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公开(公告)号:CN111304157B
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202010181822.X
申请日:2020-03-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法,属于干细胞培养领域,将牛诱导多能干细胞在含有5%二氧化碳,温度37℃条件下培养3~4天,弃掉诱导培养基,用PBS缓冲液洗净,分散酶37℃下孵育,观察克隆边缘与饲养层细胞分离后,吸取消化液,加入诱导培养基,从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞;用0.05%的胰酶在37℃的条件下消化,加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中,1000rpm离心5min,接种至新鲜的饲养层上,并更换转化培养基进行培养,直至出现圆拱形,类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。
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公开(公告)号:CN102634530A
公开(公告)日:2012-08-15
申请号:CN201210074432.8
申请日:2012-03-20
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种高表达赖氨酸的基因,属于生物工程技术领域。高表达赖氨酸的基因其核苷酸序列如SEQIDNO:1所述,该高表达赖氨酸的基因编码蛋白,其氨基酸序列如SEQIDNO:2所述。转基因小鼠奶中表达赖氨酸含量高的蛋白产物,使奶中赖氨酸含量显著提高。赖氨酸转基因小鼠的研究可以为我们进一步了解乳腺外源蛋白特别是本研究所选高赖氨酸含量外源蛋白的分泌机制,为转赖氨酸基因牛奶的研制奠定基础。
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公开(公告)号:CN102250836A
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN201110184503.5
申请日:2011-07-04
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/076
Abstract: 本发明提供的猪精液二层percoll密度梯度离心法,适用于正常的精液标本及精子密度低或精子活力低的精液标本,是一种简单、便捷的精子处理方法。该方法能除去精液中的白细胞、细菌、碎片及抗精子抗体;改善精液液化不良和精子体外获能等,使之能有效地与卵子受精,以提高妊娠率,获得的精子中有运动能力且形态正常的百分率为95%左右。本发明的方法适用于猪鲜精及稀释后精液中活力精子的筛选,为猪精子获能机制及体外受精的研究提供高质量的精子。
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公开(公告)号:CN112226404B
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202010878659.2
申请日:2020-08-27
Applicant: 吉林大学第一医院
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及培养基组合物及促进动物胚胎体外发育的培养方法。本发明的优点在于能够显著提高猪体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)胚胎的体外发育效率。在正常的PZM‑3的胚胎培养液中的SCNT胚胎囊胚率是18%~20%,采用换液的方法可以显著提高猪SCNT的囊胚率到45.7%,同使用正常胚胎培养液PZM‑3的囊胚率相比,囊胚率提高了25.7%。同时,此方法还操作方便,只要在SCNT胚胎激活24~48h后从PZM‑3(‑)的培养基中换液到PZM‑3‑Glutamax中继续培养即可,操作简单方便,适宜后续应用。
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公开(公告)号:CN109706114A
公开(公告)日:2019-05-03
申请号:CN201910130261.8
申请日:2019-02-21
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开了一种牛睾丸支持细胞诱导多能干细胞的方法,属于干细胞领域,包括如下步骤:步骤1、分离牛睾丸支持细胞;步骤2、培养牛睾丸支持细胞;步骤3、将编码Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四种转录因子转入牛睾丸支持细胞中,产生多能性干细胞。与现有技术相比,本发明充分利用了牛睾丸支持细胞差异贴壁的特点,培养出了形态均一的牛睾丸支持细胞。由于牛睾丸支持细胞来自于肉用犊牛具有较高的重编程能力。以牛睾丸支持细胞代替牛成体成纤维细胞、间充质干细胞等作为来源细胞制备诱导多能干细胞,不仅细胞获取简便而且重编程率高。
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公开(公告)号:CN111304157A
公开(公告)日:2020-06-19
申请号:CN202010181822.X
申请日:2020-03-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/074
Abstract: 一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法,属于干细胞培养领域,将牛诱导多能干细胞在含有5%二氧化碳,温度37℃条件下培养3~4天,弃掉诱导培养基,用PBS缓冲液洗净,分散酶37℃下孵育,观察克隆边缘与饲养层细胞分离后,吸取消化液,加入诱导培养基,从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞;用0.05%的胰酶在37℃的条件下消化,加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中,1000rpm离心5min,接种至新鲜的饲养层上,并更换转化培养基进行培养,直至出现圆拱形,类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。
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公开(公告)号:CN102634530B
公开(公告)日:2013-01-23
申请号:CN201210074432.8
申请日:2012-03-20
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种高表达赖氨酸的基因,属于生物工程技术领域。高表达赖氨酸的基因其核苷酸序列如SEQIDNO:1所述,该高表达赖氨酸的基因编码蛋白,其氨基酸序列如SEQIDNO:2所述。转基因小鼠奶中表达赖氨酸含量高的蛋白产物,使奶中赖氨酸含量显著提高。赖氨酸转基因小鼠的研究可以为我们进一步了解乳腺外源蛋白特别是本研究所选高赖氨酸含量外源蛋白的分泌机制,为转赖氨酸基因牛奶的研制奠定基础。
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公开(公告)号:CN112226404A
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN202010878659.2
申请日:2020-08-27
Applicant: 吉林大学第一医院
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及培养基组合物及促进动物胚胎体外发育的培养方法。本发明的优点在于能够显著提高猪体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)胚胎的体外发育效率。在正常的PZM‑3的胚胎培养液中的SCNT胚胎囊胚率是18%~20%,采用换液的方法可以显著提高猪SCNT的囊胚率到45.7%,同使用正常胚胎培养液PZM‑3的囊胚率相比,囊胚率提高了25.7%。同时,此方法还操作方便,只要在SCNT胚胎激活24~48h后从PZM‑3(‑)的培养基中换液到PZM‑3‑Glutamax中继续培养即可,操作简单方便,适宜后续应用。
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