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公开(公告)号：CN119530170A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411533407.0
申请日：2024-10-31
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50 , C07K14/165 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种一种PEDV N蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用，该方法包括对PEDV N蛋白进行原核表达，并进行纯化，得到PEDV N蛋白；将纯化后的PEDV N蛋白与等体积弗氏佐剂乳化，多点位注射8周龄的雌性BALB/c小鼠，两周免疫一次；按5：1比例取已加强免疫3天后的小鼠的脾细胞与对数生长期的SP2/0细胞混合均匀，在PEG1500作用下进行细胞融合，融合后的细胞混合液使用HAT培养基培养；采用间接ELISA方法筛选出分泌抗体能力强的阳性孔，并采用有限稀释法进行亚克隆，获得6株分泌抗体的细胞株；采用体内诱生腹水法对PEDV N蛋白mAb进行制备。本发明制备得到的PEDV N蛋白单克隆抗体均可特异性高效结合，能够作为PEDV病毒感染和抗感染机制研究的抗体工具。
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公开(公告)号：CN112048484A
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN202010730869.7
申请日：2020-07-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，所述重组病毒在病毒rDHN3mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3‑mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。该重组病毒为弱毒型、应用后具有较强烈的保护性免疫反应、是针对流行毒株的NDV/IBDV二联疫苗的具有实用性的潜在毒株，同时本发明还公开了该重组病毒的制备方法和疫苗。
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公开(公告)号：CN111019966A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911367696.0
申请日：2019-12-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有较髙棒状杆菌复制能力的表达质粒，所述表达质粒的第1786位点的核苷酸为A或G，其余位点与质粒pXMJ19相同；所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:14所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得2株比pXMJ19质粒拷贝能力高6～8.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786A和pXMJ19C1786G质粒，pXMJ19C1786A拷贝数约为115，pXMJ19C1786G质粒的拷贝数约为170。
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公开(公告)号：CN109517809A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN119220506A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411243968.7
申请日：2024-09-05
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/50 , A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/295 , A61P31/22 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种表达IBV S蛋白的基因VII型NDV重组病毒及其制备方法和应用，该方法包括：在pBR322‑DHN3mF病毒基因组的P基因和M基因之间插入经修饰的S基因，得到重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2、rDHN3mF‑H120‑S6P、rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS中的任一种。本发明通过将适应细胞株的IBV‑P65的S2区域与QX型IBV MH20的S2区域进行替换，拯救出重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2；通过将H120‑S蛋白上的第692位、第768位、第772位、第815位、第862位、第863位疏水性氨基酸均突变为脯氨酸拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P；在突变6个疏水性氨基酸为脯氨酸的基础上，将第533位‑第537位的氨基酸依次突变为甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、丝氨酸后拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS。将拯救出的三株重组病毒分别感染BHK‑21细胞，经WB验证能检测到S蛋白以及NDV全蛋白的高效表达。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118496325A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410623114.5
申请日：2024-05-20
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号：CN111019966B
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN201911367696.0
申请日：2019-12-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种具有较髙棒状杆菌复制能力的表达质粒，所述表达质粒的第1786位点的核苷酸为A或G，其余位点与质粒pXMJ19相同；所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:14所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位，将第1786位点的核苷酸C进行人工突变，成功获得2株比pXMJ19质粒拷贝能力高6～8.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786A和pXMJ19C1786G质粒，pXMJ19C1786A拷贝数约为115，pXMJ19C1786G质粒的拷贝数约为170。
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公开(公告)号：CN119286931A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411223001.2
申请日：2024-09-03
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
IPC: C12N15/86 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/65 , C12N15/69 , C12N15/40 , C12N15/50 , C12N15/45 , A61K39/17 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种基于塞姆利基森林病毒复制子的高效表达系统的构建方法及应用，该方法包括：构建表达报告基因的saRNA系统；构建得到taRNA系统中复制酶提供质粒；构建得到taRNA系统中抗原提供质粒；将pSFV‑CMV‑T7‑X、pSFV‑CMV‑T7‑TR‑X和pSFV‑CMV‑T7‑replicase分别线性化后进行体外转录制备mRNA；将制备的mRNA以一定的比例转染至宿主真核细胞中表达，得到抗原蛋白；对抗原蛋白检测，以评估基于SFV复制子的saRNA和taRNA系统的表达效率。本发明提供的基于病毒复制子的自扩增DNA和RNA疫苗不仅能缩短开发周期，且能够高水平表达疫苗抗原。
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公开(公告)号：CN110592031B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT‑S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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公开(公告)号：CN115094088A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210412508.7
申请日：2022-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒，采用含塞姆利基森林病毒复制子的载体，并将p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R和M1249L基因分别插入所述载体而得；所述p54，p22，p32，p72，pCD2v，M448R，MGF505‑7R基因序列依次如SEQ ID NO.15‑NO.21所示。该质粒通过插入非洲猪瘟抗原基因(X)，制得的pSFV‑flagX‑CMV复制子质粒在真核细胞能够高效表达ASFV抗原蛋白，有利于非洲猪瘟鸡尾酒DNA疫苗的研制，也有利于通过Flag抗体胶对这些蛋白进行纯化，制取有别于原核表达的，具备翻译后修饰的高质量抗原蛋白；同时，本发明还公开了该质粒的制备方法和鸡尾酒混合疫苗。
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