-08-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种基于体细胞核移植构建的牛体细胞克隆胚的处理方法，将待移植的牛体细胞注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，在电融合之后1h，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚用1μM的Oxamflatin处理牛体细胞克隆胚胎12h，可以显著提高牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎。
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公开(公告)号：CN119157664A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411139275.3
申请日：2024-08-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61D19/04
Abstract: 本申请涉及胚胎移植领域，尤其涉及一种胚胎移植管。包括管体，在所述管体的远端设置有针头部，所述针头部与管体可拆卸连接，所述针头部为能够进行穿刺的尖端；在所述管体的近端位置设置有注射部，所述注射部与管体可拆卸连接，在所述管体内部设置有棉芯部，所述棉芯部能够将管体内部的液体推顶到针头部；所述注射部用于推动棉芯部运动。增加了克隆胚胎附着的效率以及出生率。这样就提高了动物胚胎移植的效率，对于动物的保存以及优质资源的保护起到了很重要的作用。
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公开(公告)号：CN110042123B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN201910307633.X
申请日：2019-04-17
Abstract: 本发明公开了一种提高牛体细胞克隆效率的方法，通过诱导表达zfp57基因使牛克隆胚胎发育过程中的印迹基因甲基化恢复正常水平，从而提高牛体细胞克隆效率。本发明提供的一种提高牛体细胞克隆效率的方法，利用zfp57纠正牛克隆胚胎上异常的印迹基因低甲基化，使其甲基化水平到达和体外受精胚胎接近的水平，从而提高牛克隆胚胎的胚胎质量，促进牛克隆胚胎的发育；为阐明体细胞克隆胚胎重编程过程中甲基化印迹异常的机理以及体细胞克隆效率低下的原因提供理论依据。
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公开(公告)号：CN107988257A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711322629.8
申请日：2017-12-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877 , C12N13/00
CPC classification number: C12N15/85 , C12N9/0004 , C12N13/00 , C12N15/8772 , C12N2830/006
Abstract: 本发明公开了一种基于供体细胞DNA甲基化水平的修饰提高山羊克隆效率的载体、细胞和方法。本发明提供的载体包括阻遏蛋白TetR表达载体和含有操纵基因TetO的双向表达载体，在融合前将两者共转染到供体细胞中。筛选阳性转染的细胞，药物诱导表达山羊TET3，将TET3诱导表达的阳性细胞作为最终供体细胞，再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，挑选成功融合的山羊体细胞克隆胚培养。本发明可以有效的降低供体细胞的甲基化水平，纠正克隆胚胎中的异常高甲基化现象，从而显著提高后期山羊体细胞克隆胚胎的发育率和质量，可以高效地体外生产山羊体细胞克隆胚胎，胚胎移植后的克隆山羊的出生率也显著提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102426126A
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201110251106.5
申请日：2011-08-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。
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公开(公告)号：CN102296090A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110249842.7
申请日：2011-08-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种基于体细胞核移植构建的牛体细胞克隆胚的处理方法，将待移植的牛体细胞注入到去核后的卵母细胞并进行电融合，在电融合之后1h，挑选成功融合的牛体细胞克隆胚用1μM的Oxamflatin处理牛体细胞克隆胚胎12h，可以显著提高牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎。
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公开(公告)号：CN119548286A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411750997.2
申请日：2024-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61D19/02
Abstract: 本发明属于畜牧人工授精技术领域，涉及一种家畜用子宫内连续输精装置，包括装置主体，其内部贯穿设置有一注射通道，注射通道的一端设置注射头，装置主体的一侧设置有装填孔，装填孔与注射通道连通，装填孔内可拆卸设置有密封盖，还包括保护机构和复位机构。通过第一保护外壳配合第二保护外壳，利用复位机构使第一保护外壳和第二保护外壳以向内转动，使第一保护外壳和第二保护外壳相对扣合形成容纳注射头的腔室，从而对注射头进行保护，在闲置和携带装置时对注射头进行防护，通过设置装填孔，在不同母畜个体之间注射时不需要重复进行精液样本补充，提高连续授精的灵活性，同时进一步降低母畜输精时的感染风险，也降低了操作难度。
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公开(公告)号：CN114196703A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111581923.7
申请日：2021-12-22
Applicant: 西北农林科技大学 , 西宁市动物疫病预防控制中心(挂西宁市畜牧兽医站牌子)
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高牦牛克隆胚胎发育率的载体、细胞和方法，属于牦牛克隆胚胎技术领域。该载体为shRNA的真核表达载体，shRNA靶向CBX3基因，靶序列如SEQ ID NO.1所示：GGTCTTGATCCAGAACGAATA。通过该载体转染牦牛体细胞，获得阳性单克隆；利用阳性单克隆作为供体，进行核移植，构建克隆胚，可纠正牦牛克隆胚胎异常重编程，显著提高牦牛克隆胚胎体外发育率，为阐明牦牛克隆胚胎重编程机理提供材料基础及理论依据。
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公开(公告)号：CN102329819B
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201110300097.4
申请日：2011-09-27
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种siRNA转染胚胎的电穿孔方法，包括以下步骤：1)对胚胎透明带进行弱化处理；2)配制含siRNA的电穿孔溶液；3)将胚胎移入配制好的含siRNA的电穿孔溶液，室温静置，然后再将胚胎连同电穿孔溶液移入电转槽中进行电穿孔。本发明包括对胚胎的透明带的弱化处理和siRNA的络合处理，然后通过将胚胎置于脉冲电场作用下，导致其通透性和膜电导瞬时增大，使在正常生理情况下细胞膜难以通透的siRNA进入细胞。统计学观察分析表明，本发明存活胚胎稳定阳性转染率超过95％，采集的总胚胎实际有效利用率超过70％，是一种安全、简便、高效的siRNA转染哺乳类动物胚胎的技术。
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