基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器及其检测方法

    公开(公告)号:CN109596592A

    公开(公告)日:2019-04-09

    申请号:CN201910091120.X

    申请日:2019-01-30

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器,包括适配体Apt、模板T、发卡探针H1、发卡探针H2、phi29、沙门氏菌、Nt.Alwl内切酶和缓冲液;基于核酸适配体与目标物的特异性识别,将Apt与T形成的桥型结构打开,利用Phi 29聚合酶的链延伸功能打开H2产生荧光,以及3’翘起部分特异性消化实现目标物的循环放大,在Nt.Alwl内切酶的协助下,产生大量能打开H1的Trigger链,而Trigger进一步循环实现荧光信号的放大,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

    一种检测谷胱甘肽的生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN110542674B

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN201910887031.6

    申请日:2019-09-19

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,基于金纳米粒子的DNA分子机器检测谷胱甘肽(GSH)的生物传感器,包括发卡探针HAP(茎部修饰二硫键)、复合探针P通过polyA修饰到纳米金的表面、P3探针、血红素、钾离子、目标物GSH、纳米金和缓冲液;基于目标物GSH对二硫键的裂解功能,使得发夹结构被破坏,释放Walker核酸链,释放的Walker核酸链和P3探针可以通过支点介导的链置换反应将P2从复合探针P上置换下来,P2为富含G‑四联体的序列,在存在血红素时形成G‑四联体/血红素DNA酶,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

    一种检测啶虫脒的电化学传感器

    公开(公告)号:CN112378977A

    公开(公告)日:2021-02-19

    申请号:CN202011263843.2

    申请日:2020-11-12

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明提供了一种检测啶虫脒的电化学传感器,包括检测电极,Nb. BbvCI酶,Klenow聚合酶,血红素,序列如SEQ ID NO:4‑7所示的T1链、T2链、P1链、P2链;所述检测电极为表面修饰DT链、DW链和LP链的金电极,所述DT链、DW链和LP链序列如SEQ ID NO:1‑3所示,所述DT链的3’端和所述DW链的5’端修饰巯基。本发明中啶虫脒的检测是在电极上实现的,通过两个链置换扩增循环放大和电极上的DNA Walker的方式来实现信号的增大,从而实现啶虫脒的高灵敏检测,并获得较低的检测下限。

    一种检测卡那霉素的电化学生物传感器及其应用

    公开(公告)号:CN109507254B

    公开(公告)日:2020-09-29

    申请号:CN201811588936.5

    申请日:2018-12-25

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于核酸适配体检测卡那霉素的生物传感器,属于电化学生物传感器技术领域。利用具有识别切割功能的Nt.BbvCI内切酶,实现了primer的循环利用,放大了检测信号,提高了检测的灵敏度;利用了核酸外切酶III的特异性的识别和水解作用实现了第二步循环放大,进一步提高了检测的灵敏度。本发明的电化学生物传感器可以高特异性检测;该传感器的反应条件温和,反应速度快;作电极的工艺成本低,适用于产业化中价廉的要求,适用于食品安全中卡那霉素的检测和生物传感器产业化的实际应用。

    基于回文分子信标检测ATP的生物传感器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110609020A

    公开(公告)日:2019-12-24

    申请号:CN201910754057.3

    申请日:2019-08-15

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于回文分子信标检测三磷酸腺苷(ATP)的生物传感器,包括回文分子信标MB、ATP适配体(劈开的适配体探针AP1、AP2)、目标物ATP、Bst DNA聚合酶、UDG、核酸内切酶IV和缓冲液;基于核酸适配体与目标物的特异性识别,从而使两个劈开的适配体片段尾部序列邻近,将回文分子信标MB的发夹结构打开产生荧光,与此同时预锁定的回文序列被释放,进行分子间的杂交,从而触发自发聚合、修复、内切、循环过程,实现荧光信号的放大,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

    一种检测ATP活性的生物传感器及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN109507168A

    公开(公告)日:2019-03-22

    申请号:CN201811568677.X

    申请日:2018-12-21

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于纳米金颗粒团聚产生表面增强拉曼散射检测ATP(三磷酸腺苷)活性的生物传感器,利用ATP能够和其核酸适配体(Aptamer)特异性结合的特性,将纳米金颗粒表面的Walker Chain释放,从而利用核酸酶将纳米金表面更短的Track Chain催化水解,致使纳米金颗粒失去了核酸链保护,在高盐缓冲液中团聚,产生表面等离子体共振效应,极大的增强金纳米颗粒表面电磁场强度,使标记在纳米金颗粒表面的拉曼染料产生表面增强拉曼散射(SERS)效应,在特定的位置出现拉曼光谱;当反应液中不存在ATP时,无法将Protect Chain置换下来,从而无法进行后续的纳米金团聚的反应,进而没拉曼散射光谱产生;本发明通过修饰于纳米金颗粒表面的核酸链做底物实现了快速、灵敏、安全的ATP活性检测。

    一种检测多氯联苯的生物传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN111521808B

    公开(公告)日:2022-11-25

    申请号:CN202010319559.6

    申请日:2020-05-26

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于金纳米粒子的DNA分子机器检测多氯联苯(PCB)的生物传感器,发卡探针HAP1通过polyA修饰到纳米金的表面和HAP2、拱形探针(由Walker链和APT杂交成的双链)通过polyA修饰到纳米金的表面;基于目标物PCB对适配体的亲和力,破坏拱形探针,释放Walker核酸链,通过toehold介导打开HAP1,进而打开HAP2,从而把Walker链挤掉,挤掉的Walker链与其他的HAP1杂交,依次循环直至HAP2全部被打开,暴露出G‑rich序列,在存在血红素时形成G‑四联体/血红素DNA酶。G‑四联体/血红素类辣根过氧化物酶催化鲁米诺产生化学发光,从而构建了生物传感器;该传感器反应只需一步,检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高。

    基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110632300B

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN201910890363.X

    申请日:2019-09-20

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明涉及生物传感器技术领域,特别涉及基于核酸适配体检测沙门氏菌的生物传感器,基于核酸适配体与目标物的特异性识别,将发夹探针HAP打开,利用支点介导的链置换反应,将S1从复合探针S上置换下来,置换下来的S可以通过催化发夹自组装(CHA)放大方式使得形成G‑四联体的序列暴露出来,在存在血红素时形成G‑四联体/血红素DNA酶。运用G‑四联体/血红素类辣根过氧化物酶的催化性能来将半胱氨酸氧化成胱氨酸,无法实现半胱氨酸与银簇之间的通过金硫键的电荷转移,从而调控荧光信号传导,从而构建了适体生物传感器,该传感器反应只需要一步,因此具有检测速度快,操作简便,价格低廉,检测限低,特异性高等优点。

    一种检测AChE抑制剂的电化学传感器

    公开(公告)号:CN112378975B

    公开(公告)日:2022-07-05

    申请号:CN202011260984.9

    申请日:2020-11-12

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明提供了一种检测AChE抑制剂的电化学传感器,包括检测电极,Nb.BbvCI酶,序列如SEQ ID NO:1所示的STP,Hg2+,乙酰胆碱酯酶;所述STP的仅第20位连接的为核糖,其余均为脱氧核糖;所述检测电极为表面修饰DNAzyme Walker和HP链的金电极,所述DNAzyme Walker和HP链序列如SEQ ID NO:2‑3所示,所述DNAzyme Walker的3’端修饰巯基,所述HP链的5’端修饰MB(亚甲基蓝),3’端修饰巯基。本发明构建的传感器对目标物的检测是在电极上实现的,通过乙酰胆碱酯酶对乙酰胆碱的分解实现信号的增大,从而实现目标物的高灵敏检测,并获得较低的检测下限。

    一种检测啶虫脒的电化学传感器

    公开(公告)号:CN112378977B

    公开(公告)日:2022-06-10

    申请号:CN202011263843.2

    申请日:2020-11-12

    Applicant: 济南大学

    Abstract: 本发明提供了一种检测啶虫脒的电化学传感器,包括检测电极,Nb.BbvCI酶,Klenow聚合酶,血红素,序列如SEQ ID NO:4‑7所示的T1链、T2链、P1链、P2链;所述检测电极为表面修饰DT链、DW链和LP链的金电极,所述DT链、DW链和LP链序列如SEQ ID NO:1‑3所示,所述DT链的3’端和所述DW链的5’端修饰巯基。本发明中啶虫脒的检测是在电极上实现的,通过两个链置换扩增循环放大和电极上的DNA Walker的方式来实现信号的增大,从而实现啶虫脒的高灵敏检测,并获得较低的检测下限。

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