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公开(公告)号：CN118496325A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410623114.5
申请日：2024-05-20
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号：CN114807061A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202111582307.3
申请日：2021-12-22
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株的构建方法，其包括：(1)获取IBV‑Beaudette病毒基因组全长cDNA重组质粒；(2)构建A21963G沉默突变和G22170C沉默突变的IBV‑Beaudette病毒全长cDNA重组质粒；(3)转染细胞，拯救获得的病毒即为鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株。相应的，本发明还公开了一种鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株及疫苗。实施本发明，可得到具有Vero细胞适应性的A21963G和G22170C双位点沉默点突变的基因标记毒株，为IBV基因标记疫苗的研制提供参考。
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公开(公告)号：CN114276420A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111261717.8
申请日：2021-10-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种可溶性VP2抗原，所述VP2抗原通过将VP2基因克隆到pColldⅢ载体上构成表达质粒pColldⅢ‑VP2，转化进入BL21(DE3)感受态细胞(pTf16分子伴侣)，得到基因工程菌种Escherichia coli pTf16/BL21/pColldⅢ‑VP2，提取得到可溶性VP2抗原；所述VP2基因的核苷酸序列如核苷酸序列NO.1所示。该抗原具有优异的免疫保护率，该效果和蛋白本身的可溶性以及空间结构密切相关；同时，本发明还提供了一种疫苗、抗原的制备方法。
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公开(公告)号：CN113817764A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111261808.1
申请日：2021-10-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N15/34 , C07K14/075 , C12N1/21 , C07K1/22 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白的制备及应用。所述制备方法包括：以FAdV‑4毒株DNA为模板，设计引物扩增出fiber2序列，测序正确后，将fiber2序列进行密码子优化，然后将其构建到pMal‑c2X载体上，得到重组质粒pMal‑c2X‑FAV4‑fiber2；最后转化大肠杆菌BL21进行诱导表达，得到I群4型禽腺病毒Fiber‑2蛋白。本发明方法只需要在37℃诱导3h即可，时间短，操作简单，其表达的目的蛋白是有利于纯化的可溶性蛋白，只需要一步镍柱层析，便可获得大量目的蛋白，而且成本低，易放大。
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公开(公告)号：CN117925542A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202410082281.3
申请日：2024-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/50 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒，所述表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒通过引物组对载有S1蛋白基因的质粒Fused pFastBac1‑C‑S1EGFP的扩增，得到携带同源臂的S1蛋白基因，再将携带同源臂的S1蛋白基因插入穿梭质粒，得到载有携带同源臂的S1蛋白基因的重组穿梭质粒，随后将载有携带同源臂的S1蛋白基因的重组穿梭质粒与腺病毒同源重组、转染，得到表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒，此外，本申请还公开了一种表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒的制备方法以及表达IBV病毒S1蛋白的重组腺病毒的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117683941A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311710638.X
申请日：2023-12-13
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种IBDV实时荧光定量PCR检测体系，包含引物组和探针，所述引物组包括IBDV‑VP4‑F和IBDV‑VP4‑R，所述探针为Taqman1探针，本申请通过对大量的引物组和探针的不断筛选，最终得到了一种具有高灵敏度、高特异性的引物组和探针，并使用该引物组和探针建立了一种具有高灵敏度、高特异性的IBDV实时荧光定量PCR检测体系，此外，本申请还公开了一种IBDV实时荧光定量PCR检测体系的构建方法。
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公开(公告)号：CN117487962A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311225243.0
申请日：2023-09-21
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术生产技术领域，公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAd V‑11三重荧光定量PCR检测的引物组和探针，本申请通过软件Primer Premier5设计得到多组针对FAdV‑4、FAdV‑8b、FAdV‑11的引物和探针，并且通过反复多次的筛选，得到了三组兼具良好的特异性、灵敏度且又不产生相互干扰的引物及探针，并且根据矩阵法，确定FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的最佳反应体系和反应条件，得到了一种具有良好特异性、灵敏度的FAdV‑4/FAd V‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR检测试剂盒，同时，该试剂盒由于各引物和探针之间不会相互干扰，极大程度地降低了错检、漏检等现象的发生，此外，本申请还公开了一种FAdV‑4/FAdV‑8b/FAdV‑11三重荧光定量PCR的构建方法。
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公开(公告)号：CN117430675A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311271956.0
申请日：2023-09-27
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: C07K14/165 , C07K1/22 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N15/66 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鸡传染性支气管炎的试剂盒的抗原及其制备方法、试剂盒，涉及生物工程技术领域。本发明利用能够稳定表达重组鸡传染性支气管炎病毒核蛋白(N蛋白)的重组菌，在特定条件下诱导表达重组N蛋白并经亲和层析纯化。用纯化出的重组蛋白作为包被抗原，建立了一种简便、特异的间接ELISA方法。本发明还为检测鸡传染性支气管炎病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒。
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公开(公告)号：CN109517809B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN113088539A
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN202110217088.2
申请日：2021-02-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种表达IBDV VP2蛋白的重组腺病毒及制备与应用。通过PCR扩增IBDV的VP2基因片段与穿梭质粒pAdtrack‑GOI的双酶切产物进行同源重组得到穿梭质粒pAdTrack‑GOI‑VP2，将穿梭质粒线性化后与携带了腺病毒骨架质粒pAdEasy‑1的BJ5183感受态细胞进行菌内同源重组得到重组腺病毒载体pAd‑VP2；最后将pAd‑VP2线性化后转染HEK293A细胞得到重组腺病毒rAd‑VP2。本发明重组腺病毒rAd‑VP2纯化后滴度可达6.72×109GFU/mL，接种动物后能够有效刺激特异性抗体的产生，为IBDV亚单位疫苗的研发奠定一定的基础。
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