公开(公告)号：CN118726295A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410723933.7

申请日：2024-06-05

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 桂萍 ,  李晓 ,  江王涛 ,  马富强 ,  邹宏斌 ,  王学峰 ,  陆峰 ,  景伟

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/10 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的ω‑转氨酶突变体、其构建方法及应用，该ω‑转氨酶突变体是通过将野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列按如下任意一种突变方式得到的：第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为异亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为甲硫氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高、反应条件温和、工艺简单、绿色环保，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN118460498A

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202410933065.5

申请日：2024-07-12

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 ,  济南国科医工科技发展有限公司

Inventor： 马富强 ,  桂萍 ,  李海超 ,  郄兴旺 ,  李晓 ,  王学峰 ,  陆峰

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高活性耐热转氨酶突变体及其编码基因、构建方法和应用，该高活性耐热转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型转氨酶MhTA氨基酸序列的第61位色氨酸突变为丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸或缬氨酸得到的。本发明获得的5种突变体（W61A、W61C、W61G和W61V）催化前手性酮的活性显著高于突变前的野生型（简称WT），具体表现为：W61A、W61C、W61G和W61V突变体催化5‑甲氧基‑2‑萘满酮的活性分别是野生型的43.03、192.1、25.87和77.48倍。从催化活性提升效果可以看出，本发明公开的转氨酶突变体具有催化合成罗替戈汀手性中间体的应用潜力。

公开(公告)号：CN117106855A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202311382378.8

申请日：2023-10-24

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 王学峰 ,  景伟 ,  马富强 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  李晓 ,  陆泽林 ,  罗成坤 ,  陆峰

IPC: C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。

公开(公告)号：CN119639709A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202311195956.7

申请日：2023-09-15

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 马富强 ,  陈骁 ,  陆泽林 ,  江晶洁 ,  桂萍 ,  王学峰 ,  罗成坤 ,  唐玉国

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT v6突变体，该逆转录酶UCRT v6突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型逆转录酶UCRT v6相比，突变体在65℃下半衰期更长；三突变体效果更好，其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT v6的5倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT v6突变体热稳定性更好，在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。

公开(公告)号：CN119193763A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411334801.1

申请日：2024-09-24

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 马富强 ,  王学峰 ,  李长龙 ,  陆泽林 ,  桂萍 ,  陆峰 ,  李晓 ,  景伟

IPC: C12Q1/48 ,  C12Q1/66

Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量，再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度，最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。

公开(公告)号：CN118620860A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410723929.0

申请日：2024-06-05

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 桂萍 ,  李晓 ,  江王涛 ,  马富强 ,  邹宏斌 ,  王学峰 ,  陆峰 ,  景伟

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在不对称合成普拉替尼药物中间体中的应用，该ω‑转氨酶突变体由野生型ω‑转氨酶通过以下任意一种突变方式得到的：第62位色氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为异亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为甲硫氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高，具有实现(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺绿色合成路线工业化的应用前景。