公开(公告)号：CN113416662A

公开(公告)日：2021-09-21

申请号：CN202110621208.5

申请日：2021-06-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨海泉 ,  陈献忠 ,  张坤杰 ,  刘万隆 ,  董田田 ,  沈微 ,  夏媛媛 ,  陈磊 ,  曹钰

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12P7/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种产西柏三烯一醇的酿酒酵母及应用，属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过将关键酶西柏三烯醇合成酶基因、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶基因、法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)基因整合至酿酒酵母菌株基因组上，并利用启动子Phxt1替换角鲨烯合成酶(ERG9)原来的启动子来敲低竞争途径麦角固醇途径，还将含有关键酶基因ggpp基因和cbts基因的游离质粒转入该酿酒酵母中，进一步提高了西柏三烯一醇产量。本发明还采用线粒体区室化方法，将GGPP合酶和西柏三烯醇合成酶定位到线粒体中，使西柏三烯一醇产量提高至283.98μg/L，在5L发酵罐发酵水平，西柏三烯一醇产量可达15mg/L。

公开(公告)号：CN113388536A

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202110621179.2

申请日：2021-06-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈献忠 ,  杨海泉 ,  张坤杰 ,  刘万隆 ,  董田田 ,  沈微 ,  夏媛媛 ,  陈磊 ,  曹钰

IPC: C12N1/19 ,  C12N9/88 ,  C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/81 ,  C12P7/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了产西柏三烯一醇的酿酒酵母的构建方法及应用，属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过在酿酒酵母W303‑1A中异源表达西柏三烯一醇合成的2个关键酶香叶基香叶基焦磷酸合酶基因ggpps和西柏三烯醇合酶基因cbts，实现了西柏三烯一醇在酿酒酵母中的从头生产，并进一步通过与西柏三烯醇合酶基因cbts的串连过表达关键酶法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)，获得的重组菌株的西柏三烯一醇产量显著提高。将上述途径构建至酿酒酵母BY4741中，其西柏三烯一醇的产量提高至对照菌株的3倍。在关键酶法尼基焦磷酸合成酶基因前添加启动子，进一步提高重组酿酒酵母的西柏三烯一醇产量。