公开(公告)号：CN101285082A

公开(公告)日：2008-10-15

申请号：CN200810123644.4

申请日：2008-05-28

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  朱宏阳 ,  李莎 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12P19/02 ,  C12N1/20 ,  C12R1/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种利用木糖醇生产中废弃的木糖母液或木糖醇母液生产木糖醇的方法：1.将木糖母液中的阿拉伯糖经分离后再加氢获得D－阿拉伯糖醇，或加氢后再分离获得D－阿拉伯糖醇；2.利用同时具有D－阿拉伯糖醇脱氢酶和木糖醇脱氢酶活力的菌株，将步骤1得到的D－阿拉伯糖醇或/和木糖醇母液中的D－阿拉伯糖醇转化成木糖醇；3.将步骤2获得的木糖醇转化液，除去菌体细胞后，经浓缩、结晶得到木糖醇产品。本发明对传统方法中产生的木糖母液和木糖醇母液加以充分利用，其工艺简单合理，可提高玉米芯、甘蔗渣等生产原料的利用率，大约提高了9～14％，较大幅度的降低整体生产成本，从而提高了木糖醇生产经济效益。

公开(公告)号：CN101289687B

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN200810123847.3

申请日：2008-06-10

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  任贲 ,  冯小海 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12Q1/04 ,  G01N30/90 ,  G01N21/78 ,  G01N30/36

Abstract: 本发明公开了一种高活力高产物特异性蔗糖异构酶生产菌株的高通量筛选方法，即将待筛选的蔗糖异构酶生产菌接入含有培养基的微孔板中振荡培养，离心去除上清液，加入蔗糖溶液进行酶转化反应，反应结束后，将每孔的上清液依次转移至另一微孔板中，加入显色试剂，并检测吸光值，筛选出蔗糖异构酶高产菌株再进行摇瓶复筛，利用薄层色谱筛选产物特异性较好的菌株，最终得到高产异麦芽酮糖的菌株或高产海藻酮糖的菌株。该筛选方法利用直观的显色反应，以及酶标板微培养、连续加样器和排枪的作用，可达到每人200样/日以上的处理量，为高产物特异性蔗糖异构酶产生菌的筛选提供了简便、高效、微量的筛选方法。

公开(公告)号：CN103789292A

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：CN201310727834.8

申请日：2013-12-26

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 蔡恒 ,  张凯

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12Q1/527

CPC classification number: C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/527 ,  C12Y401/01018

Abstract: 本发明涉及一种赖氨酸脱羧酶、制备方法及其应用。本发明采用易错PCR和DNA改组这两种技术相结合的定向进化策略，对本实验室构建的一株含编码赖氨酸脱羧酶基因ldc的菌株进行了改造，获得一株比酶活提高了2.01倍的突变菌株，突变使得产物1,5-戊二胺的发酵生产时间缩短了25%。本发明还提出了一种筛选赖氨酸脱羧酶的快速平板筛选方法，把每一轮的筛选过程缩短了1-2天。在突变体的氨基酸中，涉及到的氨基酸突变为Val147Phe/Glu583Gly。本发明也公开了编码赖氨酸脱羧酶突变体的DNA序列、表达载体、宿主细胞。本发明具有高效性和简便的可操作性。

公开(公告)号：CN101906430B

公开(公告)日：2012-09-05

申请号：CN201010105767.2

申请日：2010-02-02

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  任贲 ,  蔡恒 ,  汪晨

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12P19/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种蔗糖异构酶基因，pal I基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了上述基因的编码蛋白质，SIase酶。本发明还公开了包含上述基因的表达载体及宿主细胞，以及该基因的高效表达方法。包含上述蔗糖异构酶基因的重组菌具有异构的活性，能转化蔗糖生成异麦芽酮糖。该重组菌稳定性好，催化效率高，产物特异性明显改善，可应用于异麦芽酮糖的工业生产中。

公开(公告)号：CN101748158B

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201019026109.1

申请日：2010-02-05

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 姜岷 ,  吴昊 ,  郭亭 ,  任晓乾 ,  陈啸鹏 ,  孙佰军 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯 ,  韦萍

IPC: C12P7/16 ,  C12P7/28 ,  C12P7/10 ,  C12R1/145

CPC classification number: Y02E50/16

Abstract: 本发明公开了一种以木质纤维素类生物质为原料发酵制备生物丁醇的方法，采用稀酸水解木质纤维素类生物质制备多组分糖液；通过膜分离和吸附分离方法对多组分糖液进行脱毒处理及灭菌处理，通过膜分离方法对多组分糖液进行灭菌处理，再通过高温对不包含碳源的发酵培养基进行灭菌处理，最后将灭菌后的多组分糖液和不包含碳源的发酵培养基组合配制成发酵培养基；将丁醇生产菌接种至发酵培养基中，发酵制备生物丁醇；将发酵液经固液分离处理，液体经蒸馏得到丁醇、丙酮和乙醇。本发明既解决了传统发酵生产丁醇存在的“与人争粮，与粮争地”及原料成本高的问题，又实现了木质纤维素类生物质的多重利用。

公开(公告)号：CN101200750B

公开(公告)日：2010-09-29

申请号：CN200710190755.2

申请日：2007-11-29

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  林璐 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12N1/20 ,  C12P19/12 ,  C12R1/18

Abstract: 本发明公开一种大黄欧文氏菌(Erwinia rhapontici)NX-5及利用该菌生产蔗糖异构酶进而制备异麦芽酮糖的方法。将该菌株CGMCC No.2222接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行好气培养，离心或超滤获得含蔗糖异构酶的细胞，进而直接采用游离的含蔗糖异构酶的细胞转化蔗糖生成异麦芽酮糖或固定化含蔗糖异构酶的细胞后转化蔗糖生成异麦芽酮糖。采用该菌株使蔗糖转化率高达99.5％(w/w)，异麦芽酮糖转化率达90％，转化液中异麦芽酮糖浓度达500g/L，无水解副反应，转化液中几乎不含葡萄糖和果糖，随着反应进行也不会使产物异麦芽酮糖转化为其他成分，对工业化生产异麦芽酮糖十分有益。

公开(公告)号：CN101486984A

公开(公告)日：2009-07-22

申请号：CN200910024579.4

申请日：2009-02-20

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  朱宏阳 ,  李莎 ,  赵敏 ,  蔡恒

IPC: C12N1/20 ,  C12P19/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄杆菌，其分类命名为氧化葡糖杆菌(Gluconobacter oxydans)NH－10，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号是：CGMCC No.2709。本发明还公开了利用上述氧化葡糖杆菌制备D－木酮糖的方法。本发明筛选得到的菌株能高效转化D－阿拉伯糖醇生成D－木酮糖，采用本发明的制备方法，D－阿拉伯糖醇转化率最高可达99.5％(w/w)，D－木酮糖的得率可达95％，转化液中D－木酮糖浓度可达95g/L，转化液中几乎不含其它成分。

公开(公告)号：CN101200750A

公开(公告)日：2008-06-18

申请号：CN200710190755.2

申请日：2007-11-29

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 徐虹 ,  李莎 ,  环民霞 ,  林璐 ,  蔡恒 ,  欧阳平凯

IPC: C12P19/12 ,  C12R1/18

Abstract: 本发明公开一种大黄欧文氏菌(Erwiniarhapontici)NX－5及利用该菌生产蔗糖异构酶进而制备异麦芽酮糖的方法。将该菌株CGMCC No.2222接种于含碳源、氮源、无机盐和水的无菌培养基中进行好气培养，离心或超滤获得含蔗糖异构酶的细胞，进而直接采用游离的含蔗糖异构酶的细胞转化蔗糖生成异麦芽酮糖或固定化含蔗糖异构酶的细胞后转化蔗糖生成异麦芽酮糖。采用该菌株使蔗糖转化率高达99.5％(w/w)，异麦芽酮糖转化率达90％，转化液中异麦芽酮糖浓度达500g/L，无水解副反应，转化液中几乎不含葡萄糖和果糖，随着反应进行也不会使产物异麦芽酮糖转化为其他成分，对工业化生产异麦芽酮糖十分有益。