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公开(公告)号:CN105859880A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610183404.8
申请日:2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
CPC classification number: C07K16/1009 , C07K2317/10
Abstract: 本发明公开了抗A型口蹄疫病毒的单克隆抗体的制备和应用,属于口蹄疫的防治领域。本发明构建了分泌抗A型FMDV的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,其微生物保藏号是:CGMCC 12049,其分泌的单克隆抗体为A型FMDV血清型特异性单抗,有高强度的中和能力;用该单克隆抗体建立的A型FMDV抗体的检测方法,本发明单克隆抗体在A型FMDV抗体检测方法中与A型FMDV的强阳性、弱阳性和疑似血清呈现良好的竞争能力,而与O型和Asia1型FMDV强阳性血清以及FMDV阴性血清没有竞争性,能够特异性区分A型FMDV的阴阳性血清,在A型口蹄疫的诊断、预防或治疗等方面具有重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN116769735A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310669599.7
申请日:2023-06-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明首次在甲病毒的基因组中通过突变失活亚基因组启动子并引入II型IRES翻译起始元件阻断甲病毒在蚊虫中的复制,切断病毒的传播途径增加疫苗的安全性,同时通过改变病毒的翻译起始机制达到致弱病毒目的,所获得的减毒株不但减毒效果理想、可诱导保护性免疫反应,而且所获得的毒株不能在动物‑动物、动物‑蚊虫间传播,安全性好,该重组病毒,可用于制备减毒活疫苗、灭活疫苗或用于制备RNA疫苗。
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公开(公告)号:CN111961654B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202010780070.9
申请日:2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒,其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点,可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株,用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗,免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护;用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN109295005B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811126187.4
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强,可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒,采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN107253979B
公开(公告)日:2020-09-29
申请号:CN201710349814.X
申请日:2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,是针对7个血清型口蹄疫病毒的一个高度保守的线性表位。抗体检测ELISA结果表明,单克隆抗体10B10识别的表位氨基酸序列及其系列突变体,能够特异性区分A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒的阴阳性血清。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在口蹄疫诊断以及口蹄疫病毒抗体检测中具有应用价值。
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公开(公告)号:CN105859842B
公开(公告)日:2019-09-24
申请号:CN201610183394.8
申请日:2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了A型口蹄疫病毒单克隆抗体识别的中和表位及其应用,属于口蹄疫的防治领域。所述中和表位的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示;其中,X1为任意一种氨基酸;X2为Pro、Ser、Ala、Gln、Val或Thr;X3为Leu、Val、Ala或Thr。所述中和表位与A型口蹄疫病毒抗体阳性血清的特异性反应试验表明其与A型FMDV的阳性血清呈现良好的反应能力,而与O型和Asia1型FMDV阳性血清以及A型FMDV阴性血清没有反应,试验结果证明该中和表位能够特异性区分A型FMDV的阴、阳性血清,在A型口蹄疫的诊断、预防和治疗等方面具有应用潜力。
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公开(公告)号:CN108085302A
公开(公告)日:2018-05-29
申请号:CN201711093774.3
申请日:2017-11-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现,FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株,该突变株具有高度的遗传稳定性,接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击,而且具有良好的安全性。本发明还发现,IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列,可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。
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公开(公告)号:CN107253979A
公开(公告)日:2017-10-17
申请号:CN201710349814.X
申请日:2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,是针对7个血清型口蹄疫病毒的一个高度保守的线性表位。抗体检测ELISA结果表明,单克隆抗体10B10识别的表位氨基酸序列及其系列突变体,能够特异性区分A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒的阴阳性血清。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在口蹄疫诊断以及口蹄疫病毒抗体检测中具有应用价值。
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公开(公告)号:CN107177558A
公开(公告)日:2017-09-19
申请号:CN201710349810.1
申请日:2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系,其微生物保藏编号为CGMCC No.13841。本发明进一步公开了所述杂交瘤细胞系分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10。间接免疫荧光检测显示,单克隆抗体10B10为一株血清型共享性单抗,其与O、A和Asia1型口蹄疫病毒均呈特异性反应。以本发明所述单克隆抗体10B10作为检测抗体,能够用于A、O和Asia1型口蹄疫病毒抗原或抗体的特异性检测。本发明所述口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10及其杂交瘤细胞系在口蹄疫的诊断或防治中具有应用前景。
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公开(公告)号:CN101724636A
公开(公告)日:2010-06-09
申请号:CN200810171258.2
申请日:2008-10-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了Asial型江苏谱系口蹄疫病毒感染性cDNA及其构建方法和应用。所述感染性cDNA包含了保证合成转录本具有感染性所要求的poIy(A)序列和poIy(C)序列,所述poIy(A)尾具有19-22个A;所述poIy(C)结构具有14-20个聚合C;其5′末端具有T7RNA聚合酶启动子序列,3′末端具有单一的限制性酶切位点。所述感染性cDNA可以和表达T7RNA聚合酶的真核表达载体组成反向遗传操作系统。该感染性cDNA及其反向遗传操作系统可用于拯救口蹄疫病毒,为研究口蹄疫病毒基因的结构与功能、病毒的分子致病机理、开发口蹄疫病毒减毒疫苗株和新型口蹄疫疫苗等奠定了实验基础。
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