Kctd10基因在治疗肝脏疾病中的应用

    公开(公告)号:CN110777203A

    公开(公告)日:2020-02-11

    申请号:CN201911291871.2

    申请日:2019-12-16

    Abstract: 本发明涉及基因的应用领域及试验用的医药配制品,具体涉及肝干细胞调控基因Kctd10在小鼠肝脏中特异性敲除模型的建立、鉴定方法、并应用于治疗肝脏疾病药物筛选以及治疗肝脏疾病。利用FLP/Frt,Cre/Loxp重组酶系统首先构建了Kctd10flox/flox的小鼠模型,再将该小鼠模型与Alb-cre+转基因小鼠品系杂交,获得了Kctd10肝脏特异性基因敲除品系,并予以证实。本发明为人类肝干细胞疾病研究提供在体动物模型,为深入了解肝病发生提供有效的研究途径和方法,为特异性治疗肝脏疾病提供了药物筛选方法,也为治疗肝脏疾病奠定基础。

    一种抑制人TNFAIP1基因表达的siRNA在肝癌细胞增殖研究中的应用

    公开(公告)号:CN110016476A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201810022027.9

    申请日:2018-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种抑制人TNFAIP1基因表达的siRNA及其慢病毒载体构建并在肝癌细胞增殖研究中的应用。本发明以RNA干扰技术为基础,从GenBank获得人TNFAIP1基因的cDNA序列,设计并合成了靶向人TNFAIP1基因的一对siRNA,并成功构建了它们在哺乳动物细胞内的慢病毒表达载体。本发明所述的siRNA能高效特异性地抑制TNFAIP1基因的mRNA和蛋白水平的表达,不对其它BTB蛋白产生沉默作用。建立的肝癌TNFAIP1低表达细胞株,为深入研究肝癌及其它相关肿瘤中TNFAIP1的作用分子机制奠定基础。本发明还研究TNFAIP1与肝癌发生发展以及分裂增殖、迁移、侵袭和凋亡的关系,为揭示肝癌的发病机制以及肝癌的治疗提供了重要线索。

    Kctd10基因剔除小鼠模型、构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN102492686B

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201110411059.6

    申请日:2011-12-12

    Abstract: 本发明公开了一种与心脏、血管发育密切相关的钾离子通道蛋白Kctd10基因敲除小鼠模型及其应用。通过同源重组和胚胎干细胞移植以及Cre-LoxP系统,得到Kctd10基因剔除小鼠模型,经过研究发现Kctd10基因缺陷小鼠在早期胚胎发育过程中出现发育滞后现象,并出现血管发育障碍、心脏发育缺陷,免疫组化结果显示Kctd10基因在早期胚胎中的心脏内皮中高表达,显示Kctd10在心脏的早期发育中具有很重要的作用。

    一种筛选调控特定基因mRNA的miRNAs的方法

    公开(公告)号:CN104099322A

    公开(公告)日:2014-10-15

    申请号:CN201410327898.3

    申请日:2014-07-11

    Abstract: 本发明建立了一种基于生物素标记的筛选调控特定基因mRNA的miRNAs的方法。本发明将目的基因的3’UTR序列克隆到EGFP荧光载体下游,生物信息学分析预测EGFPmRNA的二级结构和设计互补的反义链DNA,并进行3’端生物素标记,利用生物素和链霉亲和素之间的强亲和力将与目的基因mRNA结合在一起的所有miRNA进行分离和纯化。该方法可以分离纯化出调控特定基因mRNA的所有miRNAs,并且可以应用到所有目的基因的mRNA,避免重复设计和合成生物素标记的反义链寡核苷酸链。

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