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公开(公告)号：CN102080094A
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN201010204691.9
申请日：2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光T载体以及其的构建方法，还涉及该荧光T载体在基因克隆中的应用，其中荧光T载体为在出发载体pMD18-TSimple Vector中引入增强子序列和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。该荧光T载体灵敏度高，在唯一保守位点插入一个碱基就可导致红色荧光蛋白(UPMT)荧光的丧失，从而克服了常规T载体通过蓝白斑对小片段插入重组子筛选时假阳性偏高的现象。同时，该T载体克隆PCR产物通过有无荧光对重组子进行筛选，不需要添加额外的底物和诱导剂如：X-gal and IPTG，成本低，操作步骤少，灵敏度又高。
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公开(公告)号：CN116004705B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202210788910.5
申请日：2022-07-06
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种无基因型限制的玉米基因编辑诱导系的创制方法及其应用，属于基因工程和转基因技术领域，本发明通过将颜色或荧光筛选标记性状和单倍体诱导性状导入具有高效遗传转化能力的自交系中，利用分子标记、颜色或荧光标记及单倍体诱导率的测定进行筛选，获得含有颜色或荧光筛选标记、具有单倍体诱导特性、且能高效遗传转化的单倍体诱导系，为无基因型限制的玉米基因编辑诱导系。利用该无基因型限制的玉米基因编辑诱导系进行基因编辑育种，可以突破基因编辑育种转化难、周期长和带有非编辑基因型遗传累赘的弊端，大大提高基因编辑育种的效率，节约育种成本，对实现各种优良自交系高效基因编辑育种具有极大的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114836467A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210572591.4
申请日：2022-05-25
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种植物高效遗传转化和筛选体系及其方法与应用，属于植物转基因工程技术领域，所述植物高效遗传转化和筛选体系包括双元载体pCWBG和双元载体pBOE/pBC，所述双元载体pCWBG至少包含第一筛选标记基因、Bbm蛋白编码基因、Wus2蛋白编码基因和CRE蛋白编码基因的表达盒。本发明通过构建玉米Bbm和Wus2表达盒切除载体，建立了双元载体共转、双标记筛选和早期Bbm和Wus2基因切除的高效遗传转化方法，提高了玉米转化效率，显著降低了转化苗和转化植株畸形不育率，节约了转化成本，可在玉米转基因和基因编辑育种上广泛开发应用。
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公开(公告)号：CN103224950B
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201310182865.X
申请日：2013-05-16
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明构建了一种适合于黄曲霉菌遗传转化的表达载体，它包括以下两个步骤：一）含筛选标记基因和红色荧光报告基因的融合基因表达盒的供体质粒的构建：1）选择合适的供体骨架载体，2）设计引物，3）基因融合，4）构建含融合基因表达盒的供体载体；二）将融合基因表达盒克隆到双元表达载体上：1）双元表达载体的改造，2）将融合基因表达盒插入改造后的双元表达载体。本发明的载体转化黄曲霉菌后，可同时进行抗性和红色荧光筛选重组菌，提高筛选效率；还可利用红色荧光监测黄曲霉菌对农作物、食品的侵染，为这一危害人类健康的产毒真菌的防治提供依据。亦可用于其它丝状真菌的转基因研究，在转基因真菌研究中具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN102286524A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110225220.0
申请日：2011-08-08
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了本发明提供一种植物转化载体及其构建方法和应用，该载体用红色荧光蛋白UPMT和抗性筛选alad基因作为转染植物的报告基因及选择标记。两者功能类似并优于如抗生素和绿色荧光蛋白融合标记在水稻叶绿体转化中既用于筛选，又用于亚细胞器定位。由此，这两种基因作为转基因植物的筛选标记，不仅可以指示靶基因的细胞学及组织特异性的定位，也可以促进植物光合作用效率及营养物质累积。在转基因植物研究及市场化过程中具有潜在的、广泛的应用背景，有望发展成为植物转化中主导选择标记系统。
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公开(公告)号：CN1974773A
公开(公告)日：2007-06-06
申请号：CN200610096152.1
申请日：2006-09-22
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 大白菜几丁质酶CHB4基因及其克隆方法，其特征是利用已知的十字花科植物几丁质酶基因序列，通过比较设计引物，从大白菜基因组DNA中克隆特异性DNA片段，以及5′端序列片段；利用水杨酸诱导并以酶活力最高的处理植株的叶片RNA为模板，通过RACE反应得到3′端序列片段，在大白菜几丁质酶基因片段已经克隆的基础上，重新设计引物通过PCR反应从基因组DNA中扩增出该几丁质酶CHB4基因的全长1517bp。本发明为更进一步利用生物工程技术将外源几丁质酶基因转入各种植物中，从而提高植物抗真菌能力，培育抗病品种提供基础。
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公开(公告)号：CN101928719B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201010204681.5
申请日：2010-06-18
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及一种蛋白定向进化领域中对水溶性/折叠强的蛋白突变体进行筛选的一种高通量、灵敏度高、方便筛选的T载体及其构建方法和应用，本发明的T载体为在出发载体pMAL-c2x中引入6个组氨酸(His)标签、多克隆位点序列(MCS)和编码红色荧光蛋白UPMT的cobA基因序列。本发明所构建的用于筛选蛋白可溶性表达的T载体，带有强的Ptac启动子，可以对PCR产物直接用于克隆、表达、纯化；特别地，可以对水溶性强/超折叠的蛋白突变体进行方便地筛选。
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