公开(公告)号：CN106367414A

公开(公告)日：2017-02-01

申请号：CN201610827757.7

申请日：2016-09-18

Applicant: 华侨大学

Inventor： 张云威 ,  戚智青 ,  肖桂清 ,  肖志勇 ,  刁勇

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1031 ,  C12Q2527/125

Abstract: 本发明公开一种利用聚乙烯亚胺增强重叠延伸PCR基因合成灵敏度和特异性的方法，步骤包括：设计需要合成的HU-β引物序列，得到混合重叠寡核苷酸模板；其中，每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸，以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基)；将含有DNA聚合酶，首尾引物，以及作为模板的上述步骤混合重叠寡核苷酸的反应液中加入体积10-5～10-13倍的PEI；按照常规PCR的解链，退火，延伸三个步骤进行反复地循环，将目的核酸片段合成并且扩增，本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。

公开(公告)号：CN105802956A

公开(公告)日：2016-07-27

申请号：CN201610254626.4

申请日：2016-04-22

Applicant: 华侨大学

Inventor： 李梦琳 ,  戚智青 ,  肖志勇 ,  肖桂清 ,  齐晓雪 ,  刘楠辛

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/102 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2527/125

Abstract: 本发明提供一种利用聚乙烯亚胺提高RCA扩增效率的方法，步骤如下：配置聚乙烯亚胺溶液，使用TempliPhi DNA测序模板扩增试剂盒，按照试剂盒的说明进行质粒的变性和培育操作，通过在滚环扩增过程中添加聚乙烯亚胺溶液，然后将RCA扩增产物于1％琼脂糖凝胶中进行电泳。本发明显著地提高滚环扩增的效率，增强滚环扩增的灵敏度，实现了对市售RCA试剂盒的进一步优化。