卵巢组织异体发育的方法
    92.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102703376A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210194663.2

    申请日:2012-06-14

    Abstract: 本发明公开了卵巢组织异体发育的方法,包括以下步骤:(1)移植卵巢组织的准备;(2)卵巢组织的移植;(3)卵巢组织的收获;(4)卵母细胞的成熟。本发明采用受体小鼠的肾脏作为卵巢组织移植发育的载体,将异体卵巢组织移植在受体小鼠的肾包膜下,使卵巢组织借助肾包膜同肾脏表面紧密结合,该移植方法具有不破坏肾脏组织、对肾脏和受体小鼠损害最小及操作简单等特点,因此,该方法可作为物种卵母细胞资源的储备,对于挖掘遗传资源开展现代畜牧业的遗传育种、新品种培育和濒临灭绝野生动物的保护等均具有着重要的意义。

    猪卵丘干细胞的分离方法
    93.
    发明授权

    公开(公告)号:CN102268404B

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201110204169.5

    申请日:2011-07-20

    Abstract: 本发明公开了一种猪卵丘干细胞的分离方法。其方法是抽取青年母猪卵丘卵母细胞复合物,卵母细胞体外成熟培养后,消化脱离卵丘细胞,收集消化的卵丘细胞进行培养,待有细胞集落出现并形成较大的细胞集落后,消化传代接种到饲养层上,在含有细胞因子的培养液中进行培养,分离培养的卵丘干细胞具有鸟巢状细胞生长形态,细胞圆形、核较大,细胞表达干细胞特有的标记Oct4、Nanog、SSEA1,体外分化能够形成来源于三个胚层的神经细胞、肌肉细胞和肝脏细胞,结果显示从猪卵丘细胞中分离培养了卵丘干细胞。

    一种简单、经济、高效的猪卵母细胞体外成熟方法

    公开(公告)号:CN101709290A

    公开(公告)日:2010-05-19

    申请号:CN200910185795.7

    申请日:2009-12-03

    Abstract: 一种简单、经济、高效的猪卵母细胞体外成熟方法,包括采集卵巢步骤,从卵巢中采集卵母细胞步骤,卵母细胞的筛选步骤和体外成熟培养步骤,其特征在于,卵母细胞体外成熟培养的整个过程都是在人工呼出肺气环境中进行的,具体是将筛选的卵丘-卵母细胞复合体,平均40个卵丘-卵母细胞复合体一个孔,移入四孔板中,将四孔板移入充气袋中,封口机封住袋口,试验人员进行呼吸气体交换,用吹气针将肺部气体吹入充气袋中,把充气袋中空气排完,将充气袋吹满肺气并封口,将该充气袋置于38℃的恒温箱培养,成熟培养42-44h。

    一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法

    公开(公告)号:CN120060366A

    公开(公告)日:2025-05-30

    申请号:CN202510284197.4

    申请日:2025-03-11

    Abstract: 本发明公开了一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法,包括以下步骤:S1、胎儿成纤维细胞的分离培养及鉴定,S2、ATP7B基因sgRNA设计,S3、Cas9‑ATP7B‑sgRNA表达载体的构建,S4、胎儿成纤维细胞的转染及sgRNA的筛选,S5、基因编辑单克隆细胞系的构建等等,从而完成基因编辑的巴马小型猪胎儿成纤维单克隆细胞的制备。本发明方法简单,可靠性高,具有较高的基因编辑效率,获得的ATP7B基因编辑的巴马小型猪体细胞,不仅有继续发育的能力,可用于后续WD动物模型的制备,而且其本身与心血管生长性状与人类相似,能够为WD神经退行性发病及恶化机制的研究提供理想模型。

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