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公开(公告)号：CN112538492B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202011474234.1
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统。本发明的SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统入生物体或生物细胞内，使所述SpCas9n变体、sgRNA和ABE的编码基因均得到表达，实现基因组靶点序列的编辑；所述sgRNA靶向所述靶点序列；所述靶点序列的PAM序列为NRTH，N为A、T、C或G；R为A或T；H为A，T或C。本发明利用SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统在水稻中实现了更多的靶点序列中由A:T到G:C的替换，如PAM序列为NRTH的靶点序列，扩展了ABE介导的碱基替换系统的编辑范围，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112626049B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481713.6
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRRH基因及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRRH突变体，发现利用该SpCas9‑NRRH突变体进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRRH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112575014B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN108795943B
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN201810718640.4
申请日：2018-07-03
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种植物特异表达启动子POssalt2及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子。本发明将POssalt2启动子应用在植物基因工程中。本发明提供的POssalt2启动子可以在盐胁迫条件下，启动下游基因在植物中高表达。因此该启动子可以用于提高和改善植物在盐胁迫下的生长状况及环境适应性，从而有效提高植物的抗逆性。
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公开(公告)号：CN112725348A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201911029085.5
申请日：2019-10-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种提高水稻碱基编辑效率的基因、方法及其应用。本发明合成了一种含抗潮霉素蛋白的编码基因HPT、SpCas9蛋白的编码基因SpCas9n和腺嘌呤脱氨酶编码基因ABE的共转录单元ABEHPT，还提供包含该ABEHPT的一种表达载体，以及表达载体在水稻基因单碱基编辑方面的应用。将表达载体导入植物体内后，能同时转录和翻译ABE碱基编辑器和潮霉素基因，通过潮霉素筛选，提高植物细胞中ABE碱基编辑器表达量，从而提高植物细胞中ABE碱基编辑效率。实验证明，利用本发明设计的ABEHPT基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA上的A:T突变成G:C定点替换的效率大幅提升，在高效获得单碱基替换植株方面具有重要的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112575014A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011462235.4
申请日：2020-12-11
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种新型的碱基编辑器SpCas9‑LjCDAL1及其构建和应用。本发明设计合成了新的类胞嘧啶脱氨酶LjCDAL1基因，融合失活的nSpCas9基因及3个重复的尿嘧啶糖基化酶基因抑制剂基因(uracil DNA glycosylase(UDG)inhibitor，eUGI)，成为SpCas9‑LjCDAL1基因。并且本发明还提供包含该SpCas9‑LjCDAL1基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的SpCas9‑LjCDAL1基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由C/G碱基突变成T/A。
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公开(公告)号：CN111763672A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010618772.7
申请日：2020-06-30
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种植物低温诱导表达启动子Poscold10及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子。具体而言，本发明将上述启动子应用在植物基因工程中。本发明提供的启动子能够特异地驱动外源基因在低温条件下在植物中高强度表达。通过将本发明的启动子连接到待表达的基因并利用载体转入到植物植株中，能够在低温条件下驱动外源基因在植物的各个部位中表达。
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公开(公告)号：CN107058324B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201710450957.X
申请日：2017-06-15
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/82 , A01H5/06 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了水稻根特异表达启动子POsRO4及相应水稻培育方法。本发明还提供了含有该启动子的表达盒和植物表达载体。本发明提供的启动子可以启动外源基因在植物中表达，特别能够驱动外源基因在水稻根部表达，而在植物的其它组织中不表达，增加转基因的效果，避免不必要部位表达带来的物质能量浪费，有效改良水稻的特性。本发明可以用于提高和改善水稻的生长特性，特别是改善水稻的根部性状，从而培育出理想的水稻品种。
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公开(公告)号：CN105671049B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201610157500.5
申请日：2016-03-17
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻花药特异表达启动子OsAnth3及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、重组表达载体以及利用其获得相应宿主菌和转化子的方法。经染色实验验证，本发明的水稻花药特异表达启动子OsAnth3能够驱动目标基因在水稻花药中强表达，而其他部位几乎没有任何表达，证明本发明的启动子具有很强的组织特异性。将其应用于转基因品种的培育，能够以最小代谢负担而改变花药部分的生长特性，具有显著的潜在社会和经济价值。本发明将其应用于植物基因工程中，驱动目标基因在作物花药中特异表达，利用本发明的启动子与具有抑制或干扰花药生长功能的基因配合使用，干扰作物花药的生长发育，用于杂交育种研究；阻断基因飘移，防控转基因作物可能引起的生态风险。
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公开(公告)号：CN105695464B
公开(公告)日：2019-07-09
申请号：CN201610149403.1
申请日：2016-03-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻花粉特异表达启动子OsPoll2及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、重组表达载体。此外，本发明还提供了利用该水稻花粉特异表达启动子OsPoll2在植物的花粉中驱动特定目的基因表达的方法。并且本发明将上述启动子应用在作物基因工程中。本发明提供的启动子可以特异地驱动目标基因在作物花粉中表达，从而可有效改变花粉的活力，杜绝有活力的花粉扩散造成的转基因漂移风险。利用本发明的启动子配合具有抑制花粉活力功能的目的基因对现有转基因水稻品种进行改良，可以既保留了转基因水稻在其他方面的优异性状，又避免了基因漂移风险，为转基因品种的深入研究和推广应用奠定了良好地基础，提供了有效地安全保障。
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