一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞

    公开(公告)号:CN104293833B

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201410528091.6

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞,对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M‑S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子,使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,通过PCR和Southern Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中,最终生产成活的转基因克隆牛。

    一种羊肺腺瘤病毒的体外稳定培养方法

    公开(公告)号:CN105420200A

    公开(公告)日:2016-03-23

    申请号:CN201610033932.5

    申请日:2016-01-19

    CPC classification number: C12N7/00 C12N2740/12021

    Abstract: 本发明公开了一种羊肺腺瘤病毒的体外稳定培养方法,该方法包括以下步骤:分离、纯化和培养患肺腺瘤的羊肺泡Ⅱ型细胞,设计并合成核苷酸序列(上游:5’-GATCCGGCCGGTGCTTCTAGGAATATTCAAGACGTAATCCTAGGAGCACCGGCATTTTTGTCGACA-3’,下游:5’-AGCTTGTCGACAAAAATGCCGGTGCTCCTAGGATTACGTCTTGAATATTCCTAGAAGCACCGGCCG-3’),构建siRNA干扰载体,将siRNA干扰载体转染肺泡Ⅱ型细胞。本发明的有益之处在于:本发明的培养方法通过siRNA技术让exJSRV在体外培养的细胞中稳定增殖。

    坡沟系统土壤侵蚀试验装置及试验方法

    公开(公告)号:CN111665343A

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN202010475877.1

    申请日:2020-05-29

    Abstract: 本发明涉及土壤侵蚀防治技术领域,提供了坡沟系统土壤侵蚀试验装置及试验方法。坡沟系统土壤侵蚀试验装置,包括试验土槽,所述试验土槽的第一侧的顶部设有第一连接板,第一连接板上设有第一输水管,试验土槽的第二侧的顶部设有第二连接板,第二连接板上设有第二输水管。试验方法,包括如下步骤:在试验土槽内装填待试土壤;向第一输水管供水,经第一出水孔流入试验土槽内,向第二输水管供水,经第二出水孔流入试验土槽内;在试验土槽下部出口端收集径流泥沙。本发明增加了沟道侵蚀的试验模拟情况,增加了对坡沟系统沟道侵蚀与两侧坡面侵蚀研究的全面性,提高了坡沟系统土壤侵蚀研究结果的准确性。

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