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公开(公告)号:CN102824397A
公开(公告)日:2012-12-19
申请号:CN201110164371.X
申请日:2011-06-17
Applicant: 安徽农业大学
Inventor: 曹鸿国 , 章孝荣 , 项性龙 , 南花婷 , 杨盼 , 蒲勇 , 张运海 , 刘亚 , 陶勇 , 方富贵 , 李运生 , 任春环 , 张子军 , 丁建平 , 刘洪瑜 , 刘旭光 , 王力生
Abstract: 本发明公开了一种复方中草药烫伤外敷剂,由仙人掌5g,垂盆草5g,四季青叶5g和甘油7.5g组成。本发明取材方便,制作容易,疗效明显,成本低廉,所使用的原料药材为常绿植物或绿期较长,可以随时大量获取用于制备。
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公开(公告)号:CN102703376A
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201210194663.2
申请日:2012-06-14
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了卵巢组织异体发育的方法,包括以下步骤:(1)移植卵巢组织的准备;(2)卵巢组织的移植;(3)卵巢组织的收获;(4)卵母细胞的成熟。本发明采用受体小鼠的肾脏作为卵巢组织移植发育的载体,将异体卵巢组织移植在受体小鼠的肾包膜下,使卵巢组织借助肾包膜同肾脏表面紧密结合,该移植方法具有不破坏肾脏组织、对肾脏和受体小鼠损害最小及操作简单等特点,因此,该方法可作为物种卵母细胞资源的储备,对于挖掘遗传资源开展现代畜牧业的遗传育种、新品种培育和濒临灭绝野生动物的保护等均具有着重要的意义。
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公开(公告)号:CN102268404B
公开(公告)日:2012-07-11
申请号:CN201110204169.5
申请日:2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 本发明公开了一种猪卵丘干细胞的分离方法。其方法是抽取青年母猪卵丘卵母细胞复合物,卵母细胞体外成熟培养后,消化脱离卵丘细胞,收集消化的卵丘细胞进行培养,待有细胞集落出现并形成较大的细胞集落后,消化传代接种到饲养层上,在含有细胞因子的培养液中进行培养,分离培养的卵丘干细胞具有鸟巢状细胞生长形态,细胞圆形、核较大,细胞表达干细胞特有的标记Oct4、Nanog、SSEA1,体外分化能够形成来源于三个胚层的神经细胞、肌肉细胞和肝脏细胞,结果显示从猪卵丘细胞中分离培养了卵丘干细胞。
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公开(公告)号:CN102533746A
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201210016197.9
申请日:2012-01-11
Applicant: 安徽农业大学 , 合肥博大牧业科技开发有限责任公司
Abstract: 本发明公开了一种山羊COX II基因片段的筛选方法及其应用。该筛选方法以构建的山羊精子池DNA为模版,利用设计的特异性引物P1在Tag DNA聚合酶、buffer、Mg2+、dNTPs存在的情况下,设定相应的程序,PCR扩增COX I I基因。根据琼脂糖凝胶电泳图判定目的片段大小。测序获得序列及突变位点信息,结果显示扩增产物存在1个碱基的突变。利用限制性内酶切酶HindI II消化P1扩增产物后,再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切后的扩增片段。通过对P1的扩增产物进行基因型和基因频率分析,以及与安徽白山羊、波尔山羊的精子活力之间进行关联分析,表明COX II基因由引物P1检测的SNP位点可作为山羊精子活力性状选择的分子标记,为山羊精液品质性状标记辅助选择提供分子标记。
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公开(公告)号:CN102391987A
公开(公告)日:2012-03-28
申请号:CN201110366111.0
申请日:2011-11-17
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明公开了一种用于分离小鼠脂肪干细胞的消化液。所述消化液的组成成分为10%的胎牛血清,0.09%的胶原酶I,余量为DMEM/F12。本发明的成分简单,来源方便,成本低;能够有效的从小鼠的脂肪组织中分离出脂肪干细胞;能够很好的维持细胞的活性,为细胞的后期培养和进一步的科学研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN102321658A
公开(公告)日:2012-01-18
申请号:CN201110204153.4
申请日:2011-07-20
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪体细胞的重组蛋白诱变方法。其方法是构建细胞穿透肽外源限定因子的重组蛋白用于猪体细胞的诱导,从细菌中提取并纯化细胞穿透肽外源限定因子的重组蛋白,将限定因子重组蛋白添加到猪体细胞培养液中进行诱变,细胞穿透肽外源限定因子的重组蛋白能够进入猪体细胞中,在干细胞培养条件下能够逐渐形成集落边缘界限清晰的细胞集落,细胞集落中的单个细胞呈现圆形、细胞核较大且在细胞内所占比例较高,集落内细胞表达碱性磷酸酶和干细胞特异性分子标记Oct 4和Nanog。本发明证实限定因子重组蛋白能够使猪体细胞在形态、生长方式、基因表达等方面发生诱变作用。
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公开(公告)号:CN102068322A
公开(公告)日:2011-05-25
申请号:CN201110042747.X
申请日:2011-02-22
Applicant: 安徽农业大学
Inventor: 李运生 , 张运海 , 韩春杨 , 章美玲 , 随刘才 , 曹鸿国 , 章孝荣 , 刘亚 , 陶勇 , 张远亮 , 焦明慧 , 季索菲 , 贾晴 , 张宇 , 桂涛 , 周娜汝 , 刘晓蕊 , 杨盼 , 张子军 , 丁建平
IPC: A61D19/00
Abstract: 本发明公开了一种山羊超数排卵方法,其步骤是:选取可以用于超数排卵的雌性山羊,每天早晚试情,以观察到首次发情作为第0天,分别在第四、第五、第六、第七天早晚各注射一次促卵泡素,第七天早晚同时注射氯前列烯醇,第八天注射促黄体素,第九天进行腹腔镜输精,第十天通过手术法回收原核胚或第十六天收集桑椹胚。本发明取消了山羊常规超排方法中需放置孕酮栓的过程,缩短了生产时间,降低了生产费用,同时该方法可以获得与常规超排方法一样的超排效率,每个批次的实验结果为每只羊平均能获得胚胎8-30枚。
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公开(公告)号:CN101709290A
公开(公告)日:2010-05-19
申请号:CN200910185795.7
申请日:2009-12-03
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 一种简单、经济、高效的猪卵母细胞体外成熟方法,包括采集卵巢步骤,从卵巢中采集卵母细胞步骤,卵母细胞的筛选步骤和体外成熟培养步骤,其特征在于,卵母细胞体外成熟培养的整个过程都是在人工呼出肺气环境中进行的,具体是将筛选的卵丘-卵母细胞复合体,平均40个卵丘-卵母细胞复合体一个孔,移入四孔板中,将四孔板移入充气袋中,封口机封住袋口,试验人员进行呼吸气体交换,用吹气针将肺部气体吹入充气袋中,把充气袋中空气排完,将充气袋吹满肺气并封口,将该充气袋置于38℃的恒温箱培养,成熟培养42-44h。
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公开(公告)号:CN120060366A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510284197.4
申请日:2025-03-11
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/52 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种巴马小型猪的ATP7B基因编辑体细胞的制备方法,包括以下步骤:S1、胎儿成纤维细胞的分离培养及鉴定,S2、ATP7B基因sgRNA设计,S3、Cas9‑ATP7B‑sgRNA表达载体的构建,S4、胎儿成纤维细胞的转染及sgRNA的筛选,S5、基因编辑单克隆细胞系的构建等等,从而完成基因编辑的巴马小型猪胎儿成纤维单克隆细胞的制备。本发明方法简单,可靠性高,具有较高的基因编辑效率,获得的ATP7B基因编辑的巴马小型猪体细胞,不仅有继续发育的能力,可用于后续WD动物模型的制备,而且其本身与心血管生长性状与人类相似,能够为WD神经退行性发病及恶化机制的研究提供理想模型。
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