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公开(公告)号：CN116355826A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310399252.5
申请日：2023-04-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种四氢嘧啶产量提高的大肠杆菌的构建与应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上基因aroG,poxB,pflB,adhE,mscS得到突变菌E.coli MWL009/pFT28‑ectABC‑EclysC*‑aspDH‑ppc3，该菌株在发酵培养基中分批发酵36h后，四氢嘧啶产量为18.28g/L，相比于E.coli MWZ003/pFT28‑ectABC‑EclysC*‑aspDH‑ppc3的四氢嘧啶产量提升了28％；在发酵培养基中补料分批发酵60h后，四氢嘧啶产量为34.27g/L，葡萄糖转化率达到0.34g/g。该研究提供了一种提高大肠杆菌中高产四氢嘧啶的新策略。
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公开(公告)号：CN115820524A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211538742.0
申请日：2022-12-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高效合成脂多糖的基因工程菌的构建方法及其应用，属于遗传工程技术领域。本发明的基因工程菌E.coliW3110△npr△yhbJ△fabF△PBAD(lpxD‑fabZ‑lpxA‑lpxB)，发生了npr、yhbJ和fabF三基因缺失突变，同时在染色体基因簇lpxD‑fabZ‑lpxA‑lpxB序列前面插入了启动子PBAD。本发明的基因工程菌，无任何抗性标记、生长状况良好、可适应大规模生产，合成脂多糖的产量为13.0mg/gDCW，较野生型E.coli W3110提高了91.2％。
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公开(公告)号：CN111363757B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202010057144.6
申请日：2020-01-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种温度开关系统及其在提高氨基酸产量中的应用，具体涉及一种利用温度开关系统调控胞内代谢流分布提高苏氨酸产量的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。本发明应用温度开关系统将整个发酵过程分为细胞生长和发酵生产两个阶段，以适应工程菌株发酵过程中不同时期的胞内环境变化。该系统通过控制丙酮酸羧化酶异源表达，并结合草酰乙酸温敏易脱羧的化学特性，在丙酮酸和草酰乙酸之间重新平衡代谢流量，动态调节中心代谢途径保证还原型辅因子的供应来促进L‑苏氨酸生产。本发明得到的温控苏氨酸生产菌株TWF106/pFT24rp和TWF113/pFT24rpa1，其苏氨酸摩尔转化率分别为111.78％和124.03％。
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公开(公告)号：CN114480464A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210235334.1
申请日：2022-03-11
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/74 , C12N15/64 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12R1/63
Abstract: 本发明公开了一种副溶血弧菌CRISPRi的双质粒构建方法，属于分子生物学和生物技术领域。本发明公开了CRISPRi工具质粒包括pSg132与pBAD33T‑d9质粒的构建方法。本发明提供了一种副溶血弧菌CRISPRi的2种质粒构建方法，经过重叠PCR与一步克隆方法构建CRISPRi工具质粒。同时也提供了双质粒在副溶血弧菌基因功能研究中的应用，可更快捷地研究基因尤其是关键基因的功能，或同时干扰多个基因对副溶血弧菌的影响。为副溶血弧菌基因功能研究提供了新的方法和技术，推动副溶血弧菌功能基因的研究发展。
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公开(公告)号：CN113106050A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110469210.5
申请日：2021-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低万古霉素耐药性的方法及其在辅因子生产的应用，属于基因工程和医药工程领域。本发明敲除大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza和4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，得到重组菌株WJW04；通过敲除大肠杆菌W3110的胞外多糖基因簇galF‑wza得到菌株WJW09；WJW09和WJW04对万古霉素的最小抑制浓度MIC分别为600mg/L和76.8mg/L，低于野生型菌株W3110对万古霉素的最小抑制浓度MIC为1000mg/L，因此，本发明的技术方案在医药行业有广泛的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111363757A
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN202010057144.6
申请日：2020-01-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种温度开关系统及其在提高氨基酸产量中的应用，具体涉及一种利用温度开关系统调控胞内代谢流分布提高苏氨酸产量的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。本发明应用温度开关系统将整个发酵过程分为细胞生长和发酵生产两个阶段，以适应工程菌株发酵过程中不同时期的胞内环境变化。该系统通过控制丙酮酸羧化酶异源表达，并结合草酰乙酸温敏易脱羧的化学特性，在丙酮酸和草酰乙酸之间重新平衡代谢流量，动态调节中心代谢途径保证还原型辅因子的供应来促进L-苏氨酸生产。本发明得到的温控苏氨酸生产菌株TWF106/pFT24rp和TWF113/pFT24rpa1，其苏氨酸摩尔转化率分别为111.78％和124.03％。
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公开(公告)号：CN110373438A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910703126.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高γ-氨基丁酸产量的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上ADP-L-甘油-D-甘露-庚糖-6-差向异构酶RfaD基因得到重组菌WJW00后，利用WJW00进行发酵生产GABA，GABA产量达到0.6415g/L，是野生菌W3110(0.0135g/L)的47.52倍；且重组菌WJW00发酵产物中，副产物有机酸的含量均降低，如发酵24h时，丙酮酸、乙酸、乳酸的含量相对于野生菌W3110分别降低65.1％、38.9％、56.6％。本发明提供了一种新的提高GABA合成的方法，对于进一步提高GABA的合成具有十分重大的意义。
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公开(公告)号：CN110317767A
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201910599466.0
申请日：2019-07-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。所述基因工程菌为TWF001/pFW01-phaCAB，在三氯生表达质粒pFW01上过表达了phaCAB，可以在胞外合成苏氨酸，胞内合成PHB。本发明构建的菌株苏氨酸合成量大大提高，在摇瓶发酵水平产量为17.0g/L，在3-L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为96.4g/L，在10L罐发酵水平，合成苏氨酸产量为133.5g/L。所述基因工程菌为TWF001/pFW01-phaCAB生长状况良好，未引入外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN113106050B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202110469210.5
申请日：2021-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低万古霉素耐药性的方法及其在辅因子生产的应用，属于基因工程和医药工程领域。本发明敲除大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza和4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，得到重组菌株WJW04；通过敲除大肠杆菌W3110的胞外多糖基因簇galF‑wza得到菌株WJW09；WJW09和WJW04对万古霉素的最小抑制浓度MIC分别为600mg/L和76.8mg/L，低于野生型菌株W3110对万古霉素的最小抑制浓度MIC为1000mg/L，因此，本发明的技术方案在医药行业有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN112575041B
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN201910942722.1
申请日：2019-09-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种混合碳源高效发酵生产PHB的工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01，继续敲除大肠杆菌基因组上O‑抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02，随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW02中，并敲除了ptsG基因，使构建的重组菌可以利用木糖和葡萄糖混合碳源合成PHB高达细胞干重的78.4％，是野生型对照菌W3110/pDXW‑8‑phaCAB(1.5％)的6倍，且较WJW02/pDXW‑8‑phaCAB提高50％。
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