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公开(公告)号：CN113755515B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202111151501.6
申请日：2021-09-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/04 , C12N15/31 , C12N15/54 , A23L33/125 , A61K31/715 , A61P39/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高效生产克拉酸的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程、发酵工程和材料科学领域。本发明通过编辑CA合成的关键基因，构建了过量生产CA的突变体；然后通过单因素和响应面法获得最优培养基，并对发酵罐中的发酵条件进行优化。采用本发明的方法制备得到的CA的产量达到19.79g/L，高于已知的最大产量(10.39g/L)，提高了90.47％。此外，对利用本发明的方法制备得到的CA进行了性质的表征，证明其具有优良的性质，如固体形态、分子量、空间结构、链构象、热学和流变学性质等。本发明中CA的高产为规模化生产和CA性质研究提供了夯实的基础，CA性质的揭示为CA的开发利用提供了坚实的理论基础。
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公开(公告)号：CN114908031A
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202210724913.2
申请日：2022-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高效生产克拉酸的脂多糖结构截短的大肠杆菌菌株的构建，属于基因工程和发酵工程领域。本发明通过在脂多糖截短的大肠杆菌WQM001菌株基础之上继续删除ackA，rfbB，rfbD，rfbA，rfbC，rfbX，glf，wbbH，wbbI，wbbJ，wbbK以及wbbL基因构建得到WZM008菌株。随后通过构建pTrcS质粒过表达uppS基因，并将该质粒导入WZM008成功构建WZM008/pTrcS重组菌株。WZM008/pTrcS重组菌上罐水平达到11.68g·L‑1，是出发菌株克拉酸产量的3.54倍。且根据本发明制备得到的克拉酸，分子量可达11.4×103kDa，具备三螺旋结构。本发明首次探究了代谢途径改造对克拉酸生产的影响，为后续代谢工程改造大肠杆菌构建克拉酸高产菌株提供了新思路，同时对克拉酸的工业化生产起到了一定的促进作用。
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公开(公告)号：CN114908031B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202210724913.2
申请日：2022-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高效生产克拉酸的脂多糖结构截短的大肠杆菌菌株的构建，属于基因工程和发酵工程领域。本发明通过在脂多糖截短的大肠杆菌WQM001菌株基础之上继续删除ackA，rfbB，rfbD，rfbA，rfbC，rfbX，glf，wbbH，wbbI，wbbJ，wbbK以及wbbL基因构建得到WZM008菌株。随后通过构建pTrcS质粒过表达uppS基因，并将该质粒导入WZM008成功构建WZM008/pTrcS重组菌株。WZM008/pTrcS重组菌上罐水平达到11.68g·L‑1，是出发菌株克拉酸产量的3.54倍。且根据本发明制备得到的克拉酸，分子量可达11.4×103kDa，具备三螺旋结构。本发明首次探究了代谢途径改造对克拉酸生产的影响，为后续代谢工程改造大肠杆菌构建克拉酸高产菌株提供了新思路，同时对克拉酸的工业化生产起到了一定的促进作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110317767B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910599466.0
申请日：2019-07-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。所述基因工程菌为TWF001/pFW01‑phaCAB，在三氯生表达质粒pFW01上过表达了phaCAB，可以在胞外合成苏氨酸，胞内合成PHB。本发明构建的菌株苏氨酸合成量大大提高，在摇瓶发酵水平产量为17.0g/L，在3‑L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为96.4g/L，在10L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为133.5g/L。所述基因工程菌为TWF001/pFW01‑phaCAB生长状况良好，未引入外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN110317767A
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201910599466.0
申请日：2019-07-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。所述基因工程菌为TWF001/pFW01-phaCAB，在三氯生表达质粒pFW01上过表达了phaCAB，可以在胞外合成苏氨酸，胞内合成PHB。本发明构建的菌株苏氨酸合成量大大提高，在摇瓶发酵水平产量为17.0g/L，在3-L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为96.4g/L，在10L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为133.5g/L。所述基因工程菌为TWF001/pFW01-phaCAB生长状况良好，未引入外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN109486845A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811549261.3
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法，属于合成生物技术领域。本发明标准化的最简启动子与RBS文库，使针对目标基因表达量的调控的改造工作大幅缩短，省去了内源启动子或RBS的筛选和强度表征环节，平均一个目标基因的改造周期可以由之前的30-40天缩短为10天以内。所述调控方法的强度跨度较单一元件高一百倍以上，由此可实现对代谢途径的大幅度调控及生物系统的功能优化。较以往的粗线条的上调或下调基因表达量的方法，本发明中的利用标准元件组合调控的方法可以更加精准、定量的调控目的基因。使代谢途径得到进行更加精准的调控，尤其是分支点处的流量调节，可提高目标产物产量，同时防止某些基因过度表达给细胞带来的代谢负担。
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公开(公告)号：CN113755515A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202111151501.6
申请日：2021-09-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/04 , C12N15/31 , C12N15/54 , A23L33/125 , A61K31/715 , A61P39/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高效生产克拉酸的重组大肠杆菌及其应用，属于基因工程、发酵工程和材料科学领域。本发明通过编辑CA合成的关键基因，构建了过量生产CA的突变体；然后通过单因素和响应面法获得最优培养基，并对发酵罐中的发酵条件进行优化。采用本发明的方法制备得到的CA的产量达到19.79g/L，高于已知的最大产量(10.39g/L)，提高了90.47％。此外，对利用本发明的方法制备得到的CA进行了性质的表征，证明其具有优良的性质，如固体形态、分子量、空间结构、链构象、热学和流变学性质等。本发明中CA的高产为规模化生产和CA性质研究提供了夯实的基础，CA性质的揭示为CA的开发利用提供了坚实的理论基础。
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公开(公告)号：CN109486845B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201811549261.3
申请日：2018-12-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法，属于合成生物技术领域。本发明标准化的最简启动子与RBS文库，使针对目标基因表达量的调控的改造工作大幅缩短，省去了内源启动子或RBS的筛选和强度表征环节，平均一个目标基因的改造周期可以由之前的30‑40天缩短为10天以内。所述调控方法的强度跨度较单一元件高一百倍以上，由此可实现对代谢途径的大幅度调控及生物系统的功能优化。较以往的粗线条的上调或下调基因表达量的方法，本发明中的利用标准元件组合调控的方法可以更加精准、定量的调控目的基因。使代谢途径得到进行更加精准的调控，尤其是分支点处的流量调节，可提高目标产物产量，同时防止某些基因过度表达给细胞带来的代谢负担。
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