一种竹节参糖基转移酶及其在生产拟人参皂苷RT5中的应用

    公开(公告)号:CN117645982A

    公开(公告)日:2024-03-05

    申请号:CN202311531296.5

    申请日:2023-11-16

    Abstract: 本发明公开了一种竹节参糖基转移酶及其在生产拟人参皂苷RT5中的应用。本发明从竹节参中挖掘得到一个新的糖基转移酶基因,该糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码该糖基转移酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明证明,该蛋白可以将奥克梯隆型人参皂苷苷元转化为拟人参皂苷RT5。本发明设计的多个突变体,可以显著提升反应底物的葡萄糖基修饰效率,进而提升拟人参皂苷RT5的生产效率。本发明的糖基转移酶基因及其突变体蛋白弥补了现有奥克梯隆型人参皂苷生物合成相关基因数量较少的不足,为人参皂苷RT5的生物合成制备提供了新的基因和应用实例。

    一种竹节参皂苷糖苷水解酶及其在生产姜状三七皂苷R1中的应用

    公开(公告)号:CN114107255A

    公开(公告)日:2022-03-01

    申请号:CN202111383009.1

    申请日:2021-11-22

    Abstract: 本发明公开了竹节参皂苷糖苷水解酶及其在生产姜状三七皂苷R1中的应用。所述的糖苷水解酶为具有如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的蛋白质。本发明的实验证明,本发明的竹节参皂苷糖苷水解酶具有高效转化人参皂苷Ro生成姜状三七皂苷R1的作用。本发明的实验同时证明,本发明的竹节参皂苷糖苷水解酶还具有高效转化竹节参皂苷IVa生成金盏花苷E的作用和高效转化竹节参皂苷IV生产龙牙楤木皂苷VI的作用,以及高效转化伪人参皂苷RT1生成对应的C‑28脱葡萄糖基产物的作用。

    拟人参皂苷F11、RT5及人参皂苷元Ocotillol的制备方法

    公开(公告)号:CN118853807A

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202410740742.1

    申请日:2024-06-10

    Abstract: 本发明公开了一种拟人参皂苷F11、RT5及人参皂苷元Ocotillol的制备方法。筛选大孔树脂进行西洋参茎叶总皂苷提取物的分离,获得原人参二醇型人参皂苷和拟人参皂苷F11混合物;筛选糖苷水解酶进行全细胞催化反应,获得拟人参皂苷F11和原人参二醇型皂苷元混合物;再通过大孔树脂分离获得拟人参皂苷F11;通过嗜热糖苷水解酶催化拟人参皂苷F11反应生成拟人参皂苷RT5;通过两种嗜热糖苷水解酶组合催化拟人参皂苷F11反应生成人参皂苷元Ocotillol;本发明的制备方法为稀有天然产物的规模制备提供一定的理论依据,具有广泛的应用前景。

    一种制备人工熊胆粉的工程酿酒酵母及方法

    公开(公告)号:CN112779175A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202110184730.1

    申请日:2021-02-10

    Abstract: 本发明涉及生物技术和医药领域,涉及一种利用工程酿酒酵母表达的活性物质生物催化制备人工熊胆粉的方法,采用同时表达7α‑羟基类固醇脱氢酶(7α‑HSDH)和7β‑羟基类固醇脱氢酶(7β‑HSDH)基因的酿酒酵母进行液体培养后,制备粗酶提取物,直接将家禽胆汁制品如鸡胆粉中牛磺鹅去氧胆酸转化为一定比例的牛磺熊去氧胆酸。本发明体系使用体外双酶催化,添加NADP+作为辅助因子促进反应进行,粗酶制备过程简单,催化反应条件温和、结果稳定,整个过程绿色、安全、快捷、环保、无污染、可控,利用生物技术解决熊胆粉替代资源具有重要意义。

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