公开(公告)号：CN111304157B

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202010181822.X

申请日：2020-03-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张学明 ,  姜禹 ,  李子义 ,  朱文倩 ,  蔡宁宁 ,  汪正铸 ,  安星兰 ,  杨蕊

IPC: C12N5/074

Abstract: 一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法，属于干细胞培养领域，将牛诱导多能干细胞在含有5％二氧化碳，温度37℃条件下培养3～4天，弃掉诱导培养基，用PBS缓冲液洗净，分散酶37℃下孵育，观察克隆边缘与饲养层细胞分离后，吸取消化液，加入诱导培养基，从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞；用0.05％的胰酶在37℃的条件下消化，加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中，1000rpm离心5min，接种至新鲜的饲养层上，并更换转化培养基进行培养，直至出现圆拱形，类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。

公开(公告)号：CN111304157A

公开(公告)日：2020-06-19

申请号：CN202010181822.X

申请日：2020-03-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张学明 ,  姜禹 ,  李子义 ,  朱文倩 ,  蔡宁宁 ,  汪正铸 ,  安星兰 ,  杨蕊

IPC: C12N5/074

Abstract: 一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法，属于干细胞培养领域，将牛诱导多能干细胞在含有5％二氧化碳，温度37℃条件下培养3～4天，弃掉诱导培养基，用PBS缓冲液洗净，分散酶37℃下孵育，观察克隆边缘与饲养层细胞分离后，吸取消化液，加入诱导培养基，从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞；用0.05％的胰酶在37℃的条件下消化，加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中，1000rpm离心5min，接种至新鲜的饲养层上，并更换转化培养基进行培养，直至出现圆拱形，类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。