公开(公告)号：CN1824769A

公开(公告)日：2006-08-30

申请号：CN200510008763.1

申请日：2005-02-25

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 李艳华 ,  蔡雪辉 ,  姜成刚 ,  刘永刚 ,  王洪峰 ,  柴文君

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明公开了猪链球菌(Streptococcus suis)的一种新菌株，微生物保藏号是CGMCC No.1316，保藏日期是2005年2月21日；本发明菌株可作为科研工作者标准的试验用菌株；通过该菌株可以了解该菌的DNA分型、该菌对药物的耐药机制、该菌多重耐药机制及该菌在猪体内的病理复制模型。

公开(公告)号：CN106520807A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201611169628.X

申请日：2016-12-16

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 涂亚斌 ,  蔡雪辉 ,  王刚 ,  刘永刚

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C07K19/00 ,  A61P31/12 ,  A61P37/02 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种胸腺素α1-猪干扰素α融合蛋白基因及其重组蛋白的制备方法。本发明的经改造后的胸腺素α1-猪干扰素α融合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明同时公开了该基因表达的重组蛋白制备及活性检测的方法，具体涉及胸腺素α1-猪干扰素α融合蛋白基因的改造、基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达、重组蛋白的制备和发酵培养条件，以及活性检测方法等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行，成本较低，实现了胸腺素α1-猪干扰素α融合蛋白在毕赤酵母中高效稳定分泌表达，表达的重组融合蛋白具有高水平的抗病毒活性和调节免疫细胞活性，为提供具有治疗猪病毒性疾病及免疫调节功能的绿色无残留生物制品奠定了基础。

公开(公告)号：CN104498417A

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201410612576.3

申请日：2014-11-04

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 蔡雪辉 ,  王淑杰 ,  刘永刚 ,  金家民

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12Q1/14 ,  C12R1/46

CPC classification number: C12N9/88 ,  C12Y402/03005

Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌分支酸合酶基因缺失株、其构建方法及应用。所述基因缺失株为含氯霉素抗性标记的CMS基因缺失株SS△CMS，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9735。本发明公开的猪链球菌血清7型重组菌SS△CMS，是采用RecA同源重组系统，利用温敏自杀质粒pSET4s作为敲除的载体对猪链球菌7型菌株分支酸合酶编码的基因进行了缺失，同时在缺失位置标记了氯霉素抗性基因而得到的菌株，破坏了分支酸合酶蛋白的表达。本发明得到的基因缺失株比亲本株的毒力强，比国际标准7型和2型菌株的毒力强，可作为科研工作者使用的标准猪链球菌7型试验用强毒菌株。

公开(公告)号：CN111057145B

公开(公告)日：2021-10-08

申请号：CN201911157547.1

申请日：2019-11-22

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 蔡雪辉 ,  刘永刚 ,  孙明霞 ,  宋欢

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体及其应用。所述的纳米抗体命名为Nb12，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明将截短表达的Nsp2重组蛋白免疫骆驼后分离骆驼外周血淋巴细胞利用RT‑PCR扩增经过免疫的双峰驼VHH基因，将其连入pCANTAB 5E噬菌体载体，构建双峰驼重链抗体可变区文库，利用噬菌体展示技术经过3轮淘选，共筛选到44株Nsp2特异性纳米抗体，试验证明这些纳米抗体能够与Nsp2蛋白特异性反应，其中Nb12有较强的结合力。抗病毒试验结果表明在接毒量为0.01个MOI时，纳米抗体Nb12在PAM细胞和Marc‑145细胞上均显示出对病毒复制的抑制作用。因此，本发明的提出为后续PRRSV Nsp2的研究以及PRRSV的防控和诊断提供了新的技术手段。

公开(公告)号：CN101805723A

公开(公告)日：2010-08-18

申请号：CN200910205503.1

申请日：2009-10-20

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

Inventor： 王淑杰 ,  蔡雪辉 ,  徐敏 ,  武佳斌 ,  刘永刚 ,  石文达 ,  李丽琴 ,  徐明明 ,  荣福龙

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  A61K39/40 ,  A61P31/04 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了谷氨酸脱氢酶蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明将链球菌GDH基因的抗原性和疏水性进行分析，去除信号肽和跨膜区域后设计一对引物对GDH基因进行克隆，以大肠杆菌成功表达了WC-SS7的GDH蛋白，将纯化的GDH重组蛋白免疫BALB/c小鼠，获得了能和GDH蛋白反应的能稳定分泌单抗的杂交瘤细胞系，其微生物保藏号是：CGMCC No.3343；所获得的重组GDH蛋白及特异性单克隆抗体能用于猪链球菌结构和功能的研究，为猪链球菌临床感染血清学诊断方法的建立奠定基础。本发明对于进一步研究谷氨酸脱氢酶在猪链球菌致病机制中的作用，以及建立猪链球菌检测方法等方面有重要的价值。