一种利用DNA熔解温度分析水稻香味基因的功能标记及其应用

    公开(公告)号:CN103436530A

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201310238700.X

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明公开了一种利用DNA熔解温度分析水稻香味基因的功能标记及其应用,属于生物技术领域。本发明根据水稻香味基因fgr与正常的等位基因BAD2在编码区第7外显子的序列差异设计香味基因功能标记BAD2-E7。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用外侧引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用内侧引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分fgr和BAD2序列差异,从而判别水稻材料的基因型(香味或非香味)。

    一种水稻空间诱变后代的种植及收获方法

    公开(公告)号:CN103329769A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310230125.9

    申请日:2013-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种水稻空间诱变后代的种植及收获方法,属农业技术领域。本发明针对传统的物理和化学诱变技术先收获诱变1代植株全部种子,然后从中随机选择形成诱变2代群体,导致工作量大、随机性强,且大量突变基因被遗弃的问题,提出一种水稻空间诱变后代种植及收获方法。本发明将经过空间诱变后的全部干种子浸种催芽后播种,利用密植控制分蘖,成熟期只收获稻穗特定部位种子形成诱变2代群体,提高诱变后代处理效率。与目前诱变后代处理技术相比,本发明减少了工作量、在一定程度上避免了部分突变基因型的遗弃,提高了诱变育种选择效率。

    一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法

    公开(公告)号:CN104131092B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410349635.2

    申请日:2014-07-22

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,具体公开一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本发明针对目前SNP鉴定的局限性,将多重PCR、巢式PCR、等位特异性PCR相结合,提出基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本方法利用多重PCR实现2~4个基因片段扩增,提高实验效率,降低实验成本;利用巢式PCR提高扩增片段特异性,获得高质量、浓度均一的DNA模板,提高HRM技术稳定性;利用等位特异性PCR,实现SNP位点判别,避免荧光标记的设定或繁琐的电泳及酶切操作;通过上述方法的综合运用,实现多个SNP的批量鉴定、降低实验成本。

    一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789655A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126951.8

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pik-O-F、Pik-O-R和一对内引物Pik-T-F、Pik-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示;利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pik基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pik基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

    一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789654A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126909.6

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pita-O-F、Pita-O-R和一对内引物Pita-T-F、Pita-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示。利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pita基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pita基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

    一种批量提取水稻胚乳DNA的方法

    公开(公告)号:CN103436524A

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201310238655.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种批量提取水稻胚乳DNA的方法。该方法包括如下步骤:S1.从水稻种子中切取胚乳;S2.将胚乳投入PCR板(T1板)孔中;S3.T1板每孔加入碱液,放入PCR仪中进行加热;S4.取出T1板,每孔投入钨合金珠及1×DNA抽提液;S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热;S6.取出T1板,振动;S7.将T1板放入离心机进行离心;S8.取出T1板,将上清液转移至另一PCR板(T3板)中,T3板每孔中预先加入双蒸水;S9.将T3板置于冰箱中保存。该方法快速、操作简单,可实现水稻胚乳DNA的批量提取。

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