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公开(公告)号：CN109517809A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN110904055B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN201911119406.0
申请日：2019-11-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了猪繁殖与呼吸综合征病毒重组疫苗株PRRSV‑SP及其制备方法与应用。本发明将疫苗株SP的T3448A位点突变，得到重组疫苗株PRRSV‑SP。本发明将一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒湖北分离株HUB2的主要结构蛋白GP5和M的基因ORF5和ORF6放进重组疫苗株PRRSV‑SP相应编码区域进行表达，获得了嵌合毒株vSP‑Hub2。本发明提供的重组疫苗株PRRSV‑SP和嵌合毒株vSP‑Hub2没有明显的致病性，可以作为进一步研究弱毒疫苗及PRRSV毒株变异机制的基础材料，通过感染性克隆系统构建新的弱毒疫苗株的成功，也可用于制备抗PRRSV同源以及异源毒株的新型高效广谱疫苗。
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公开(公告)号：CN109517808A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811389187.3
申请日：2018-11-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/50 , C12N15/63 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一株M蛋白糖基化位点突变的传染性支气管炎病毒及其制备方法与应用。本发明利用反向遗传学技术，获得IBV全长感染性克隆，再以其为模板，对IBV M蛋白糖基化位点进行N→D的点突变，体外转录电转染细胞后获得IBV M蛋白突变病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV M蛋白糖基化位点突变对M蛋白的结构、病毒的增殖能力及其对细胞内质网压力的影响，判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为研制IBV减毒疫苗提供了参考方法。
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公开(公告)号：CN110592031B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT‑S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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公开(公告)号：CN110904055A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911119406.0
申请日：2019-11-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了猪繁殖与呼吸综合征病毒重组疫苗株PRRSV-SP及其制备方法与应用。本发明将疫苗株SP的T3448A位点突变，得到重组疫苗株PRRSV-SP。本发明将一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒湖北分离株HUB2的主要结构蛋白GP5和M的基因ORF5和ORF6放进重组疫苗株PRRSV-SP相应编码区域进行表达，获得了嵌合毒株vSP-Hub2。本发明提供的重组疫苗株PRRSV-SP和嵌合毒株vSP-Hub2没有明显的致病性，可以作为进一步研究弱毒疫苗及PRRSV毒株变异机制的基础材料，通过感染性克隆系统构建新的弱毒疫苗株的成功，也可用于制备抗PRRSV同源以及异源毒株的新型高效广谱疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116179583A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211568799.5
申请日：2022-12-06
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于昆虫病毒FHV RNA1复制子在外源基因扩增中的应用，该应用通过昆虫病毒FHV RNA1复制子的自主复制能力在mRNA水平上进行外源基因的扩增；本发明公开了上述基于昆虫病毒FHV RNA1复制子的质粒系统和该质粒系统的构建方法；本发明还公开了该质粒系统在细胞中表达蛋白的方法和应用，该质粒系统在双酶切后获得克隆载体，与外源基因进行同源重组后，在细胞中表达动物或植物蛋白。
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公开(公告)号：CN109517809B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN112813038A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110102802.3
申请日：2021-01-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株表达ASFV结构囊膜蛋白的PRRS病毒及其构建方法与应用。本发明通过将ASFV结构囊膜蛋白基因克隆入上游设置T7启动子的PRRS病毒基因组中的非结构蛋白基因与结构蛋白基因之间；在结构囊膜蛋白基因和结构蛋白基因之间设置调控序列；再对所得到的序列进行转录，得到的RNA转染细胞，收集病变的细胞，得到表达ASFV结构囊膜蛋白的PRRS病毒。本发明提供的构建方法可快速获得含有ASFV和PRRSV免疫原的重组病毒，从而为开发多效价疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN112301054A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011145191.2
申请日：2020-10-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C07K14/165 , C07K14/435
Abstract: 本发明公开了一种利用K1E噬菌体RNA聚合酶和启动子的双质粒系统在真核细胞质表达蛋白的方法。本发明通过将NP868R帽状酶片段构建至含有K1E RNA聚合酶表达序列的载体，得到重组载体A；将目的蛋白的cDNA序列构建至含有K1E启动子的载体，得到重组载体B；将重组载体A和重组载体B转染至宿主真核细胞中进行表达，得到目的蛋白。本发明提供的方法能将难以通过传统蛋白外源表达方法表达的蛋白进行表达，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗。
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公开(公告)号：CN110592031A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT-S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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