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公开(公告)号:CN109371047A
公开(公告)日:2019-02-22
申请号:CN201811162774.9
申请日:2018-09-30
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明公开一种利用蛋白IHF-α构建和表达耐热性抗菌肽融合蛋白的方法,通过IHF-α蛋白与耐热性抗菌肽进行融合基因设计,设计成为含有IHF-α蛋白与耐热性抗菌肽基因序列的质粒,在大肠杆菌中进行转化和克隆表达得到蛋白后,并对蛋白纯化,最终得到含有耐热性抗菌肽的融合蛋白。本发明方法将难表达的耐热性抗菌肽利用耐热性的IHF-α融合表达,使抗菌肽潜在的抑菌性能够得到抑制,使得抗菌肽可以可溶性表达。该方法操作简单,将难表达、小分子量的抗菌肽,通过与耐热性的IHF-α联合表达,使得耐热性抗菌肽快速简便获得。
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公开(公告)号:CN105755097B
公开(公告)日:2018-11-20
申请号:CN201511021978.7
申请日:2015-12-30
Applicant: 中国人民解放军第二军医大学 , 华侨大学
IPC: C12Q1/02 , A61K31/352 , A61K31/519 , A61P35/02
Abstract: 本发明提供一种全面筛选青黛中抗白血病活性成分及确定其靶标的方法,在抗白血病活性成分中,构建了全二维K562/CMC系统,将二维气相色谱和飞行时间质谱联用,并构建K562细胞膜色谱柱作为第一维色谱柱,有利于将青黛中各种组分达到最优的分离效果;在确定其靶标的过程中,采用PharmMapper Server和TargetHunter软件对活性成分进行反向实验确定活性成分的靶标、采用Venny分析软件对以上两种软件的对接靶标进行共有靶标分析,采用正向对接实验结合细胞膜色谱竞争实验、激酶活性检测实验或表面等离子共振实验进行靶标验证,能够快速、精确的确定活性成分对白血病细胞的靶标。
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公开(公告)号:CN107686860A
公开(公告)日:2018-02-13
申请号:CN201710811315.8
申请日:2017-09-11
Applicant: 华侨大学
IPC: C12Q1/6806
CPC classification number: C12Q1/6806 , C12Q2531/125 , C12Q2527/101 , C12Q2521/101
Abstract: 本发明公开了一种提高多引物RCA特异性的方法,其通过改良商品化多引物RCA试剂盒TempliPhi(Amersham Biosciences)中的各成分含量,替换成市面上容易购买并且价格低廉的2.5mMdNTP,10×BSA,phi29DNA聚合酶buffer。同时在多引物RCA反应过程中加入适当浓度的聚乙二醇(PEG,8000),可以显著地提高多引物RCA的特异性,填补多引物RCA反应中一直以来难以消减的非特异性扩增产生的拖尾现象。实现了对市售多引物RCA试剂盒的显著优化。
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公开(公告)号:CN106367414A
公开(公告)日:2017-02-01
申请号:CN201610827757.7
申请日:2016-09-18
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/10
CPC classification number: C12N15/1031 , C12Q2527/125
Abstract: 本发明公开一种利用聚乙烯亚胺增强重叠延伸PCR基因合成灵敏度和特异性的方法,步骤包括:设计需要合成的HU-β引物序列,得到混合重叠寡核苷酸模板;其中,每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸,以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基);将含有DNA聚合酶,首尾引物,以及作为模板的上述步骤混合重叠寡核苷酸的反应液中加入体积10-5~10-13倍的PEI;按照常规PCR的解链,退火,延伸三个步骤进行反复地循环,将目的核酸片段合成并且扩增,本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。
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公开(公告)号:CN104593491B
公开(公告)日:2017-01-04
申请号:CN201410848236.0
申请日:2014-12-31
Applicant: 华侨大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种利用整合宿主因子来提高PCR扩增灵敏度的方法,所述方法如下:将含有脱氧核苷三磷酸、DNA聚合酶、寡核苷酸引物、以及作为模板的核酸片段的反应溶液中,加入整合宿主因子IHF,按照常规PCR的解链、退火、延伸三个步骤,进行反复的热循环,从而将目标核酸片段扩增,所述引物与整合宿主因子IHF的摩尔比例为0.005-1。本发明方法能够特异性地、高效地扩增目标核酸序列。
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公开(公告)号:CN105463108A
公开(公告)日:2016-04-06
申请号:CN201610012695.4
申请日:2016-01-08
Applicant: 华侨大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供一种利用锁式探针滚环扩增的SNP分型检测方法,先进行锁式探针与扩增引物的设计,接着设计所得的锁式探针进行磷酸化处理,之后进行锁式探针成环反应,并采用酶切反应消化未环化的锁式探针与基因组DNA,得到环化的锁式探针,将环化的锁式探针进行滚环扩增反应,取滚环扩增反应所得的反应物并进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,通过电泳检测结果即可判定SNP的基因型。本发明方法能够直接针对外周血等生物样品进行SNP分型检测,省去了基因组的提取过程,不仅大大缩短了操作步骤和检测时间,节省了成本、降低了操作人员交叉感染的风险,具有很大的推广前景,而且检测结果准确、灵敏。
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公开(公告)号:CN102813931B
公开(公告)日:2015-01-21
申请号:CN201210281009.5
申请日:2012-08-08
Applicant: 华侨大学
IPC: A61K31/513 , A61K47/36 , A61K47/34 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖纳米粒子及其制备方法和用途,所述的壳聚糖纳米粒子主要由壳聚糖与聚甲基丙烯酰聚乙二醇酸或聚丙烯酰聚乙二醇酸组成,纳米粒子平均粒径为100~300nm,其中壳聚糖的含量占5~50wt%,聚甲基丙烯酰聚乙二醇酸或聚丙烯酰聚乙二醇酸占95~50wt%。本发明制备方法条件温和,工艺简单。制备得到的壳聚糖纳米粒子生物相容性良好,可以作为药物载体应用,具有缓释药物和PH值响应释放药物的性能。
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公开(公告)号:CN104059965A
公开(公告)日:2014-09-24
申请号:CN201410119246.0
申请日:2014-03-27
Applicant: 华侨大学
Abstract: 一种用于检测痛风相关SNP位点的等位基因特异性引物及其应用,所述引物包括引物对Fw91和Rn191,Fw91和Rn291;Fw11和Rn111,Fw11和Rn211;所述引物的应用具体为:反应体系:总体积为30μL,含有模板0.8μL、引物对各0.4μmol/L、缓冲液3μL、MgCl23.5mmol/L、海藻糖2.5mmol/L、硫酸铵10mmol/L、甘油10%、TW-200.1%、dNTP0.25mmol/L、10XSYBRGreenI染料和TaqDNA聚合酶1.8U,其余为水。本发明建立一种高效快速和低成本地对目的基因进行SNP分型检测方法。
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公开(公告)号:CN103540593A
公开(公告)日:2014-01-29
申请号:CN201310200575.3
申请日:2010-11-24
Applicant: 华侨大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种siRNA序列,具体为一种抑制Hmga2基因表达的双链siRNA序列,能抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的迁移,是很好的治疗肿瘤的药物。
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公开(公告)号:CN103288966A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310184791.3
申请日:2013-05-17
Applicant: 华侨大学
Abstract: 本发明提供一种融合受体及其用于治疗大肠癌的基因药物,所述融合受体是由eDR4基因和iFAS基因连接融合而成,所述融合受体的基因序列如SEQ ID NO.1所示,所述融合受体所编码的蛋白能与肿瘤相关凋亡诱导配体TRAIL蛋白相结合;所述融合受体基因以及sTRAIL基因相结合可作为治疗大肠癌的基因药物,所述基因药物的使用方法为:使用CAG组成型启动子驱动sTRAIL目的基因表达,肿瘤特异性Survivin启动子驱动eDR4基因与iFAS基因融合受体表达,sTRAIL通过其DR受体及eDR4基因与iFAS融合受体多靶点进行信号转导,特异诱导肿瘤细胞凋亡。
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