-
公开(公告)号：CN110373438B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910703126.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高γ‑氨基丁酸产量的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上ADP‑L‑甘油‑D‑甘露‑庚糖‑6‑差向异构酶RfaD基因得到重组菌WJW00后，利用WJW00进行发酵生产GABA，GABA产量达到0.6415g/L，是野生菌W3110(0.0135g/L)的47.52倍；且重组菌WJW00发酵产物中，副产物有机酸的含量均降低，如发酵24h时，丙酮酸、乙酸、乳酸的含量相对于野生菌W3110分别降低65.1％、38.9％、56.6％。本发明提供了一种新的提高GABA合成的方法，对于进一步提高GABA的合成具有十分重大的意义。
-
公开(公告)号：CN110317767B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910599466.0
申请日：2019-07-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。所述基因工程菌为TWF001/pFW01‑phaCAB，在三氯生表达质粒pFW01上过表达了phaCAB，可以在胞外合成苏氨酸，胞内合成PHB。本发明构建的菌株苏氨酸合成量大大提高，在摇瓶发酵水平产量为17.0g/L，在3‑L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为96.4g/L，在10L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为133.5g/L。所述基因工程菌为TWF001/pFW01‑phaCAB生长状况良好，未引入外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
-
公开(公告)号：CN110669709A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201910701811.7
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过敲除鞭毛和菌毛基因高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上三个鞭毛基因簇flhE-motA，fliY-fliR和flgN-flgL得到鞭毛精简菌株WJW010，敲除菌毛基因簇fimB-fimH得到菌毛精简菌株WJW011。随后将PHB合成的三个基因转化到菌株WJW010和WJW011中，得到重组菌WJW010/pBHR68和WJW011/pBHR68，在正常的发酵条件下即可以合成细胞干重19.2％、2.8％的PHB，PHB体积产量是野生对照菌W3110/pBHR68(2％)的9.6倍和1.4倍。
-
公开(公告)号：CN112592903B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202011622463.3
申请日：2020-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2‑丁酮酸代谢解毒中的应用，具体涉及一种利用该突变型丙酮酸氧化酶重构乙酸旁路途径增强细胞对2‑丁酮酸耐受性的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。对丙酮酸氧化酶(PoxB)进行定点饱和突变得到PoxBF112W突变体，该酶增强了丙酮酸选择性，减弱了2‑丁酮酸结合亲和力。基于此突变体，在微生物细胞TWF115 ΔaceE中重建乙酸旁路，用于L‑苏氨酸的生物合成供应乙酰辅酶A和还原型辅助因子。该重构的乙酸旁路途径可以进一步去除2‑丁酮酸的代谢毒性，帮助宿主菌TWF115 ΔaceE在5g/L的2‑OBA添加下合成更高的L‑苏氨酸(13.98g/L)。
-
公开(公告)号：CN110669709B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910701811.7
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过敲除鞭毛和菌毛基因高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上三个鞭毛基因簇flhE‑motA，fliY‑fliR和flgN‑flgL得到鞭毛精简菌株WJW010，敲除菌毛基因簇fimB‑fimH得到菌毛精简菌株WJW011。随后将PHB合成的三个基因转化到菌株WJW010和WJW011中，得到重组菌WJW010/pBHR68和WJW011/pBHR68，在正常的发酵条件下即可以合成细胞干重19.2％、2.8％的PHB，PHB体积产量是野生对照菌W3110/pBHR68(2％)的9.6倍和1.4倍。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112779202A
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN202110059491.7
申请日：2021-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种敲除基因proP和proVWX高产苏氨酸的工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明中，L‑苏氨酸生产菌株TWF001通过改变细胞内的渗透压来改善大肠杆菌苏氨酸的合成途径。本发明在大肠杆菌TWF001中敲除负责编码渗透压保护剂甜菜碱转运的proP和proVWX基因，得到重组菌株TSW003，继续敲除磷酸转移酶(PTS)系统的crr或ptsG基因得到重组菌株TSW008或TSW009，最后TSW008摇瓶发酵36h后产生24.9g/LL‑苏氨酸，TSW009摇瓶发酵48h后产生26g/LL‑苏氨酸，比对照TWF001分别增加了108％和116％。
-
公开(公告)号：CN112592903A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202011622463.3
申请日：2020-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2‑丁酮酸代谢解毒中的应用，具体涉及一种利用该突变型丙酮酸氧化酶重构乙酸旁路途径增强细胞对2‑丁酮酸耐受性的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。对丙酮酸氧化酶(PoxB)进行定点饱和突变得到PoxBF112W突变体，该酶增强了丙酮酸选择性，减弱了2‑丁酮酸结合亲和力。基于此突变体，在微生物细胞TWF115ΔaceE中重建乙酸旁路，用于L‑苏氨酸的生物合成供应乙酰辅酶A和还原型辅助因子。该重构的乙酸旁路途径可以进一步去除2‑丁酮酸的代谢毒性，帮助宿主菌TWF115ΔaceE在5g/L的2‑OBA添加下合成更高的L‑苏氨酸(13.98g/L)。
-
公开(公告)号：CN112501102B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202011490461.3
申请日：2020-12-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高效生产四氢嘧啶的大肠杆菌重组菌，属于基因工程和发酵工程技术领域。所述重组菌以MG1655为出发菌株，通过引入含有基因簇ectABC、温敏蛋白CI857编码基因和温敏启动子的高拷贝质粒，使其初步具备合成四氢嘧啶的能力。通过敲除crr、iclR、thrA，同时通过在高拷贝质粒上过表达抗反馈抑制的EclysC*；另外，在同一高拷贝质粒载体上过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PPC和来自铜绿假单胞菌PAO1的天冬氨酸脱氢酶PaeAspDH。构建得到产四氢嘧啶的重组菌MWZ003/pFT28‑ectABC‑EclysC*‑aspDH‑ppc3可较出发菌株的四氢嘧啶的产量提高5.6倍，通过条件优化，在摇瓶补料分批发酵下产量可达到25.34g/L，转化率可以达到0.29g/g葡萄糖。
-
公开(公告)号：CN116606788A
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202310352887.X
申请日：2023-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种DNA支架辅助大肠杆菌生产四氢嘧啶的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明通过对四氢嘧啶合成途径酶(EctA、EctB和EctC)与锌指结构域(ZFa、ZFb和ZFc)的融合，对表达质粒替换合适的复制子，对DNA支架结构选择合适的酶结合位点间距和酶结合方向、优化DNA支架的重复单元、调整DNA支架上不同酶结合位点的化学计量数，增加限速酶EctB的表达量以及改变发酵温度转换时间的方法，得到一株高产四氢嘧啶合成菌株MWZ003/pFV30。该菌株在发酵开始后4h转变温度的条件下，胞外四氢嘧啶产量达到22.79g·L‑1，接近1.92倍高于初始菌株MWZ003/pFV4，并且葡萄糖转化率为0.65g·g‑1。该发明提供了一种提高大肠杆菌中四氢嘧啶产量的新策略。
-
公开(公告)号：CN112779202B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202110059491.7
申请日：2021-01-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种敲除基因proP和proVWX高产苏氨酸的工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明中，L‑苏氨酸生产菌株TWF001通过改变细胞内的渗透压来改善大肠杆菌苏氨酸的合成途径。本发明在大肠杆菌TWF001中敲除负责编码渗透压保护剂甜菜碱转运的proP和proVWX基因，得到重组菌株TSW003，继续敲除磷酸转移酶(PTS)系统的crr或ptsG基因得到重组菌株TSW008或TSW009，最后TSW008摇瓶发酵36h后产生24.9g/LL‑苏氨酸，TSW009摇瓶发酵48h后产生26g/LL‑苏氨酸，比对照TWF001分别增加了108％和116％。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
15
records
(took 0.039 seconds)
