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公开(公告)号:CN118516325A
公开(公告)日:2024-08-20
申请号:CN202410712300.6
申请日:2024-06-04
Applicant: 河北工业大学
IPC: C12N9/06 , C12N9/02 , C07K19/00 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N11/14 , C12N11/18 , C12P17/12 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种固定化酶生物催化剂及其在催化合成(S)‑1‑甲基‑1,2,3,4‑四氢异喹啉中的应用。将融合表达酶固定到氨基修饰后的介孔氧化硅纳米花中,得到固定化酶生物催化剂。所述融合表达酶是亚胺还原酶和甲酸脱氢酶通过柔性连接肽[GGGGS]3连接得到的。本发明的固定化生物催化剂的蛋白负载量随酶浓度提高逐渐增加,初始酶浓度为2.5mg/mL,固定化时间为1.5h时,制备的催化剂负载量为193.2mg/gsupport,1‑MeDIQ的转化率为98%,ee值为98%。与游离酶相比,本发明的固定化生物催化剂展现出更优的pH稳定性、热稳定性和储藏稳定性。重复使用3次后,转化率仍保持在96%以上。
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公开(公告)号:CN117920352A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202311642430.9
申请日:2023-12-04
Applicant: 河北工业大学
IPC: B01J31/22 , C02F1/58 , B01J37/08 , C02F101/30
Abstract: 本发明公开了一种锆基MOF仿酶催化膜的制备方法,主要包括:以水解聚丙烯腈超滤膜为基膜,对该基膜进行聚多巴胺涂层预修饰;通过压力辅助自组装将具有类磷酸三酯酶催化功能的UiO‑66‑NH2负载于上述处理后的水解聚丙烯腈超滤膜上,得到UiO‑66‑NH2负载量为0.71‑1.42mg/cm2的锆基MOF仿酶催化膜。本发明制备的催化膜相较于粉末形态的UiO‑66‑NH2,解决了纳米催化剂在多相反应中易团聚、难分离的问题,提高了催化剂的分散性、稳定性和重复使用性。UiO‑66‑NH2纳米粒子的固有孔以及堆叠形成的间隙孔确保其高负载的同时具有优良的水通量和催化效果,实现了对MPO的有效去除。
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公开(公告)号:CN116218803A
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202310047659.1
申请日:2023-01-31
Applicant: 河北工业大学
Abstract: 本发明提供了一种亚胺还原酶及其制备方法和编码亚胺还原酶的DNA,该亚胺还原酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。该亚胺还原酶具有较高的比酶活,以及较高的热稳定性和较大的最适pH的范围,用于催化麦斯明制备(S)‑降烟碱时,转化率和对映体过量百分率较高。
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公开(公告)号:CN109675608B
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN201811522939.9
申请日:2018-12-12
Applicant: 河北工业大学
Abstract: 本发明提供了一种PB复合物纳米材料及其制备方法和应用,本发明制得的PB/MXene纳米复合物,其有呈层状结构分布的多个MXene纳米片,和均匀分布在各所述MXene纳米片表面的PB颗粒。本发明的制备方法简单、制备过程环保;本发明制得的PB/MXene纳米复合物可用作模拟酶,其具有仿过氧化物酶的活性,在碱性条件下具备过氧化氢酶的特性,且对温度的稳定性高,尤其适于检测高浓度的过氧化氢。
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公开(公告)号:CN114480472A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202210081967.1
申请日:2022-01-24
Applicant: 河北工业大学
Abstract: 本发明提供了一种融合酶的制备方法及融合酶,本发明的融合酶的制备方法首先构建融合酶质粒,之后提取融合酶质粒,并将其转入到毕赤酵母中,进行发酵表达;再利用毕赤酵母制备粗酶液,并进行融合酶的分离纯化。在非特异性过氧化酶(UPO)的突变体JaWa、SoLo、WamPa的C端融合6×His‑SUMO标签,以及融合酶在毕赤酵母中的诱导表达及其后期的分离纯化,JaWa可去除酶的过氧化活性,WamPa本身在有机溶剂中具有良好的稳定性,而SUMO标签能可有效提高酶的表达量,使之高效的催化反应。此外,将JaWa、SoLo、WamPa融合6×His‑SUMO标签后能够利用组氨酸与金属离子Ni2+的螯合作用进行分离纯化,分离纯化后的酶催化活性大大提高。
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公开(公告)号:CN111690637A
公开(公告)日:2020-09-22
申请号:CN202010391650.9
申请日:2020-05-11
Applicant: 河北工业大学
IPC: C12N11/14 , C12Q1/44 , C12Q1/34 , A62D3/02 , A62D101/04 , A62D101/26
Abstract: 本发明提供了一种有机磷降解酶基多功能催化剂的制备方法和有机磷降解酶基多功能催化剂及其应用,本发明的制备方法包括将复合型蛋黄壳结构纳米材料直接加入到具有亲和标签的有机磷降解酶的粗酶液中,经混合,分离后得到有机磷降解酶基多功能催化剂。本发明的有机磷降解酶基多功能催化剂制备方法操作简单,对酶纯度要求低,载体能够定向的与酶进行结合,制备的有机磷降解酶基多功能催化剂成本低,并且能够检测有机磷农药,还可级联降解有机磷农药,终产物对氨基苯酚具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN108715844A
公开(公告)日:2018-10-30
申请号:CN201810321796.9
申请日:2018-04-11
Applicant: 河北工业大学
IPC: C12N11/14
Abstract: 本发明提供了一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法及仿生矿化固定化酶和辅因子,包括下列步骤:将酶液溶于磷酸盐缓冲溶液中,所述酶液中的目的酶带有组氨酸标签,将金属盐和辅因子加入酶液中,得到溶液A,其中所述金属盐中的金属离子可与所述磷酸根离子形成矿物,所述辅因子带有负电荷;将所述溶液A混合均匀后在室温下静置,得到沉淀B;将含有所述沉淀B的溶液A进行离心、洗涤,得到仿生矿化固定化酶及辅因子。本发明采用仿生矿化法同时将酶和辅因子固定在同一载体上,所得固定化酶和辅因子粒子形貌规则,粒径约为9~50μm且存在介孔结构;固定化酶和辅因子对高温、pH有很好的耐受性,重复使用和贮藏稳定性高,且该固定化解决了辅因子难以回收再利用的难题。
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公开(公告)号:CN119193571A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411473121.8
申请日:2024-10-22
Applicant: 河北工业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于制备L‑2‑氨基丁酸的共固定化三酶体系,由L‑苏氨酸脱氨酶、L‑亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶共同固定在载体二氧化硅纳米花上得到,制备共固定化三酶体系所用L‑苏氨酸脱氨酶、L‑亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的质量比为(0.1~2):1:(1~10)。本发明成功将L‑苏氨酸脱氨酶、L‑亮氨酸脱氢酶、甲酸脱氢酶这三种酶共同固定在同一载体上,不仅提高了三种酶的稳定性与重复使用性,而且使用该共固定化三酶体系催化制备L‑2‑氨基丁酸的反应产率能够达到92%以上,同时实现共固定化酶与产物的有效分离以及酶的回收再利用和辅酶循环再生,从而可以简化生产L‑2‑氨基丁酸的合成反应步骤与后续分离纯化步骤,优化生产工序,降低生产成本。
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公开(公告)号:CN118620876A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410589054.X
申请日:2024-05-13
Applicant: 河北工业大学
Abstract: 本发明提供肌酐检测试剂,所述肌酐检测试剂包括重组肌酐酶、重组肌酸酶和重组肌氨酸氧化酶;所述重组肌酐酶的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.2;所述重组肌酸酶的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.4;所述重组肌氨酸氧化酶的氨基酸序列为序列表中SEQ ID NO.6。本发明的肌酐检测试剂的肌酐检测限为90.75μM,与市售的肌酐检测试剂盒的检测性能进行比较,在检测范围内相对误差优于市售试剂盒,准确度较好,为开发国产体外诊断肌酐的酶制剂奠定了基础。
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公开(公告)号:CN113981478B
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202111177307.5
申请日:2021-10-09
Applicant: 河北工业大学
IPC: C25B3/26 , C25B11/054 , C25B11/095 , C12N9/02 , C12N11/089 , C12N11/14 , C12P7/40 , C25B1/23 , C25B3/03 , C25B3/07
Abstract: 本发明公开了一种介孔材料固定化酶进行生物电催化二氧化碳还原的方法,是以SBA‑15作为介孔材料,通过3‑氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)改性,利用戊二醛共价结合聚乙烯亚胺(PEI)实现介孔材料氨基化,通过震荡混合固定化甲酸脱氢酶,利用中性红辅酶再生,在阴极实现生物电催化CO2还原。本发明制备方法操作简便,便于实施,通过PEI将甲酸脱氢酶固定化在介孔材料上,PEI可提高底物CO2吸附量,使用中性红辅酶再生可降低昂贵的辅酶的消耗,进行生物电催化CO2还原具有较高的甲酸产量。
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